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Merck

N8630

Sigma-Aldrich

Nucleasa P1 from Penicillium citrinum

lyophilized powder, ≥200 units/mg protein (E1%/280, 3′-5′-Phosphodiesterase)

Sinónimos:

3′-fosfohidrolasa, Nucleasa 5′-nucleótido hidrolasa, Endonucleasa P1

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About This Item

Número de CAS:
Comisión internacional de enzimas:
Número MDL:
Código UNSPSC:
12352204
NACRES:
NA.54
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origen biológico

Penicillium citrinum

Nivel de calidad

Formulario

lyophilized powder

actividad específica

≥200 units/mg protein (E1%/280, 3′-5′-Phosphodiesterase)

secondary activity

≥1,000 units/mg protein 3′-nucleotidase

mol peso

42-50 kDa

envase

vial of ≥250 units (using RNA substrate)

técnicas

DNA extraction: suitable
DNA purification: suitable

idoneidad

suitable for molecular biology

aplicaciones

cell analysis

temp. de almacenamiento

2-8°C

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Descripción general

La nucleasa P1 es una de las nucleasas específicas de una sola cadena más conocidas en biología molecular; la nucleasa P1 es una endonucleasa específica de una sola cadena (de ssDNA o ssRNA). La nucleasa P1 también puede romper regiones monocatenarias en ácidos nucleicos bicatenarios.
La nucleasa P1 de Penicillium citrinum es una endonucleasa dependiente de zinc que muestra una mayor actividad en presencia de bajas concentraciones de urea. [1] La actividad selectiva de la nucleasa P1 ha encontrado aplicaciones útiles en estudios sobre la estructura de ácidos nucleicos.

Aplicación

  • La nucleasa P1 escinden el ADN o el ARN monocatenarios en 5′ mononucleótidos
  • La nucleasa P1 respalda la investigación de daños y modificaciones en el ADN
  • La composición de bases de los ácidos nucleicos y el análisis estructural puede realizarlos la nucleasa P1
  • La nucleasa P1 se ha utilizado históricamente para la producción industrial de 5′mononucleótidos a partir del ARN de la levadura.
  • La eliminación de ácidos nucleicos a través de la purificación de proteínas puede hacerla la nucleasa P1
  • La nucleasa P1 es un reactivo clave para el desarrollo de métodos para estudiar la biosíntesis de aminoácidos dependiente del t-ARN y la transamidación dependiente del t-RNA
  • La nucleasa P1 de Penicillium citrinum se ha utilizado en un estudio para evaluar las estructuras de cristal utilizando sulfato de amonio o polietilenglicol 4000 como precipitante.
  • La nucleasa P1 se utilizó en un estudio para investigar un método para el análisis de secuencia directa de 20-25 nucleótidos de los extremos 3′ o 5′ del ARN marcado en el grupo final.
  • La nucleasa P1 se utiliza para mejorar la sensibilidad de un método de marcaje con 32P para la detección de aductos de ADN.
La enzima tiene una temperatura óptima de aproximadamente 70°C, pero para una incubación larga, es más adecuada una temperatura por debajo de 60°C. Es estable en el intervalo de pH de 5 - 8.
La enzima tiene una temperatura óptima de aproximadamente 70 °C, pero para una incubación larga, es más adecuada una temperatura por debajo de 60 °C. Es estable en el intervalo de pH de 5 - 8.

Acciones bioquímicas o fisiológicas

Cataliza la escisión endonucleolítica inespecífica del ADN y el ARN monocatenarios para producir 5′-fosfatos de nucleósidos y 5′-fosfooligonucleótidos. No degrada apreciablemente los ácidos nucleicos de doble cadena, especialmente en presencia de cloruro sódico superior a 400 mM a pH 6,0.

Características y beneficios

Se ha probado la actividad fosfodiesterasa 3′- y 5′ y la actividad nucleotidasa 3′- en nuestra nucleasa P1 de gran actividad, y es la nucleasa P1 más activa del mercado.

Propiedades físicas

Glucoproteína dependiente del zinc que consta de 270 restos de aminoácidos. Masa molecular: 42 - 50 kDa.

Definición de unidad

3′-5′-fosfodiesterasa: Una unidad liberará 1,0 μmol de nucleótidos solubles en ácido del ARN por min a pH de 5,3 a 37 °C.
3′-nucleotidasa: Una unidad hidrolizará 1,0 μmol de ortofosfato del 3′-AMP por min a pH de 7,2 a 37 °C.

Pictogramas

Health hazard

Palabra de señalización

Danger

Frases de peligro

Consejos de prudencia

Clasificaciones de peligro

Resp. Sens. 1

Código de clase de almacenamiento

11 - Combustible Solids

Clase de riesgo para el agua (WGK)

WGK 3

Punto de inflamabilidad (°F)

Not applicable

Punto de inflamabilidad (°C)

Not applicable

Equipo de protección personal

Eyeshields, Gloves, type N95 (US)


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Questions

1–3 of 3 Questions  
  1. I have to prepare a 1mg/ml solution in ZnCl2. How can I do to convert the 200units/mg of nuclease P1 to mass?

    1 answer
    1. The minimum protein content for this product is 1 mg/vial. It is best to review the lot specific Certificate of Analysis prior to reconstitution as the vial content may be slightly higher that 1mg. The product may then be reconsituted in water to the desired concentration. Please see the links below to review the product datasheet and to access the corresponding Certificate:

      Product Datasheet
      https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/272/311/n8630pis-ms.pdf

      Certificate of Analysis
      https://www.sigmaaldrich.com/search

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  2. What is the Department of Transportation shipping information for this product?

    1 answer
    1. Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product.

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  3. Product N8630 (Nuclease P1 from Penicillium citrinum is a lyophilized powder. How should I store solutions of this enzyme?

    1 answer
    1. A solution of Nuclease P1 that has been reconstituted in 20 mM sodium acetate buffer (pH 5.3), 5 mM ZnCl2, and 50 mM sodium chloride can be stored for the short term at 2-8 °C for 2-3 weeks. For longer term storage, at -20 °C, one suggestion is to add 40-50% glycerol after reconstitution in the aqueous buffer. Such solutions (with glycerol added) may be stored for 3-6 months at -20 °C.

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