MAB5326

Anticorps anti-nestine, clone 10C2

clone 10C2, Chemicon^®, from mouse

• Synonyme(s) : Anti-Nestin
• Code UNSPSC : 12352203
• eCl@ss : 32160702
• Nomenclature NACRES : NA.41

Propriétés

• Source biologique: mouse
• Niveau de qualité: 100
• Forme d'anticorps: purified immunoglobulin
• Clone: 10C2, monoclonal
• Espèces réactives: human
• Ne doit pas réagir avec: rat, mouse
• Conditionnement: antibody small pack of 25 μg
• Fabricant/nom de marque: Chemicon^®
• Technique(s): immunocytochemistry: suitable; immunohistochemistry (formalin-fixed, paraffin-embedded sections): suitable; western blot: suitable
• Entrée: sample type epithelial cells; sample type neural stem cell(s)
• Isotype: IgG1
• Numéro d'accès NCBI: NM_006617.1
• Numéro d'accès UniProt: P48681
• Conditions d'expédition: ambient
• Température de stockage: 2-8°C
• Modification post-traductionnelle de la cible: unmodified

Description

Description générale

La nestine est une grande protéine de filament intermédiaire (classe de type VI) exprimée durant le développement et dans les jonctions neuromusculaires et myotendineuses. L'expression de la nestine est limitée, et disparaît typiquement au plus tard au stade E18. La nestine est considérée comme un marqueur neuronal raisonnable ; toutefois, de récentes études ont mis en évidence une expression de la nestine dans d'autres types de cellules comme les cellules endothéliales (Folia Biologica, 44(5):155, 1998). La nestine permet d'identifier le neuroépithélium le plus primitif mais aussi de nombreux autres tissus embryonnaires, elle n'est donc pas spécifique du SNC. Une expression de la nestine est observée dans presque tous les glioblastomes multiformes (GBM) et dans de nombreux mélanomes (aussi bien primaires que métastatiques), mais pas dans les carcinomes métastatiques.

Spécificité

Réagit avec la nestine humaine, avec une faible réactivité vis-à-vis de la nestine de singe. Ne réagit pas avec la nestine de rongeur.

Immunogène

Protéine de fusion.

Épitope : humain

Application

Analyse par immunoblotting : Dilution au 1/1000-1/2000e sur la protéine dénaturée. Western blotting : Dilution au 1/1000-1/5000e. Reconnaît une bande de 220-240 kDa sur les gels dénaturants avec SDS. La plupart des lysats présentent une bande à 60-64 kDa correspondant à un petit fragment dont l'identité est inconnue. Mais cette bande n'apparaît pas dans les lysats exempts de nestine humaine.

La lignée WI-38 (n°ATCC CCL75) peut servir de témoin positif. La lignée U251 est aussi positive.

Immunocytochimie : Dilution au 1/200e de cellules fixées avec 4 % de paraformaldéhyde et perméabilisées avec 0,02 % de Triton.

Immunohistochimie : utiliser préférentiellement le paraformaldéhyde comme fixateur. Dilution au 1/200e sur des coupes de tissus fixés au formol et inclus en paraffine. Utiliser 0,02 % de Triton sur les blocs uniquement. Tampon de dilution : 0,1 % de BSA. Incubations : 1-2 heures à température ambiante. Il est suggéré d'utiliser du cerveau fœtal humain comme témoin positif. (CA Messam et al, Develop. Brain Res, 134:87-92, 2002; Gu, et al., Brain Res. 943:174-180, 2002). Marquage filamenteux dans le cytoplasme des cellules.

Il revient à l'utilisateur final de déterminer les dilutions de travail optimales.

Domaine de recherche
Recherche sur les cellules souches

L'utilisation de cet anticorps anti-nestine, clone 10C2, a été validée en IC, IH, IH(P) et WB pour la détection de la nestine.

Sous-domaine de recherche
Cellules souches neurales

Description de la cible

200-220 kDa

Liaison

Remplace le(s) produit(s) suivant(s) : AB5922

Forme physique

Format : purifié

Immunoglobuline de souris purifiée sur de la protéine A dans du phosphate de sodium 20 mM et du NaCl 250 mM à pH 7,6, avec 0,1 % d'azoture de sodium comme conservateur.

Produit purifié sur protéine A.

Stockage et stabilité

Les anticorps peuvent être conservés à 4 °C ou à -20 °C. Éviter les congélations/décongélations répétées.

Pendant le transport, de petits volumes de produit peuvent parfois être piégés dans le sceau du flacon de produit. Pour les produits dont le volume est inférieur ou égal à 200 μl, il est recommandé de tapoter doucement le flacon sur une surface dure, ou de le centrifuger brièvement dans une centrifugeuse de paillasse, afin de déloger tout liquide contenu dans le bouchon du flacon.

Remarque sur l'analyse

Témoin
Témoin positif : Lignées cellulaires WI-38 (n°ATCC CCL75) ou U251

Autres remarques

Concentration : Pour connaître la concentration spécifique du lot, veuillez vous référer au certificat d'analyse.

Informations légales

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Clause de non-responsabilité

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Informations sur la sécurité

• Code de la classe de stockage: 12 - Non Combustible Liquids
• Classe de danger pour l'eau (WGK): WGK 2