Yes, Tris buffers should work.
P6611
Gel de afinidad de níquel HIS-Select®
HIS-Select® Nickel Affinity Gel
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(1:1 suspension in a 20% ethanol solution)
Sinónimos:
Ni-NTA resin, nickel charged agarose
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About This Item
Código UNSPSC:
12352200
NACRES:
NA.56
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Productos recomendados
conjugado
magnetic beads
Nivel de calidad
Formulario
(1:1 suspension in a 20% ethanol solution)
Características
hydrophilic
envase
pkg of 1 mL
pkg of 100 mL
pkg of 25 mL
pkg of 5 mL
pkg of 500 mL
concentración
1.5-2.4 mL/mL (suspension in packed gel)
técnicas
protein purification: suitable
color
faint blue to very dark blue
Matriz
6% Beaded Agarose
capacidad
>15 mg/mL, gel binding capacity (protein)(with an approx. 30 kDa protein)
temperatura de transición
flash point 32 °C (closed cup)
temp. de almacenamiento
2-8°C
Descripción general
El gel de afinidad de níquel HIS-Select® es un producto de cromatografía de afinidad por iones metálicos inmovilizados (IMAC), utilizado para la purificación de proteínas etiquetadas con His. Si bien el exclusivo enlace hidrófilo no cargado del grupo quelato NTA cuatridentado patentado con las microesferas de agarosa cargadas con níquel asegura una gran selectividad para la purificación de proteínas etiquetadas con His a pequeña y mediana escala, también tiene como consecuencia una menor unión inespecífica de otras proteínas. EL gel de afinidad de níquel HIS-Select es selectivo para las proteínas recombinantes con etiquetas de His y muestra una baja unión inespecífica de otras proteínas. La selectividad puede modularse con la inclusión de imidazol durante la cromatografía.
Aplicación
El gel de afinidad de níquel HIS-Select® se ha utilizado en la purificación de proteínas recombinantes como la proteína de unión al calcio con mano EF (S100A14),[1] el factor de transcripción 1 alfa de homeosecuencia LIM[2] y el receptor sigma-1[3] , así como la harpin,[4] la proteína estable 1 (SP1)[5][6] la proteína de fusión BCR-ABL.[7]
Características y beneficios
- Gran selectividad para una mayor pureza.
- El exclusivo enlace hidrófilo sin carga reduce la unión inespecífica.
- La capacidad de unión de la proteína etiquetada con histidina es superior a 15 mg/ml.
- Unión en condiciones desnaturalizantes o no desnaturalizantes.
- Purificación en un solo paso.
- Minimiza las interacciones iónicas no deseadas.
- Mínima lixiviación del níquel.
- Tamaño de la microesfera: 45 - 165 μm.
Ligadura / enlace
Está también disponible con la tecnología EZview™ (código de producto E3528).
Forma física
Suspensión 1:1 en una disolución de etanol al 20%
Almacenamiento y estabilidad
El gel de afinidad de níquel HIS-Select es estable como mínimo durante un año cuando se almacena correctamente. El gel de afinidad de níquel HIS-Select debe limpiarse después de cada uso y añadirse un antimicrobiano como el etanol al 20 % al tampón de almacenamiento.
Información legal
HIS-Select is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Producto relacionado
Referencia del producto
Descripción
Precios
Palabra de señalización
Warning
Frases de peligro
Consejos de prudencia
Clasificaciones de peligro
Flam. Liq. 3
Código de clase de almacenamiento
3 - Flammable liquids
Clase de riesgo para el agua (WGK)
WGK 3
Punto de inflamabilidad (°F)
89.6 °F - closed cup
Punto de inflamabilidad (°C)
32 °C - closed cup
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Can Tris buffers be used instead of phosphate buffer for HIS-Select® Nickel Affinity Gel, Product P6611?
1 answer-
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Can imidazole be used with HIS-Select® Nickel Affinity Gel, Product P6611?
1 answer-
For column chromatography, no more than 20 mM is suggested in the extract, equilibration, and wash buffers to prevent non-specific binding of proteins. No more than 250 mM is suggested for the elution buffers. Many proteins will elute with imidazole levels as low as 100 to 200 mM. For batch methods the imidazole concentration may have to be reduced or eliminated.When a protein is expressed at low levels, the presence of the imidazole limits the binding of the protein in the batch method but not when used in a column.
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What is the Department of Transportation shipping information for this product?
1 answer-
Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product.
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What needs to be done if the HIS-Select® Nickel Affinity Gel, Product P6611, resin turns brown on reuse?
1 answer-
During purification many protein extracts tend to discolor an affinity gel during the loading step. The original color will return after the wash or elution step. If the color is still not changing strip and recharge the affinity gel with nickel. Wash with EDTA and recharge with Nickel solution.
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Can I use SDS with HIS-Select® Nickel Affinity Gel, Product P6611?
1 answer-
0.1% SDS has been used with some samples, with no adverse effects on the observed protein binding. However, SDS will effectively coat proteins and may block the binding to the column. It is probably very protein-specific and an SDS concentration that works for one protein may not work for another.
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Why won't my recombinant protein with a histidine-containing tag bind to HIS-Select® Nickel Affinity Gel, Product P6611?
1 answer-
Verify the pH and composition of sample and equilibration buffers. Make sure there are no chelating or reducing agents present in the extraction buffer. If using the batch mode, remove imidazole. Run the affinity purification under denaturing conditions. Run a Western blot of the extract to verify that the recombinant protein is present.
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