Allgemeine Beschreibung
Das Gen für Angiotensin-konvertierendes Enzym 2 (ACE-2) ist auf dem menschlichen Chromosom Xp22.2 lokalisiert. Dieses Protein ist das erste bekannte humane Homolog von ACE. ACE2 wurde bei der 5′-Sequenzierung einer cDNA-Bibliothek einer menschlichen Herzkammer bei Herzinsuffizienz identifiziert. Es enthält ein Signalpeptid, ein aktives Zentrum für Metallprotease und eine transmembrane Domäne. ACE-2 ist ein sezerniertes und integrales Membranprotein. Es wird überwiegend auf dem Endothel exprimiert.
Anwendung
Angiotensin-konvertierendes Enzym 2 (ACE2) wird für Inhibitorselektivitätsstudien in ACE-2-Hemmungsassays eingesetzt. Es wurde auch zur Identifizierung von potenten ACE2-blockierenden monoklonalen Antikörpern in einem On-Chip-Assay und in einem Humanes-ACE2-Blockierungsassay unter Verwendung eines Bio-Layer-Interferometrie-Biosensors eingesetzt. Dieser Ansatz dient der rationalen Impfstoffentwicklung und zur Auswahl von robusten Immuntherapeutika gegen die Infektion mit schwerem akutem respiratorischem Syndrom Coronavirus 2 (SARS-CoV-2).
Biochem./physiol. Wirkung
Das Angiotensin-konvertierende Enzym 2 (ACE-2) dient als Carboxydipeptidase. Die zentrale Rolle von ACE-2 ist es, der ACE-Aktivität entgegenzuwirken, indem die Bioverfügbarkeit von Angiotensin(Ang)-II verringert und die Ang(1-7)-Bildung gesteigert wird. ACE-2 ist ein Teil des Renin-Angiotensin-Systems (RAS). Viele Forschende zeigen, dass ACE-2 den Schutz von peripherem Gewebe gewährleistet und wirksam bei der Behandlung von Erkrankungen im Zusammenhang mit RAS sein könnte. Ein Ungleichgewicht zwischen den ACE-2/Ang(1-7)- und ACE/Ang-II-Achsen ist wichtig für das Auftreten von kardiovaskulären Erkrankungen. SARS- und HCoV-NL63-Infektionsviren (Schweres akutes respiratorisches Syndrom; humanes Coronavirus) nutzen das Oberflächenprotein Spike (Glykoprotein), um an den humanen ACE-2-Rezeptor zu binden. Das S-Protein wird während der COVID-19-Infektion in die Untereinheiten S1 und S2 gespaltet. S1 enthält die Rezeptorbindungsdomäne (RBD), die es Coronaviren ermöglicht, an die Peptidasedomäne (PD) von ACE2 zu binden. Dadurch wurde ACE2 ein Forschungsobjekt mit starkem Fokus für die COVID-19-Infektion.
Rekombinantes humanes Angiotensin-konvertierendes Enzym 2 (ACE-2) wird in humanen HEK-293-Zellen als ein C-terminales Flag und Histidin-markiertes Glykoprotein mit einer berechneten Molekülmasse von 85,9 kDa (Aminosäuren Gln18-Ser740 mit einem C-terminalen 10-His-Tag) exprimiert. Das DTT-reduzierte Protein migriert aufgrund von Glykosylierung als ein 90- bis 120-kDa-Polypeptid auf SDS-PAGE. Dieses Protein wird in menschlichen Zellen produziert, ohne Serum. Das Expressionssystem menschlicher Zellen gestattet eine Menschen-ähnliche Glykosylierung und Auffaltung und unterstützt häufig eine stärkere spezifische Aktivität des Proteins.
Einheitendefinition
Eine Einheit ist als die Menge von Enzym definiert, die erforderlich ist, um je Minute bei 37 °C und einem pH-Wert von 7,5 1 Picomol des fluorogenen Peptidsubstrats Mca-YVADAPK(Dnp)-OH zu spalten.
Physikalische Form
Lyophilisiert aus einer 0,22-μm-filtrierten Lösung mit PBS, pH-Wert 7,4.