SCM015

Medio de expansión de células madre mesenquimatosas (1x)

The Mesenchymal Stem Cell Expansion Medium (1x) has been optimized & validated for Stem cell culture. This medium is available in a 500mL format.

• Sinónimos: MSC growth medium, Stem cell culture medium
• UNSPSC Code: 12352207
• eCl@ss: 32160801
• NACRES: NA.75

Propiedades

• Quality Level: 200
• form: liquid
• manufacturer/tradename: Chemicon^®
• technique(s): cell culture | stem cell: suitable
• input: sample type mesenchymal stem cell(s)
• shipped in: dry ice

Descripción

Application

Descongelación de células:

1. No descongele las células hasta tener a mano el medio recomendado y los artículos de plástico o de vidrio apropiados.
2. Retire del nitrógeno líquido el vial con las células madre mesenquimatosas e incúbelo en un baño María a 37°C. Controle muy de cerca hasta que las células estén completamente descongeladas. La viabilidad máxima de las células depende de la descongelación rápida y completa de las células congeladas. IMPORTANTE: no agite las células en Vórtex.
3. En cuanto las células estén completamente descongeladas, desinfecte el exterior del vial con etanol al 70 %. Proceda inmediatamente al siguiente paso.
4. En una campana de flujo laminar, utilice una pipeta de 1 o 2 ml para transferir las células a un tubo cónico estéril de 15 ml. Tenga cuidado de no introducir burbujas durante el proceso de transferencia.
5. Con una pipeta de 10 ml, añada lentamente gota a gota 9 ml de medio de expansión de células madre mesenquimatosas (precalentado a 37°C) al tubo cónico de 15 ml. IMPORTANTE: no añada todo el volumen de medio a la vez a las células. Esto puede producir una disminución de la viabilidad celular debido a un choque osmótico.
6. Mezcle con suavidad la suspensión celular pipeteando dos veces hacia arriba y hacia abajo lentamente. Tenga cuidado de no introducir burbujas. IMPORTANTE: no agite las células en Vórtex.
7. Centrifugue el tubo a 300 x g durante 2-3 minutos para que se depositen las células.
8. Decante la mayor cantidad posible de sobrenadante. Los pasos 4 a 8 son necesarios para eliminar el crioconservante residual (DMSO).
9. Resuspenda las células en un volumen total de 10 ml de medio de expansión de células madre mesenquimatosas (precalentado a 37°C).
10. Coloque la mezcla de células en una placa de cultivo de tejidos de 10 cm.
11. Incube las células a 37°C en un incubador humidificado con CO₂ al 5 %.
12. Al día siguiente, cambie el medio por medio de expansión de células madre mesenquimatosas reciente (precalentado a 37°C). Cambie por medio reciente cada dos o tres días a partir de entonces.
13. Cuando las células tengan una confluencia de aproximadamente el 80 %, pueden disociarse con Accutase^® y subcultivarse o congelarse para su uso posterior.

Subcultivo:

1. Retire cuidadosamente el medio de la placa de cultivo de tejidos de 10 cm que contiene la capa confluente de células madre mesenquimatosas.
2. Aplique 3-5 ml de Accutase e incube en una incubadora a 37°C durante 3 minutos.
3. Inspeccione la placa y asegúrese del desprendimiento completo de las células golpeando suavemente el lateral de la placa con la palma de la mano. 4. Aplique 5 ml de medio de expansión de células madre mesenquimatosas (precalentado a 37°C) a la placa.
5. Transfiera las células disociadas a un tubo cónico de 15 ml.
6. Centrifugue el tubo a 300 x g durante 2-3 minutos para que se depositen las células.
7. Descarte el sobrenadante
8. Aplique 2 ml de medio de expansión de células madre mesenquimatosas al tubo cónico y resuspenda bien las células. IMPORTANTE: No agite en Vórtex.
9. Cuente el número de células utilizando un hemocitómetro.
10. Coloque las células a la densidad deseada en los matraces, placas o pocillos apropiados en el medio de expansión de células madre mesenquimatosas. Normalmente colocamos ~2 millones de células por placa de 10 cm o matraz T75.

Quality

Se comprueba el crecimiento celular y la proliferación óptimos de las células madre mesenquimatosas en cada lote de medio. Ensayos de esterilidad: Negativo

Physical form

El medio de expansión de células madre mesenquimatosas es una formulación patentada que contiene suero fetal bovino.

Storage and Stability

El medio de expansión de células madre mesenquimatosas debe conservarse a -20°C hasta que vaya a utilizarse Tras su descongelación, el medio basal debe conservarse a 2-8°C durante un máximo de un mes.

Legal Information

Accutase is a registered trademark of Innovative Cell Technologies, Inc.

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

Salvo que se indique lo contrario en nuestro catálogo o en otra documentación de la empresa que acompañe al producto, nuestros productos están indicados sólo para investigación y no deben utilizarse para ningún otro propósito, como, entre otros, usos comerciales no autorizados, diagnóstico in vitro, usos terapéuticos ex vivo o in vivo o cualquier tipo de consumo o aplicación en humanos o animales.

Información de seguridad

• Storage Class: 12 - Non Combustible Liquids
• wgk_germany: WGK 1
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable