The Kunitz unit was created to reflect the non-linear nature of the RNAse enzymatic reaction. As the reaction progresses the activity changes due to RNA as a heterogeneous polymeric substrate; therefore, the unit of moles or micomoles per minute becomes inaccurate. As such, our enzymatic assay describes a unit that varies throughout the reaction: One unit will cause a decrease of 100% per minute in the value of E0 - Ef at pH 5.0 at 25°C. Ef is determined in the RNAse control step, while E0 reflects the current reaction rate.
R6513
Ribonucleasa A from bovine pancreas
Ribonuclease A from bovine pancreas
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for molecular biology, ≥70 Kunitz units/mg protein, lyophilized
Sinónimos:
ARNasa, ARNasa A, Ribonucleasa pancreática, Ribonucleato 3′-pirimidinooligonucleotidohidrolasa
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grade
for molecular biology
Quality Level
form
lyophilized
specific activity
≥70 Kunitz units/mg protein
mol wt
13.7 kDa
~13,700
foreign activity
Exonuclease and endonuclease, none detected
NICKase and DNase, none detected
storage temp.
−20°C
SMILES string
[nH]1cnc(c1)CC(NC(=O)CCN)C(=O)O
InChI
1S/C9H14N4O3/c10-2-1-8(14)13-7(9(15)16)3-6-4-11-5-12-6/h4-5,7H,1-3,10H2,(H,11,12)(H,13,14)(H,15,16)
InChI key
CQOVPNPJLQNMDC-UHFFFAOYSA-N
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General description
La ARNasa A es una cadena polipeptídica única que contiene 124 aminoácidos unidos por cuatro puentes disulfuro.[1] Al contrario que la ARNasa B, la ARNasa A no es una glucoproteína. La ARNasa A puede ser inhibida por alquilación de la His12 o His119, que están presentes en el sitio activo de la enzima. Entre los activadores de la ARNasa A se cuentan las sales de potasio y de sodio.
La ARNasa A es una endorribonucleasa que ataca al fosfato 3′ OH de un nucleótido de pirimidina. Se escindirá la secuencia pG-pG-pC-pA-pG para dar pG-pG-pCp y A-pG. La mayor actividad la exhibe con ARN monocatenario.
La ARNasa, ribonucleasa A, es una endorribonucleasa que escinde los enlaces fosfodiéster del ARN monocatenario después de nucleótidos de pirimidina. Ataca el extremo 3′ fosfato (por ejemplo, el pG-pG-pC-pA-pG será escindido para dar pG-pG-pCp y A-pG). La mayor actividad la exhibe con ARN monocatenario. La ARNasa A es un polipéptido monocatenario que contiene cuatro puentes bisulfuro. Al contrario que la ARNasa B, no es una glucoproteína. Las ribonucleasas no hidrolizan el ADN porque el ADN carece de los grupos 2′-OH esenciales para la formación de los intermediarios cíclicos. La ARNasa A también puede hidrolizar el ARN de las muestras proteicas. La ARNasa A puede ser inhibida por alquilación de la His12 o la His119 y activada por sales de potasio y de sodio. La RNAasa se inhibe en presencia de iones de los metales pesados. La ARNasa también es inhibida competitivamente por el ADN.
Application
- La ribonucleasa A se utiliza para eliminar el ARN de las preparaciones de ADN plasmídico y ADN genómico, y de las muestras de proteínas.
- La ARNasa se utiliza también en el análisis de la secuencia del ARN y en los análisis de protección.
- La RNasa A se ha utilizado como herramienta para el diseño de medicamentos asistido por ordenador.
- La ARNasa A contribuye al análisis de las secuencias de ARN.
- La ARNasa A hidroliza el ARN contenido en las muestras proteicas.
- La ARNasa A apoya la purificación del ADN.
La ribonucleasa A del páncreas bovino se ha utilizado:
- para purificación del ADN plasmídico
- para digerir y evitar la tinción del ARN de doble cadena durante la tinción de núcleos[2]
- en la detección mediante inmunoperoxidasa e inmunofluorescencia[3]
- para tratar las células antes de la citometría de flujo
- como componente del tampón de poshibridación para lavar los cortes de tejido FFPE después de la hibridación in situ[4]
- para tratar las células durante la preparación de los extractos proteicos de la membrana externa (OMP)[5]
- Ensayos de protección de ARNasa
- Eliminación del ARN unido de manera inespecífica
- Análisis de las secuencias de ARN
- Hidrólisis del ARN contenido en las muestras proteicas
Features and Benefits
Nuestra muy estable ribonucleasa A, ARNasa A, es idónea para la eliminación del ARN, la secuenciación del ARN y la purificación del ADN.
Analysis Note
Proteína determinada mediante E.
Other Notes
Entre los activadores de la ARNasa A se cuentan las sales de potasio y de sodio. La ARNasa A puede inhibirse por alquilación de la His12 o la His119.
Una aplicación principal de la ARNasa A es eliminar el ARN de las preparaciones de ADN plasmídico. Para esta aplicación, se utiliza ADNasa exenta de ARNasa A a una concentración final de 10 μg/ml.
No es necesario hervir las disoluciones de reserva de esta ARNasa A para inactivar la ADNasa residual. Además puede provocar precipitación de la ARNasa y posible pérdida de actividad enzimática Si una disolución de ARNasa A se calienta a un pH neutro, se producirá precipitación. Cuando se calienta a un pH inferior, puede ocurrir algo de precipitación debido a las impurezas proteicas presentes.
No es necesario hervir las disoluciones de reserva de esta ARNasa A para inactivar la ADNasa residual. Además puede provocar precipitación de la ARNasa y posible pérdida de actividad enzimática Si una disolución de ARNasa A se calienta a un pH neutro, se producirá precipitación. Cuando se calienta a un pH inferior, puede ocurrir algo de precipitación debido a las impurezas proteicas presentes.
Application
Referencia del producto
Descripción
Precios
inhibitor
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signalword
Danger
hcodes
pcodes
Hazard Classifications
Resp. Sens. 1
Storage Class
11 - Combustible Solids
wgk_germany
WGK 3
flash_point_f
Not applicable
flash_point_c
Not applicable
ppe
Eyeshields, Gloves, type N95 (US)
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Protocolos
This procedure may be used for determination of Ribonuclease A (RNase A) activity.
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Why is RNase A activity not listed as micromoles per minute, and what is a Kunitz unit?
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What working concentration of Product R6513, Ribonuclease A from bovine pancreas (RNase A), do you suggest?
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We suggest using RNase A at a concentration of 10 ug/ml.
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Do I need to boil Product R6513, Ribonuclease A from bovine pancreas (RNase A), to inactivate residual DNases?
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Boiling of stock solutions to inactivate residual DNase is not necessary and may cause precipitation of RNase with loss of enzymatic activity.
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What is the solubility of Product R6513, Ribonuclease A from bovine pancreas (RNase A)?
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Stock solutions of RNase A can be made in 10 mM Tris-HCl, pH 7.5, 15 mM NaCl at a concentration of 10 mg/mL.
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How are solutions of Product R6513, Ribonuclease A from bovine pancreas (RNase A), stored?
1 answer-
RNase A solutions can be stored, aliquoted and frozen at -20 °C.
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What is the shelf life of Product R6513, Ribonuclease A from bovine pancreas (RNase A)?
1 answer-
This product is stable for at least 3 years when stored properly at -20 °C.
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What is the Department of Transportation shipping information for this product?
1 answer-
Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product.
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