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Identification of peptide products from enzymatic degradation of amyloid beta.

Biochimie (2014-07-11)
Magnus Rogeberg, Camilla B Furlund, Morten K Moe, Tormod Fladby
ZUSAMMENFASSUNG

Deposition of insoluble amyloid plaques is one of the known hallmarks of Alzheimer's disease. Amyloid beta 1-42 is the main component in these plaques, and the soluble oligomers of this peptide are believed to contribute to synaptic degradation and dementia. Enzymatic hydrolysis of amyloid beta is important to keep its tissue concentration low to avoid oligomerization. We have employed four enzymes involved in in vivo degradation of amyloid beta, to identify amyloid beta 1-42 hydrolysis products in vitro. Liquid chromatography coupled to (high resolution) mass spectrometry was used to identify the proteolysis products. Novel cleavage sites were discovered for all four enzymes. For each enzyme, the peptide was incubated for several different periods from 0.5 to 210 min, and the proteolysis products from each period were characterized. Thus, both the initial cleavage sites and the full degradation profiles were revealed. Knowledge about the fate of amyloid beta is important to better understand the mechanism underlying Alzheimer's disease, and the reported proteolysis products can be used as targets in future investigations on amyloid beta clearance.

MATERIALIEN
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Produktbeschreibung

Sigma-Aldrich
Acetonitril, suitable for HPLC, gradient grade, ≥99.9%
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Sigma-Aldrich
Acetonitril, HPLC Plus, ≥99.9%
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Sigma-Aldrich
Trizma® Base, Primary Standard and Buffer, ≥99.9% (titration), crystalline
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Sigma-Aldrich
Natriumhydroxid, ACS reagent, ≥97.0%, pellets
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Sigma-Aldrich
Natriumhydroxid, reagent grade, ≥98%, pellets (anhydrous)
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Sigma-Aldrich
Natronlauge, 50% in H2O
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Sigma-Aldrich
Trizma® Base, BioPerformance Certified, meets EP, USP testing specifications, suitable for cell culture, ≥99.9% (titration)
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Acetonitril, ACS reagent, ≥99.5%
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Natronlauge, BioUltra, for molecular biology, 10 M in H2O
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Sigma-Aldrich
Acetonitril, suitable for HPLC, gradient grade, ≥99.9%
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Sigma-Aldrich
Natriumhydroxid, BioXtra, ≥98% (acidimetric), pellets (anhydrous)
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Sigma-Aldrich
Natriumhydroxid, puriss., meets analytical specification of Ph. Eur., BP, NF, E524, 98-100.5%, pellets
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Sigma-Aldrich
Natronlauge, 1.0 N, BioReagent, suitable for cell culture
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Natriumhydroxid, reagent grade, 97%, powder
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Sigma-Aldrich
Natriumhydroxid, pellets, semiconductor grade, 99.99% trace metals basis
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Sigma-Aldrich
Sigma 7-9®, ≥99% (titration), crystalline
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Sigma-Aldrich
Tromethamin, meets USP testing specifications
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Sigma-Aldrich
Trizma® Base, BioUltra, for molecular biology, ≥99.8% (T)
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Sigma-Aldrich
Natronlauge, 5.0 M
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Sigma-Aldrich
Trizma® Base, ≥99.0% (T)
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Sigma-Aldrich
Trizma® Base, BioXtra, pH 10.5-12.0 (1 M in H2O), ≥99.9% (titration)
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Sigma-Aldrich
Natriumhydroxid, beads, 16-60 mesh, reagent grade, 97%
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Sigma-Aldrich
Natriumhydroxid, reagent grade, 97%, flakes
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Sigma-Aldrich
Acetonitril, biotech. grade, ≥99.93%
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Sigma-Aldrich
Trizma® Base, ≥99.9% (titration), crystalline
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Sigma-Aldrich
Natriumhydroxid, BioUltra, for luminescence, ≥98.0% (T), pellets
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Sigma-Aldrich
Acetonitril, anhydrous, 99.8%
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SAFC
Tromethamin
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Sigma-Aldrich
Tris(hydroxymethyl)aminomethan, ACS reagent, ≥99.8%
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Sigma-Aldrich
Trizma® Base, anhydrous, free-flowing, Redi-Dri, ≥99.9%
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