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Kit de prolifération cellulaire I (MTT)

• Synonyme(s) : mtt
• Code UNSPSC : 12352200

Propriétés

• Forme: liquid
• Niveau de qualité: 100
• Utilisation: sufficient for ≤2,500 tests
• Conditionnement: pkg of 1 kit
• Fabricant/nom de marque: Roche
• Conditions de stockage: protect from light
• Technique(s): tissue culture: suitable
• λmax: 550-600 nm
• Application(s): cell analysis; detection
• Méthode de détection: colorimetric
• Température de stockage: −20°C

Description

Description générale

Le kit de prolifération cellulaire I (MTT) est un essai colorimétrique pour la quantification non radioactive de la prolifération et viabilité cellulaires et de la cytotoxicité. Les échantillons adaptés sont des cultures cellulaires adhérentes ou en suspension cultivées dans des microplaques à 96 puits.

Les essais colorimétriques permettent d′évaluer le nombre de cellules viables en vertu du clivage de sels de tétrazolium ajoutés au milieu de culture. Cette méthode ne nécessite pas de laver ni de détacher les cellules et l′ensemble de l′essai, de la culture en microplaques à l′analyse des données par un lecteur ELISA, est réalisé dans une même microplaque.
MTT est le premier sel de tétrazolium décrit. Il est clivé en formazan par des enzymes situées dans le réticulum endoplasmique. Cette bioréduction se produit uniquement dans les cellules viables, et dépend de la production de NAD(p)H par la glycolyse. Par conséquent, la quantité de colorant formazan formé est en corrélation directe avec le nombre de cellules métaboliquement actives dans la culture.

Essai colorimétrique (de type MTT) pour la quantification non radioactive de la prolifération et viabilité cellulaires et de la cytotoxicité.

Application

Le kit de prolifération cellulaire I (MTT) est utilisé pour la quantification spectrophotométrique et non radioactive de la prolifération et de la viabilité cellulaires dans des populations de cellules sous un format de microplaque à 96 puits. Il peut être utilisé pour :

• mesurer la prolifération cellulaire en réponse aux facteurs de croissance, cytokines, mitogènes et nutriments ;
• analyser les composés cytotoxiques et cytostatiques comme les agents anticancéreux et d′autres produits pharmaceutiques ;
• évaluer les anticorps et les médiateurs physiologiques qui inhibent la croissance cellulaire ;
• évaluer la biocompatibilité de divers supports de croissance de cellules osseuses employés en ingénierie ostéo-tissulaire

Caractéristiques et avantages

• Pratique et sûr : Élimine les isotopes radioactifs, les étapes de lavage et les réactifs supplémentaires.
• Précis : L′absorbance obtenue est en bonne corrélation avec le nombre de cellules.
• Sensible : Permet de détecter de faibles nombres de cellules.
• Rapide : Permet d′évaluer un grand nombre d′échantillons à l′aide d′un lecteur de plaque multi-puits ELISA.

L′essai repose sur le clivage du sel de tétrazolium MTT en présence d′un réactif de couplage d′électrons. Le sel de formazan insoluble à l′eau ainsi produit doit être solubilisé au cours d′une étape supplémentaire. Les cellules cultivées dans des plaques de culture à 96 puits sont incubées dans la solution de MTT pendant environ 4 heures. À l′issue de cette période d′incubation, un colorant formazan insoluble à l′eau est formé. Après solubilisation, le colorant formazan est quantifié à l′aide d′un spectrophotomètre multi-puits à balayage (lecteur pour ELISA). L′absorbance mesurée est en corrélation directe avec le nombre de cellules viables.
Les essais de prolifération et de viabilité cellulaires sont particulièrement importants pour les applications de routine en biologie cellulaire. Les sels de tétrazolium (comme MTT, XTT, WST-1) sont spécialement adaptés à ce type d′analyse. Ils sont clivés pour former du formazan par le système de succinate-tétrazolium réductase (EC 1.3.99.1), qui appartient à la chaîne respiratoire des mitochondries et n′est actif que dans les cellules métaboliquement intactes (voir ci-dessous).

Conditionnement

1 kit constitué de 2 éléments.

Notes préparatoires

Conditions de stockage (solution de travail) : 2 à 8 °C
Une fois décongelé, les réactifs de marquage MTT peuvent être conservés à l′abri de la lumière entre 2 et 8 °C pendant 4 semaines au maximum ; dans ce cas, il est recommandé de les filtrer à travers une membrane de 0,2 μm.

Autres remarques

Lauréat du prix CiteAb 2024 récompensant les avancées des fournisseurs dans la recherche sur la maladie de Parkinson

Composants de kit seuls

• MTT Labeling Reagent
• Solubilization Solution

Informations sur la sécurité

• Code de la classe de stockage: 12 - Non Combustible Liquids
• Classe de danger pour l'eau (WGK): WGK 2
• Point d'éclair (°F): does not flash
• Point d'éclair (°C): does not flash