H4034

HEPES

BioPerformance Certified, ≥99.5% (titration), suitable for cell culture

• Synonyme(s) : Acide 4-(2-hydroxyéthyl)pipérazine-1-éthanesulfonique, Acide N-(2-hydroxyéthyl)pipérazine-N′-(2-éthanesulfonique)
• Formule empirique (notation de Hill): C₈H₁₈N₂O₄S
• Numéro CAS: 7365-45-9
• Poids moléculaire : 238.30
• Numéro Beilstein : 883043
• Numéro CE : 230-907-9
• Numéro MDL: MFCD00006158
• Code UNSPSC : 12161700
• ID de substance PubChem : 24895616
• Nomenclature NACRES : NA.25

Propriétés

• Qualité: BioPerformance Certified
• Niveau de qualité: 400
• Pureté: ≥99.5% (titration)
• Forme: crystalline powder
• Conditions de stockage: dry at room temperature
• Technique(s): cell culture | mammalian: suitable; competitive inhibition ELISA: suitable
• Impuretés: endotoxin and total aerobic microbial count, tested
• Couleur: white
• Plage de pH utile: 6.8-8.2
• pKa (25 °C): 7.5
• Traces de cations: Fe: ≤5 ppm
• Absorption: ≤0.05 at 260 in H₂O at 0.1 M; ≤0.05 at 280 in H₂O at 0.1 M
• Adéquation: suitable for Western blot; suitable for component for culture media
• Application(s): clinical research; diagnostic assay manufacturing; general analytical; life science and biopharma
• Activité étrangère: DNase, RNase, NICKase, protease, none detected
• Chaîne SMILES: OCCN1CCN(CC1)CCS(O)(=O)=O
• InChI: 1S/C8H18N2O4S/c11-7-5-9-1-3-10(4-2-9)6-8-15(12,13)14/h11H,1-8H2,(H,12,13,14)
• Clé InChI: JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N

Description

Description générale

HEPES buffer does not confer cytotoxic effects on cells and thus can be used in animal cell cultures.

L'HEPES a été décrit comme l'un des meilleurs tampons polyvalents disponibles en recherche biologique. Aux pH biologiques, la molécule est zwittérionique et possède des propriétés tampon de pH 6,8 à pH 8,2. L'HEPES est utilisé dans une grande variété d'applications, incluant la culture de tissus. Il sert généralement à tamponner les milieux de culture cellulaire exposés à l'air. L'HEPES est employé dans des expériences in vitro sur le Mg.

L'HEPES, ou acide 4-(2-hydroxyéthyl)pipérazine-1-éthane-sulfonique, est un tampon zwittérionique du type acide aminosulfonique N-substitué. Il possède une capacité tampon exceptionnelle dans la plage de pH de 6,8 à 8,2, grâce à son pKa de 7,48 à 25 °C. Largement reconnu comme l'un des tampons les plus polyvalents, l'HEPES est énormément utilisé en recherche en biologie cellulaire, en biochimie et en biologie. Il se démarque par son absence de réactivité vis-à-vis des ions métalliques. Contrairement à bon nombre de tampons, l'HEPES ne forme pas de complexes majeurs avec la plupart des métaux, ce qui permet de l'utiliser dans les applications impliquant des ions métalliques sans affecter leur activité. Cette caractéristique renforce son utilité en tant que "tampon non coordinateur". En culture cellulaire, l'HEPES excelle dans le maintien d'un pH physiologique stable, même en cas de fluctuations de la concentration en dioxyde de carbone résultant de la respiration des cellules. Il se démarque ainsi des tampons au bicarbonate (NaHCO3) qui, malgré leur usage répandu, stabilisent moins efficacement le pH.

L'HEPES s'avère également intéressant pour divers procédés biologiques et biochimiques. Sa nature ampholyte en fait un séparateur capable de créer des gradients de pH en focalisation isoélectrique, une technique souvent rencontrée dans la séparation et l'analyse des protéines. En outre, l'HEPES n'interfère que très peu avec les réactions des enzymes de restriction par rapport aux tampons contenant moins de groupements amine substituée comme le Tris. Il est ainsi l'option privilégiée pour les applications impliquant une manipulation de l'ADN et son analyse. Outre ces applications particulières, l'HEPES est un composé intéressant pour de nombreuses autres techniques biologiques et biochimiques, notamment l'immunoprécipitation, la lyse cellulaire et l'imagerie de cellules vivantes. Sa polyvalence, couplée à son pouvoir tampon exceptionnel et à ses interactions minimales avec les autres molécules, font de l'HEPES un outil indispensable dans différents domaines de recherche.

Application

L'HEPES a été utilisé :

• pour enrichir le milieu de Eagle modifié par Dulbecco pour cultiver et maintenir des lignées cellulaires
• comme constituant d'un tampon de suspension plaquettaire
• pour enrichir la solution saline basique de Hanks, qui est utilisée pour laver des tissus pancréatiques
• comme constituant d'un tampon de lavage et d'un tampon de blocage lors de la purification et de la quantification d'une protéine avec la méthode ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay).
• pour ajuster et maintenir le pH de solutions biologiques
• comme constituant d'une solution saline équilibrée de Hanks (HBSS) et d'un milieu de dissociation pour étudier le développement neuronal
• pour l'homogénéisation de tissus et la préparation d'extraits cytosoliques et nucléaires à partir de cellules
• comme constituant d'un milieu de culture pour kératinocytes et fibroblastes

Caractéristiques et avantages

• Faible niveau de contamination par les métaux lourds, confirmé par des tests et garantissant la compatibilité du produit avec diverses applications.
• Grande solubilité dans l'eau avec une plage de pH utile allant de 6,8 à 8,2 et un pKa de 7,5 (à 25 °C).
• Liaison négligeable aux ions métalliques.
• Moins toxique pour les cellules que d'autres tampons comme le Tris ou le phosphate.
• Stable sur une grande plage de pH.
• Testé pour garantir l'absence d'endotoxines et pour dénombrer les germes aérobies totaux.
• Produit exempt de DNases, NICKases, RNases, endonucléases, exonucléases et protéases.

Autres remarques

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Informations sur la sécurité

• Code de la classe de stockage: 11 - Combustible Solids
• Classe de danger pour l'eau (WGK): WGK 1
• Point d'éclair (°F): Not applicable
• Point d'éclair (°C): Not applicable
• Équipement de protection individuelle: Eyeshields, Gloves, type N95 (US)