MABE1084

Anticuerpo anti-complejos covalentes topoisomerasa I-ADN, clon 1,1A

clone 1.1A, from mouse

• Sinónimos: Topoisomerase I-DNA covalent complex, DNA topoisomerase 1-DNA covalent complex, Topo I-DNA covalent complex, TopoI cc, TopoIcc
• UNSPSC Code: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Propiedades

• biological source: mouse
• Quality Level: 100
• antibody form: purified antibody
• antibody product type: primary antibodies
• clone: 1.1A, monoclonal
• species reactivity: human, mouse
• technique(s): ELISA: suitable; dot blot: suitable; flow cytometry: suitable; immunocytochemistry: suitable
• isotype: IgG2bκ
• NCBI accession no.: NP_003277.1
• UniProt accession no.: P11387
• shipped in: wet ice
• target post-translational modification: unmodified
• Gene Information: human ... TOP1(7150)

Descripción

General description

La ADN topoisomerasa 1 (EC 5.99.1.2; UniProt P11387; también conocida como ADN topoisomerasa I, Topo I) está codificada por el gen TOP1 (también conocido como TOPI) (ID del gen 7150) en humanos. La topo I relaja la tensión torsional del ADN bicatenario (dsDNA) mellando una hebra del dsDNA para permitir la rotación del extremo 3′-hidroxi mellado alrededor de la cadena no mellada, mientras que el extremo 5′-fosforil del ADN mellado forma un enlace fosfodiéster covalente con un residuo de tirosina en la Topo I. El extremo 3′-hidroxi mellado ataca entonces el enlace fosfoéster ADN-enzima para volver a unir la cadena de ADN mellada. Durante cada ronda de mellado y resellado catalizada por la Topo I se elimina una superhélice. Las camptotecinas se utilizan mucho para el tratamiento del cáncer. Estos medicamentos se intercalan en el ADN en el sitio activo de la topo l, inhibiendo la etapa de re-unión de la cadena por la enzima y desplazando el equilibrio hacia los complejos topo l-ADN covalentes en lugar de a la topo l y el ADN libres. La interacción de estos complejos covalentes topo I-ADN estabilizados con fármacos, con horquillas de replicación o complejos de transcripción avanzados, causan un ulterior daño al ADN y la eventual muerte celular.

Specificity

El clon 1.1A reconoce específicamente la topoisomerasa I (Topo I) en complejos covalentes con ADN, pero no cuando no la Topo I libre no complejada ADN, mediante la detección de la fosforilación del sitio activo Tyr723 de topoisomerasa I (Patel, A.G., et al, (2016). 44(6):2816-2826).

Immunogen

Epítopo: Topo I pTyr723.

Péptido lineal conjugado con KLH que corresponde a la secuencia del sitio diana de la Topo I humana con Tyr723 fosforilada.

Application

Análisis mediante citometría de flujo: 1,0 µg de este anticuerpo de un lote representativo detectó complejos topoisomerasa I/ADN covalentes en células de cáncer de colon humano HCT116 tratadas con topotecán.

Análisis mediante inmunocitoquímica: 10 µg/ml de un lote representativo detectaron los complejos covalentes de topoisomerasa I/ADN en células de carcinoma pulmonar humano A549 tratadas con topotecán (cortesía del Dr. Scott H. Kaufmann, Mayo Clinic, Rochester, MN).

Análisis mediante citometría de flujo: 10 µg/ml de un lote representativo detectaron complejos covalentes de topoisomerasa I/ADN en células de cáncer de colon humano HCT116 tratadas con topotecán (cortesía del Dr. Scott H. Kaufmann, Mayo Clinic, Rochester, MN).

Análisis mediante inmunotransferencia por puntos: un lote representativo detectó los complejos covalentes de topoisomerasa I/ADN estabilizados con topotecán/TPT, pero no la topoisomerasa I libre (sin formar complejo con el ADN) mediante inmunotransferencia por ranuras utilizando lisados fraccionados en gradiente de CsCl2 de células A549 tratadas y no tratadas con TPT (Patel, A.G. et al, (2016). 44(6):2816-2826).
Análisis mediante inmunoelectrotransferencia por ranuras: un lote representativo detectó un aumento dependiente de la dosis de topotecán (TPT) de los complejos covalentes de topoisomerasa I/ADN estabilizados con TPT en lisados de células A549 y HCT116 tratadas con TPT mediante inmunotransferencia por ranuras (Patel, A.G., et al, (2016). 44(6):2816-2826).
Análisis mediante inmunoelectrotransferencia por ranuras: un lote representativo detectó complejos covalentes de topoisomerasa I/ADN estabilizados en lisados de células A549 tratadas con camptotecinas (CPT, SN-38, TPT) o indenoisoquinolinas (NSC 314622, NSC 725776, NSC 743400), pero no con análogos de nucleósidos (citarabina y gemcitabina) (Patel, A.G., et al, (2016). 44(6):2816-2826).
Análisis mediante ELISA: un lote representativo detectó el péptido inmunógeno que corresponde a la secuencia del sitio activo de la topoisomerasa I con Tyr723 fosforilada, pero no el péptido con la Tyr273 no fosforilada mediante ELISA directo (no sándwich) (Patel, A.G., et al, (2016). 44(6):2816-2826).
Análisis mediante inmunocitoquímica: un lote representativo detectó un aumento dosis-dependiente de loci no nucleolares del complejo covalente de topoisomerasa I/ADN en células A549 tratadas con topotecán/TPT, mientras que el pequeño número de loci en las células no tratadas se observó sólo en los nucleólos (Patel, A.G. et al, (2016). 44(6):2816-2826).
Análisis mediante inmunocitoquímica: un lote representativo detectó una formación temporal y espacialmente distinta de loci nucleares de complejos covalentes de topoisomerasa I/ADN con respecto a la fosfo-H2AX y Rad51 en células A549 tratadas con topotecán/TPT (Patel, A.G. et al, (2016). 44(6):2816-2826).

Categoría de investigación
Epigenética y función nuclear

El anticuerpo anti-complejos covalentes topoisomerasa I-ADN, clon 1,1A, es un anticuerpo contra los complejos covalentes de topoisomerasa I-ADN para utilizar en inmunocitoquímica, citometría de flujo, inmunotransferencia por puntos, ELISA.

Subcategoría de investigación
Biología de la cromatina

Quality

Evaluada por inmunocitoquímica en células de carcinoma de pulmón humano A549 tratadas con topotecán.

Análisis inmunocitoquímico: 10 µg/ml de este anticuerpo detectaron los complejos covalentes de topoisomerasa I-ADN en células de carcinoma pulmonar humano A549 tratadas con topotecán.

Target description

90,7 kDa calculados.

Physical form

IgG2bκ de ratón purificada en tampón que contiene Tris-glicina 0,1 M (pH 7,4), NaCl 150 mM con azida sódica al 0,05 %.

Presentación: Purificada

Proteína G purificada.

Storage and Stability

Estable durante 1 año a 2-8°C desde la fecha de recepción.

Other Notes

Concentración: Consulte la ficha técnica específica del lote.

Disclaimer

Salvo que se indique lo contrario en nuestro catálogo o en otra documentación de la empresa que acompañe al producto, nuestros productos están indicados sólo para investigación y no deben utilizarse para ningún otro propósito, como, entre otros, usos comerciales no autorizados, diagnóstico in vitro, usos terapéuticos ex vivo o in vivo o cualquier tipo de consumo o aplicación en humanos o animales.

Información de seguridad

• Storage Class: 12 - Non Combustible Liquids
• wgk_germany: WGK 1
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable