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一般說明
提供了使用荧光素快速、简便地标记抗体或其他蛋白质的方法。一抗的直接标记消除了对二抗的需要,并导致较低的背景和总体较高的信噪比。每个试剂盒足以对每种 100 µg 至 2.5 mg 的蛋白质进行至少五次偶联。
成分
荧光素(五个小瓶),碳酸盐缓冲液浓缩液,DMF 溶剂,PBS 缓冲液浓缩液和说明书。
警告
毒性:多个毒性值,请参阅 MSDS(O)
原則
Calbiochem FITC 标记试剂盒提供了一种快速、简单地用荧光素标记抗体或其他蛋白质的方法。FITC-抗体偶联物可用于许多应用,例如流式细胞术和免疫细胞化学。其他蛋白质(例如类固醇)也可以用 FITC 标记。直接标记一抗,而无需二抗,因此导致较低的背景和总体较高的信噪比。
準備報告
抗体/蛋白质制备:将 10 ml 碳酸盐缓冲液浓缩液加到 990 ml 蒸馏水中,并在缓冲液中透析抗体过夜。
分析報告
1.在两个波长下读取 FITC 抗体偶联物的吸光度:280 nm 和 495 nm。使用 1X PBS/0.1% NaN3 作为分光光度空白对照。偶联蛋白的最佳吸光度读数将在 0.2-1.2 ABS的范围内。
2.使用两个吸光度读数,使用以下等式计算 FITC/蛋白质偶联物的 F/P 摩尔比:<div class="Bio_doc_image">图 1:F/P 摩尔比
</div>
3.有 2 个方程式用于确定 FITC 抗体偶联物的浓度。如果用于偶联的蛋白质是 IgG,请使用以下方程式估算标记抗体的浓度:<div class="Bio_doc_image"><p class="title">图 2:FITC-IgG浓度
</div>如果偶联的蛋白质不是 IgG,请使用以下等式估算偶联蛋白的浓度:<div class="Bio_doc_image">图 3:FITC-蛋白质的浓度
</div>其中 E0.1% 是未偶联的蛋白的 1 mg/ml 溶液的 A280 读数,在 1 cm 光程长的比色皿中测量。
2.使用两个吸光度读数,使用以下等式计算 FITC/蛋白质偶联物的 F/P 摩尔比:<div class="Bio_doc_image">图 1:F/P 摩尔比
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3.有 2 个方程式用于确定 FITC 抗体偶联物的浓度。如果用于偶联的蛋白质是 IgG,请使用以下方程式估算标记抗体的浓度:<div class="Bio_doc_image"><p class="title">图 2:FITC-IgG浓度
</div>如果偶联的蛋白质不是 IgG,请使用以下等式估算偶联蛋白的浓度:<div class="Bio_doc_image">图 3:FITC-蛋白质的浓度
</div>其中 E0.1% 是未偶联的蛋白的 1 mg/ml 溶液的 A280 读数,在 1 cm 光程长的比色皿中测量。
其他說明
由于该运输中有害物质的性质,您的订单可能需要支付额外的运输费用。某些尺寸的产品可免除其他有害材料的运输费用。请与您当地的销售办事处联系,以获取有关这些费用的更多信息。
法律資訊
CALBIOCHEM is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
訊號詞
Danger
危險分類
Eye Irrit. 2 - Repr. 1B - Resp. Sens. 1 - Skin Sens. 1
儲存類別代碼
6.1C - Combustible acute toxic Cat.3 / toxic compounds or compounds which causing chronic effects
Infection and immunity, 79(8), 3106-3116 (2011-05-18)
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Infection and immunity, 78(5), 1841-1849 (2010-02-24)
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