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Merck

Perinuclear tethers license telomeric DSBs for a broad kinesin- and NPC-dependent DNA repair process.

Nature communications (2015-07-25)
Daniel K C Chung, Janet N Y Chan, Jonathan Strecker, Wei Zhang, Sasha Ebrahimi-Ardebili, Thomas Lu, Karan J Abraham, Daniel Durocher, Karim Mekhail
RÉSUMÉ

DNA double-strand breaks (DSBs) are often targeted to nuclear pore complexes (NPCs) for repair. How targeting is achieved and the DNA repair pathways involved in this process remain unclear. Here, we show that the kinesin-14 motor protein complex (Cik1-Kar3) cooperates with chromatin remodellers to mediate interactions between subtelomeric DSBs and the Nup84 nuclear pore complex to ensure cell survival via break-induced replication (BIR), an error-prone DNA repair process. Insertion of a DNA zip code near the subtelomeric DSB site artificially targets it to NPCs hyperactivating this repair mechanism. Kinesin-14 and Nup84 mediate BIR-dependent repair at non-telomeric DSBs whereas perinuclear telomere tethers are only required for telomeric BIR. Furthermore, kinesin-14 plays a critical role in telomerase-independent telomere maintenance. Thus, we uncover roles for kinesin and NPCs in DNA repair by BIR and reveal that perinuclear telomere anchors license subtelomeric DSBs for this error-prone DNA repair mechanism.

MATÉRIAUX
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Sigma-Aldrich
Glycérol, for molecular biology, ≥99.0%
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Sigma-Aldrich
Sodium Dodecyl Sulfate, BioReagent, suitable for electrophoresis, for molecular biology, ≥98.5% (GC)
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Sigma-Aldrich
2-mercaptoéthanol, for molecular biology, suitable for electrophoresis, suitable for cell culture, BioReagent, 99% (GC/titration)
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Sigma-Aldrich
2-mercaptoéthanol, ≥99.0%
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Sigma-Aldrich
Sodium Dodecyl Sulfate, ≥99.0% (GC), dust-free pellets
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Sigma-Aldrich
Chlorure de sodium, for molecular biology, DNase, RNase, and protease, none detected, ≥99% (titration)
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Sigma-Aldrich
Désoxycholate de sodium, BioXtra, ≥98.0% (dry matter, NT)
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Sigma-Aldrich
Chlorure de sodium solution, 0.9% in water, BioXtra, suitable for cell culture
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Sigma-Aldrich
Chlorure de sodium solution, 5 M in H2O, BioReagent, for molecular biology, suitable for cell culture
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Sigma-Aldrich
Fluorure de phénylméthanesulfonyle, ≥98.5% (GC)
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Sigma-Aldrich
Sodium Dodecyl Sulfate solution, BioUltra, for molecular biology, 10% in H2O
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Quantité
Sigma-Aldrich
Chlorure de sodium, BioReagent, suitable for cell culture, suitable for insect cell culture, suitable for plant cell culture, ≥99%
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Sigma-Aldrich
2-mercaptoéthanol, BioUltra, for molecular biology, ≥99.0% (GC)
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Quantité
SAFC
Chlorure de sodium solution, 5 M
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Sigma-Aldrich
Sodium Dodecyl Sulfate solution, BioUltra, for molecular biology, 20% in H2O
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Sigma-Aldrich
Glycérol solution, 83.5-89.5% (T)
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Sigma-Aldrich
Acide éthylènediaminetétraacétique solution, 0.02% in DPBS (0.5 mM), sterile-filtered, BioReagent, suitable for cell culture
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Sigma-Aldrich
Glycérol, BioReagent, suitable for cell culture, suitable for insect cell culture, suitable for electrophoresis, ≥99% (GC)
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Prix
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Sigma-Aldrich
Glycérol, BioUltra, for molecular biology, anhydrous, ≥99.5% (GC)
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Sigma-Aldrich
Sodium Dodecyl Sulfate, BioUltra, for molecular biology, ≥99.0% (GC)
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Sigma-Aldrich
Ethylenediaminetetraacetic acid, anhydrous, crystalline, BioReagent, suitable for cell culture
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Disponibilité
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Quantité
Sigma-Aldrich
Ethylenediaminetetraacetic acid, 99.995% trace metals basis
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Disponibilité
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Quantité
Sigma-Aldrich
Chlorure de sodium solution, BioUltra, for molecular biology, ~5 M in H2O
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Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Chlorure de sodium, 99.999% trace metals basis
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Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Fluorure de phénylméthanesulfonyle, ≥99.0% (T)
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Quantité
Sigma-Aldrich
Glycérol, FCC, FG
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Disponibilité
Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Chlorure de sodium, BioUltra, for molecular biology, ≥99.5% (AT)
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Quantité
SAFC
Désoxycholate de sodium
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Prix
Quantité
Supelco
Sodium Dodecyl Sulfate, dust-free pellets, suitable for electrophoresis, for molecular biology, ≥99.0% (GC)
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Prix
Quantité
Sigma-Aldrich
Sodium Dodecyl Sulfate, ≥98.0% (GC)
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Prix
Quantité