软饮料中的蔗糖

酶转化后进行反射法测定。

简介

对食品饮料进行化学分析可保证产品安全性、质量及信誉，作为质量控制的一部分，软饮料生产商必须监测最终产品和生产过程中的糖（蔗糖）浓度。在本应用说明中，我们描述了使用 Reflectoquant^® 蔗糖测试和 RQflex^® 20 反射计测量软饮料中的蔗糖的方法。

实验方法

蔗糖被蔗糖磷酸化酶分解成果糖和葡萄糖-1-磷酸。后者通过磷酸葡萄糖变位酶转化为葡萄糖-6-磷酸。它在葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的催化作用下被NAD氧化成葡萄糖酸-6-磷酸。在心肌黄酶参与下，在此过程中形成的 NADH 将四唑盐还原为蓝色甲臜，它可以通过反射计测定。

试剂、仪器和材料

测试试剂盒

• 蔗糖测试法: 反射法，使用试纸条和试剂 0.25 - 2.50 g/l Reflectoquant^® (1.16141)

仪器

• 反射计 RQflex^® 20 Reflectoquant^® (1.17246)*

*本应用说明适用于 RQflex^® 20 和所有已停产仪器 (RQflex^® 10, Rqflex®^® plus)。

样品制备

根据预计蔗糖浓度稀释样品，例如配置 1:100 稀释溶液，移取 0.5 ml 样品至 50-ml 容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度。测试结果最好位于测量范围中间。可能需要重复稀释步骤，进一步稀释。

仪器分析

• 将 10 ml of 蒸馏水, 5 滴试剂 Sa-1, 和 1 ml of 相应稀释样品放入测试杯中并旋转摇匀。
• 按反射计的开始按钮并同时将试纸条的两个反应区浸入待测样品溶液 （20 - 26 °C）中约2秒。
• 让多余的液体通过试纸条的长边缘流到用于吸收的纸巾上。
• 立即将试纸条插入试纸槽中。
• 300秒后反射计测量试纸条。

测量数值 [g/l] 会被自动存储。(请参考 RQflex^® 操作说明和 Reflectoquant^® 蔗糖测试的使用说明。)

连续测试

第一次测量后，按开始按钮可进行任意次数的测量。然而，此过程需要是用秒表，因为反射仪的倒计时功能仅适用于第一次测量。在反应时间内，试纸的检测区必须适当避光。

计算

蔗糖含量 [g/l] = 测量值 [g/l] x 稀释系数

结果

表1. 可乐的测量值（制造商标称的可乐中的蔗糖浓度：10.6 g/100 ml.HPLC结果：10.5 g/100 ml)

	可乐体积	稀释系数	蔗糖含量 稀释液中		100 ml 可乐中的蔗糖
	ml/100 ml		g/l	g/100 ml
稀释 1	0.30	333	0.32	10.7
稀释 2	0.50	200	0.55	11.0
稀释 3	0.75	133	0.76	10.1
稀释 4	1.00	100	1.02	10.2
稀释 5	1.25	80	1.20	9.6
稀释 6	1.50	67	1.60	10.7
稀释 7	1.75	57	1.71	9.8
稀释 8	2.00	50	2.16	10.8
稀释 9	2.25	44	2.24	10.0
			平均值	10.3

表2. 橙子汽水的测量值（制造商标称的橙子汽水的蔗糖浓度：9.4 g/100 ml)

	橙子汽水体积	稀释系数	蔗糖含量 稀释液中		100 ml 橙子汽水中的蔗糖
	ml/100 ml		g/l	g/100 ml
稀释 1	0.30	333	0.28	9.3
稀释 2	0.50	200	0.45	9.0
稀释 3	0.75	133	0.68	9.0
稀释 4	1.00	100	0.85	8.5
稀释 5	1.25	80	1.09	8.7
稀释 6	1.50	67	1.43	9.6
稀释 7	1.75	57	1.50	8.6
稀释 8	2.00	50	1.91	9.6
稀释 9	2.25	44	2.11	9.3
稀释 10	2.50	40	2.24	9.0
			平均值	9.1