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Merck

11093274910

Roche

Anti-digoxigenina-AP, Fragmentos Fab

from sheep

Sinónimos:

antidigoxigenina, digoxigenina

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About This Item

UNSPSC Code:
12352203

biological source

sheep

Quality Level

conjugate

alkaline phosphatase conjugate

antibody form

purified immunoglobulin

antibody product type

primary antibodies

clone

polyclonal

form

solution

packaging

pkg of 200 μL (150 U)

manufacturer/tradename

Roche

isotype

IgG

storage temp.

2-8°C

General description

La digoxigenina es un hapteno útil en el marcaje y la detención de los ácidos nucleicos. Este producto contiene fragmentos Fab de anticuerpos anti-digoxigenina policlonales conjugados con fosfatasa alcalina. Los fragmentos Fab anti-digoxigenina-AP son útiles para la detección de compuestos marcados con digoxigenina.

Specificity

El anticuerpo policlonal de oveja es específico para la digoxigenina y la digoxina, y no muestra reactividad cruzada con otros esteroides, como los estrógenos y los andrógenos humanos.
Inactivación por calor:

Application

Utilice los fragmentos Fab anti-digoxigenina-AP para la detección de compuestos marcados con digoxigenina empleando:
  • matrices de ADNc
  • Hibridación de colonias/en placa
  • Inmunotransferencia por puntos (dot blot)
  • ELISA
  • Análisis de retardo en gel
  • Inmunohistocitoquímica
  • Hibridación in situ
  • Secuenciación de ADN no radiactiva mediante inmunotransferencia
  • Inmunotransferencia Northern
  • Ensayos de protección de ARNasa
  • Inmunotransferencia Southern
  • Inmunotransferencia Western
  • Hibridación in situ fluorescente
  • Hibridación in situ de sección y de montaje completo
  • Análisis de retardo de movilidad electroforética

Preparation Note

Después de la inmunización con digoxigenina, se purificó la IgG de oveja mediante cromatografía de intercambio iónico, y la IgG específica se aisló mediante inmunoadsorción. Los fragmentos Fab obtenidos mediante digestión con papaína se unificaron por filtración en gel, se conjugaron con el marcaje específico y se estabilizaron en disolución tampón.
Concentración de trabajo: La concentración de trabajo del conjugado dependerá de la aplicación y del sustrato. Las siguientes concentraciones deben tomarse como pauta:
  • Inmunotransferencia por puntos (dot blot): 150 mU/ml
  • ELISA: de 150 a 300 mU/ml
  • Inmunohistocitoquímica: de 250 a 500 mU/ml
  • Hibridación in situ: de 1,5 a 7,5 U/ml
  • Inmunotransferencia Southern: 150 mU/ml
  • Inmunotransferencia Western: de 250 a 500 mU/ml

Disolución de trabajo: Inmunotransferencia Northern, inmunotransferencia Southern
Ácido maleico 100 mM, NaCl 150 mM, pH 7,5.
Inmunotransferencia Western
Tris-HCl 50 mM, NaCl 150 mM, pH 7,5
otras aplicaciones
Tris-HCl 100 mM, NaCl 150 mM, pH 7,5

Para reducir la unión inespecífica pueden utilizarse reactivo bloqueante al 1% (p/v), suero fetal bovino inactivado por calor al 1-5% (v/v) o suero normal de oveja .
Condiciones de almacenamiento (disolución de trabajo): El conjugado diluido es estable entre 2 y 8 °C durante 12 horas.
Preparar siempre fresco.

Analysis Note

  • Reactividad cruzada con digitoxina y digitoxigenina: <1 %
  • Sin reactividad cruzada con otros estrógenos o esteroides androgénicos humanos,por ejemploestradiol o testosterona
  • Reactividad cruzada con digoxina: no conocida
  • El conjugado no se une a sí mismo en absoluto
  • Normalmente una molécula del conjugado se une a una molécula de digoxigenina, aunque hay dos posibles sitios de unión para digoxigenina
  • No se prevé unión inespecífica al ARN

Other Notes

Sólo para investigación en ciencias de la vida. No indicada para procedimientos diagnósticos.

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