Benzonase can be inactivated through various methods such as treatment with NaOH, EDTA and warming with EDTA at 70°C, or guanidine HCl. However, it is important to note that a guanidine HCl concentration exceeding 100 mM can completely inhibit the enzyme activity. Additionally, while an EDTA concentration of 1mM partially inhibits Benzonase endonuclease, a concentration of 5 mM EDTA leads to a loss of over 90% of enzyme activity due to the complexing of the essential Mg2+ ions.
70746
Benzonase® Nuclease
Purity > 99%
Sinónimos:
Endonucleasas from Serratia marcescens
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About This Item
Número de CAS:
MDL number:
UNSPSC Code:
12352202
NACRES:
NA.54
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Productos recomendados
Nombre del producto
Nucleasa Benzonase®, Pureza > 90%,
biological source
Serratia marcescens
Quality Level
recombinant
expressed in E. coli
assay
>90% (SDS-PAGE)
form
buffered aqueous glycerol solution
manufacturer/tradename
Novagen®
storage condition
OK to freeze
concentration
25-29 units/μL
application(s)
research use
shipped in
wet ice
storage temp.
−20°C
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General description
La nucleasa Benzonase® es una endonucleasa genotecnológica producida a partir de Serratia marcescens. Degrada todas las formas de ADN y ARN (monocatenarias, bicatenarias, lineales y circulares) pero no tiene actividad proteolítica. Es eficaz en muchas condiciones diversas y posee una actividad específica excepcionalmente elevada. La enzima digiere por completo los ácidos nucleicos a oligonucleótidos de 2 a 5 bases de longitud (por debajo del límite de hibridación) terminados en 5′-monofosfato, lo que es ideal para separar los ácidos nucleicos de las proteínas recombinantes y permite el cumplimiento de las directrices de la FDA sobre contaminación de ácidos nucleicos. La capacidad de Benzonase para hidrolizar rápidamente los ácidos nucleicos hace de la enzima una opción excelente para reducir la viscosidad y el tiempo de procesamiento, y aumentar el rendimiento proteico. Por ejemplo, la enzima es compatible con los reactivos de extracción de proteínas BugBuster y PopCulture y puede por tanto añadirse junto con esos reactivos para eliminar la viscosidad y quitar los ácidos nucleicos de extractos de E. coli.
La enzima consta de dos subunidades de 30 kDa cada una. Es funcional a un pH comprendido entre 6 y 10, y entre 0 y 42°C; además requiere Mg2+ 1-2mM para activación. La enzima es también activa en presencia de detergentes iónicos y no iónicos, agentes reductores, PMSF (1 mM), EDTA (1 mM) y urea (su actividad relativa depende de las condiciones específicas). Su actividad es inhibida por cationes monovalentes > 150 mM, fosfato > 100 mM, sulfato de amonio > 100 mM o HCl de guanidina >100 mM.
La nucleasa Benzonase está disponible en calidades ultrapura (>99 % mediante SDS-PAGE) y pura (>90 %) a una concentración estándar de 25 - 29 U/µl y a una concentración elevada (HC) de 250 U/µl. Ambas preparaciones están exentas de proteasas detectables y tienen una actividad específica > 1 × 106 U/mg de proteínas. El grado de pureza >99 % se ha probado para endotoxinas y contiene <0.25 EU/1000 units. The product is suppliedin 50% glycerol.Store at -20°C.
Total endotoxin:<0.25 EU/1,000 units.Purity: >90 % mediante SDS-PAGE
La enzima consta de dos subunidades de 30 kDa cada una. Es funcional a un pH comprendido entre 6 y 10, y entre 0 y 42°C; además requiere Mg2+ 1-2mM para activación. La enzima es también activa en presencia de detergentes iónicos y no iónicos, agentes reductores, PMSF (1 mM), EDTA (1 mM) y urea (su actividad relativa depende de las condiciones específicas). Su actividad es inhibida por cationes monovalentes > 150 mM, fosfato > 100 mM, sulfato de amonio > 100 mM o HCl de guanidina >100 mM.
La nucleasa Benzonase está disponible en calidades ultrapura (>99 % mediante SDS-PAGE) y pura (>90 %) a una concentración estándar de 25 - 29 U/µl y a una concentración elevada (HC) de 250 U/µl. Ambas preparaciones están exentas de proteasas detectables y tienen una actividad específica > 1 × 106 U/mg de proteínas. El grado de pureza >99 % se ha probado para endotoxinas y contiene <0.25 EU/1000 units. The product is suppliedin 50% glycerol.Store at -20°C.
Total endotoxin:<0.25 EU/1,000 units.Purity: >90 % mediante SDS-PAGE
Application
Utilizado para eliminación de los ácidos nucleicos de las muestras proteicas.
Biochem/physiol Actions
Digiere el ADN y el ARN nativos o desnaturalizados por calor.
Warning
Toxicidad: Manipulación estándar (A)
Unit Definition
Una unidad se define como la cantidad de enzima que causa un ΔA₂₆₀ de 1,0 en 30 minutos, lo que corresponde a la digestión completa de 37 µg de ADN.
Legal Information
Benzonase is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
NOVAGEN is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Storage Class
10 - Combustible liquids
wgk_germany
WGK 2
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How can 70746 Benzofane be inactivated without using NaOH?
1 answer-
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1 answer-
There is currently no available data on the conditions required for inactivating benzonase by proteinase K. However, it is known that benzonase can be reversibly inactivated by metal ion chelators, such as EDTA and EGTA. Irreversible inactivation can also be achieved through extreme conditions (100 mM NaOH at 70°C for 30 minutes).
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