Saltar al contenido
Merck

High-Throughput Screening Strategy Identifies Allosteric, Covalent Human D-Amino Acid Oxidase Inhibitor.

Journal of biomolecular screening (2015-08-25)
Ryan T Terry-Lorenzo, Keiki Masuda, Kohtaroh Sugao, Q Kevin Fang, Michael A Orsini, Silvia Sacchi, Loredano Pollegioni
RESUMEN

Genome-wide association studies have linked polymorphisms in the gene G72 to schizophrenia risk in several human populations. Although controversial, biochemical experiments have suggested that the mechanistic link of G72 to schizophrenia is due to the G72 protein product, pLG72, exerting a regulatory effect on human D-amino acid oxidase (hDAAO) activity. In an effort to identify hDAAO inhibitors of novel mechanism of action, we designed a pLG72-directed hDAAO activity assay suitable for high-throughput screening (HTS). During assay development, we confirmed that pLG72 was an inhibitor of hDAAO. Thus, our assay employed an IC20 pLG72 concentration that was high enough to allow dynamic pLG72-hDAAO complexes to form but with sufficient remaining hDAAO activity to measure during an HTS. After conducting an approximately 150,000-compound HTS, we further characterized a class of compound hits that were less potent hDAAO inhibitors when pLG72 was present. Focusing primarily on compound 2: [2-(2,5-dimethylphenyl)-6-fluorobenzo[d]isothiazol-3(2H)-on], we demonstrated that these compounds inhibited hDAAO via an allosteric, covalent mechanism. Although there is significant interest in the therapeutic potential of compound 2: and its analogues, their sensitivity to reducing agents and their capacity to bind cysteines covalently would need to be addressed during therapeutic drug development.

MATERIALES
Referencia del producto
Marca
Descripción del producto

Sigma-Aldrich
Dimetilsulfóxido, Hybri-Max, sterile-filtered, BioReagent, suitable for hybridoma, ≥99.7%
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Dimetilsulfóxido, ACS reagent, ≥99.9%
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Dimetilsulfóxido, for molecular biology
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Dimetilsulfóxido, sterile-filtered, BioPerformance Certified, meets EP, USP testing specifications, suitable for hybridoma
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Peróxido de hidrógeno solution, contains inhibitor, 30 wt. % in H2O, ACS reagent
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Dimetilsulfóxido, ReagentPlus®, ≥99.5%
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Peróxido de hidrógeno solution, 30 % (w/w) in H2O, contains stabilizer
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Dimetilsulfóxido, ≥99.5% (GC), suitable for plant cell culture
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Cloruro de sodio, for molecular biology, DNase, RNase, and protease, none detected, ≥99% (titration)
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Dimetilsulfóxido, puriss. p.a., ACS reagent, ≥99.9% (GC)
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Peróxido de hidrógeno solution, 50 wt. % in H2O, stabilized
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Sodium chloride solution, 0.9% in water, BioXtra, suitable for cell culture
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Cloruro de sodio, BioReagent, suitable for cell culture, suitable for insect cell culture, suitable for plant cell culture, ≥99%
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Sodium chloride solution, 5 M in H2O, BioReagent, for molecular biology, suitable for cell culture
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
L-Glutatión reducido, suitable for cell culture, BioReagent, ≥98.0%, powder
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
SAFC
Sodium chloride solution, 5 M
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Dimetilsulfóxido, BioUltra, for molecular biology, ≥99.5% (GC)
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Cloruro de sodio, JIS special grade, ≥99.5%
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Sodium chloride solution, BioUltra, for molecular biology, ~5 M in H2O
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Peróxido de hidrógeno solution, contains inhibitor, 35 wt. % in H2O
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Cloruro de sodio, 99.999% trace metals basis
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Peróxido de hidrógeno solution, contains ~200 ppm acetanilide as stabilizer, 3 wt. % in H2O
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Cloruro de sodio, BioUltra, for molecular biology, ≥99.5% (AT)
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Peróxido de hidrógeno solution, purum p.a., ≥35% (RT)
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Dimetilsulfóxido, PCR Reagent
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Dimetilsulfóxido, puriss. p.a., dried, ≤0.02% water
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
D-Serine, ≥98% (TLC)
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Cloruro de sodio, SAJ first grade, ≥99.0%
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Resorufin, 95%
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Dimetilsulfóxido, anhydrous, ≥99.9%
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad