07-424

Anticuerpo anti-fosfo-histona H3 (Thr3)

Upstate^®, from rabbit

• Sinónimos: H3T3P, Histone H3 (phospho T3)
• UNSPSC Code: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Propiedades

• biological source: rabbit
• Quality Level: 100
• antibody form: unpurified
• antibody product type: primary antibodies
• clone: polyclonal
• species reactivity: mouse, human
• manufacturer/tradename: Upstate^®
• technique(s): immunocytochemistry: suitable; inhibition assay: suitable; western blot: suitable
• NCBI accession no.: NM_003493
• UniProt accession no.: Q16695
• shipped in: dry ice
• target post-translational modification: phosphorylation (pThr3)
• Gene Information: human ... H3C1(8350)

Descripción

General description

La histona H3.1t (UniProt: Q16695; también conocida como H3/t, H3t, H3/g) está codificada por el gen HIST3H3 (también conocido como H3FT) (ID del gen: 8290) en humanos. Las histonas son proteínas nucleares básicas muy conservadas que son responsables de la estructura del nucleosoma de la cromatina en los eucariotas. Desempeñan un papel central en la regulación de la transcripción, la reparación del ADN, la replicación del ADN y la estabilidad cromosómica. Dos moléculas de cada una de las cuatro histonas centrales (H2A, H2B, H3 y H4) forman un octámero, alrededor del cual se enrolla el ADN en unidades repetidas, denominadas nucleosomas, lo que limita la accesibilidad al ADN de la maquinaria celular que requiere ADN como plantilla. La histona H3 cuenta con un dominio globular principal y una larga cola N-terminal, que sobresale del centro del nucleosoma globular y puede experimentar varios tipos diferentes de modificaciones epigenéticas que influyen en los procesos celulares. Las colas N-terminales de las histonas están sujetas a modificaciones postraduccionales, como fosforilación, acetilación y metilación, que reclutan factores reguladores posteriores, influyen en la estructura de la cromatina y son determinantes cruciales de la transcripción. La histona H3 puede experimentar acetilación en varios restos de lisina de la cola de la histona a través de las histonas acetiltransferasas. La acetilación se asocia generalmente con la actividad transcripcional y la metilación de los residuos de lisina y arginina puede activarse o reprimirse dependiendo del residuo modificado. La trimetilación de la histona H3 es una de las marcas epigenéticas más estudiadas. Se ha comunicado que las modificaciones de H3K4me3 se producen de manera uniforme en los sitios de inicio de la transcripción, y el dominio H3K4me3 se asocia con una mayor actividad transcripcional e identidad celular en el desarrollo previo a la implantación y en el proceso de derivación de las células madre embrionarias de la masa celular interna y las células madre trofoblásticas del trofectodermo. La histona H3 es fosforilada en la treonina 4 (H3T3ph) por la proteína cinasa asociada a la histona H3 (HASPIN) durante la profase y es desfosforilada durante la anafase, y la fosforilación en la serina 11 (H3S10ph) por Aurora cinasa B es crucial para la condensación cromosómica y la progresión del ciclo celular durante la mitosis y la meiosis. (Ref.: Sharifi-Zarchi, A., et al. (2017). BMS Genomics. 18; Article 964; Liu, X., et al. (2016). Nature. 537(7621); 558-562).

Specificity

Este anticuerpo policlonal de conejo detecta la histona H3 fosforilada en la treonina 3.

Immunogen

Péptido lineal conjugado con KLH que corresponde a 13 aminoácidos que rodean la fosfotreonina 3 de la histona humana H3.

Application

Pruebas de control de calidad

Evaluada mediante transferencia western en extracto ácido de células HeLa tratadas con colcemid.Análisis mediante inmunoelectrotransferencia (WB): una dilución 1:5 000 de este anticuerpo detectó la fosfohistona H3 (Thr3) en extracto ácido de células HeLa tratadas con colcemid (50 ng/ml, durante la noche), pero no la proteína histona H3 recombinante.


Aplicaciones probadasAnálisis de inhibición del péptidos: se evitó la detección de la banda deseada en extracto ácido de células HeLa tratadas con colcemid (50 ng/ml; durante la noche) mediante el prebloqueo de un lote representativo con el fosfopéptido inmunógeno, pero no con el péptido histona H3 no fosforilada. Análisis mediante inmunocitoquímica: una dilución 1:500 de un lote representativo detectó la fosfohistona H3 (Thr3) en células NIH3T3. Nota: El usuario debe determinar las diluciones de trabajo óptimas ya que las muestras y las condiciones experimentales pueden variar con el usuario final.

Quality

Evaluada habitualmente por inmunotransferencia en proteínas extraídas con ácido de células HeLa mitóticas

Target description

~17 kDa observados; 15,51 kDa calculados. En algunos lisados pueden observarse bandas no caracterizadas.

Physical form

Inmunodeprimido

Presentación: Sin purificar

Suero de conejo inmunodeprimido con azida sódica al 0,05 % y glicerol al 30 %.

Storage and Stability

Conservar a -10°C a -25°C. Recomendaciones de manipulación: Tras su recepción, y antes de quitar la tapa, centrifugue el vial y mezcle suavemente la disolución. Distribúyalo en alícuotas en tubos de microcentrífuga y guárdelo a -20°C. Evite ciclos repetidos de congelación y descongelación que pueden dañar la IgG y afectar al rendimiento del producto.

Analysis Note

Control
Extracto ácido de células HeLa tratadas con Colcemid

Legal Information

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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