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E1014
Nucléase Benzonase®
Benzonase® Nuclease
≥250 units/μL, ≥90% (SDS-PAGE), recombinant, expressed in E. coli, buffered aqueous glycerol solution
Synonyme(s) :
Endonucléase from Serratia marcescens
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About This Item
Numéro CAS:
Numéro MDL:
Code UNSPSC :
12352204
Nomenclature NACRES :
NA.54
Le tarif et la disponibilité ne sont pas disponibles actuellement.
Produits recommandés
Source biologique
Serratia marcescens
Niveau de qualité
Produit recombinant
expressed in E. coli
Essai
≥90% (SDS-PAGE)
Forme
buffered aqueous glycerol solution
Poids mol.
30 kDa
Concentration
≥250 units/μL
Application(s)
research use
Activité étrangère
protease, essentially free
Conditions d'expédition
wet ice
Température de stockage
−20°C
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Description générale
La nucléase Benzonase® est une endonucléase génétiquement modifiée extrêmement efficace issue de Serratia marcescens[1]. Ce dimère protéique doté de deux ponts disulfure cruciaux[2] est capable d'attaquer et de dégrader toutes les formes d'ADN et d'ARN (simple brin, double brin, linéaire et circulaire) en conditions opératoires très variées. La nucléase Benzonase® a la capacité d'éliminer les acides nucléiques et d'améliorer la pureté et la qualité des échantillons protéiques.
Application
La nucléase Benzonase® a été utilisée : dans un tampon de lyse C glacé pour digérer de l'ADN et de l'ARN et contribuer à la libération complète de toutes les protéines nucléaires[3], dans une étape d'immunoprécipitation pour libérer les complexes protéiques présents dans le nucléoplasme et la chromatine[4], comme supplément dans un tampon RIPA pour fractionner des cellules SHSY5Y en vue d'une immunoprécipitation[5], pour éliminer les acides nucléiques résiduels d'anneaux aortiques dans une méthode de décellularisation.[6]
Pour l'élimination des acides nucléiques présents dans les échantillons protéiques.
Actions biochimiques/physiologiques
Digère l′ADN et l′ARN endogènes ou dénaturés par voie thermique.
La nucléase Benzonase® peut digérer entièrement les acides nucléiques en donnant des oligonucléotides à extrémité 5′-monophosphate de 3 à 5 bases de long, ce qui en fait un outil idéal pour éliminer les acides nucléiques mélangés aux protéines recombinantes et pour les applications nécessitant une digestion complète des acides nucléiques. En plus de réduire la viscosité des extraits protéiques et d'empêcher les cellules de s'agglutiner, prétraiter les échantillons protéiques avec la nucléase Benzonase® améliore grandement leur résolution en électrophorèse sur gel en 2D grâce à la suppression des éventuels acides nucléiques liés. Cette enzyme polyvalente est capable de digérer l'ADN et l'ARN natifs ainsi que leurs formes dénaturées par voie thermique, l'activité de l'enzyme étant maximale entre pH 8,0 et pH 9,2. La nucléase Benzonase® permet d'éliminer l'ADN des cellules hôtes présent dans les échantillons de microbiome. Dans de nombreux cas, les échantillons de microbiome (salive ou peau par exemple) contiennent un pourcentage élevé d'ADN des cellules hôtes qui interfère avec les résultats en aval. Nos experts ont montré que réduire la quantité de l'ADN issu des celles hôtes permet d'abaisser le coût du séquençage tout en augmentant et en améliorant les données. Les données expérimentales sont disponibles dans l'article technique : Benzonase® Nuclease for Microbiome Workflows.
Caractéristiques et avantages
- Déplétion de l'ADN des cellules hôtes présent dans les échantillons de microbiome.
- Digestion efficace des acides nucléiques dans diverses procédures.
- Réduction de la viscosité durant l'extraction de protéines.
Définition de l'unité
Δ
Forme physique
Autres remarques
Informations légales
La nucléase Benzonase® est fournie par Merck KGaA Darmstadt (Allemagne) et/ou ses filiales.
Benzonase is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Code de la classe de stockage
10 - Combustible liquids
Classe de danger pour l'eau (WGK)
WGK 1
Point d'éclair (°F)
Not applicable
Point d'éclair (°C)
Not applicable
Équipement de protection individuelle
Eyeshields, Gloves
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How many ul does it contain? What kind of Unit is KU?
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Hi, for protein purification from E. coli cells, how much is the working concentration range for Benzonase nuclease (≥250 units/μL)? Thank you
1 answer-
The recommended starting concentration for Benzonase nuclease is 25 units per milliliter of cell lysate.
Helpful?
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Hello, I plan to do proteomic for protein. When I add RIPA buffer to isolate the protein, I need to remove the DNA and RNA inside. When should I add E1014? Together with RIPA or after it?
1 answer-
Concentrations greater than 1 mM EDTA will inhibit Benzonase activity, and RIPA buffer recipes typically contain EDTA at higher concentrations than 1 mM. Therefore, Benzonase should be used after removing EDTA from the lysed sample or consider using a different lysis solution that does not include EDTA in the formulation.
Helpful?
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What is the storage temperature range for E1014? There is only a specified storage temperature, and not a range.
1 answer-
This product is stored at freezer temperature, which is typically -20°C. An excepted range is -15 - -20°C.
Helpful?
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