D1313

JumpStart^™ REDAccuTaq^® LA DNA-Polymerase

Long and accurate hot-start Taq with inert dye, 10X buffer included

• Synonym(e): JumpStart^™ REDAccuTaq^® LA-DNA-Polymerase
• UNSPSC-Code: 41106314
• NACRES: NA.55

Eigenschaften

• Qualitätsniveau: 200
• Form: liquid
• Verwendung: sufficient for 250 reactions; sufficient for 50 reactions
• Leistungsmerkmale: Long & Accurate PCR; dNTPs included: no; hotstart
• Konzentration: 1 unit/μL
• Methode(n): PCR: suitable
• Farbe: red
• Aufnahme: purified DNA
• Eignung: suitable for PCR
• Anwendung(en): agriculture
• Versandbedingung: wet ice
• Lagertemp.: −20°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

JumpStart^™ REDAccuTaq^® LA DNA-Polymerase enthält AccuTaq long and accurate (LA) DNA-Polymerase, einen inerten roten Farbstoff und einen JumpStart AccuTaq-Antikörper. Dieses Enzym eignet sich für die long-distance and high-fidelity PCR, Multiplex-PCR und PCR-Amplifikation von Zielen mit variabler Länge wie die Amplifikation von cDNA-Bibliotheken. Dies ermöglicht die Amplifikation von 0,25–22 kb für komplexe genomische DNA und bis zu 40 kb für weniger komplexe Matrizen. JumpStart Taq-Antikörper wurde entwickelt, um die unspezifische Amplifikation bei gleichzeitiger Erhöhung der Zielausbeute zu minimieren. Im Gegensatz zu anderen Hot-Start-Verfahren (d. h. chemische Inaktivierung) erfordert der JumpStart Taq-Antikörper keinen Vorinkubationsschritt vor dem Zyklus, da die Polymeraseaktivität im ersten Denaturierungszyklus der PCR-Reaktion vollständig wiederhergestellt wird. Das PCR-Produkt kann mit Standard-Aufreinigungsmethoden einfach von dem roten Farbstoff getrennt werden. Der inerte rote Farbstoff hat keinen Einfluss auf die automatisierte Sequenzierung, den Verdau des Restriktionsenzyms, die Ligation oder andere Downstream-Anwendungen. Seine hohe Wiedergabetreue macht es zum bevorzugten Enzym für die Durchführung von Amplifikationen, bei denen eine niedrige Fehlerquote wichtig ist, wie z. B. bei der RT-PCR und beim Klonen.

Anwendung

JumpStart^™ REDAccuTaq^® LA-DNA-Polymerase wird zur Amplifikation genomischer DNA verwendet. Sie wird außerdem in der Polymerase-Kettenreaktion (PCR) zum Klonen von Genen eingesetzt.

JumpStart REDAccuTaq LA-DNA-Polymerase ist eine einzigartige Enzymmischung, die 0,25 kb bis 40 kb lange PCR-Fragmente mit hoher Wiedergabetreue und einer verbesserten Spezifität und Ausbeute generieren kann. JumpStart REDAccuTaq DNA-Polymerase kombiniert die AccuTaq LA-DNA-Polymerase und JumpStart Taq-Antikörper von Sigma mit einem inerten roten Farbstoff. Diese speziell formulierte Heißstart-Enzymmischung erzielt eine höhere Ausbeute, verbessert die Sensitivität und sorgt für eine höhere Wiedergabetreue (6,5-fach) im Vergleich zu Standard-Taq- oder anderen langen und genauen (Long und Accurate)-Enzymmischungen. Ihre hohe Wiedergabetreue macht sie zum bevorzugten Enzym für die Durchführung von Amplifikationen, bei denen eine niedrige Fehlerquote wichtig ist, wie z. B. bei der RT-PCR und beim Klonen.

JumpStart REDAccuTaq LA-DNA-Polymerase enthält auch den Heißstart-Mechanismus des JumpStart Taq-Antikörpers. JumpStart Taq-Antikörper wurde entwickelt, um die unspezifische Amplifikation bei gleichzeitiger Erhöhung der Zielausbeute zu minimieren. Im Gegensatz zu anderen Hot-Start-Verfahren (d. h. chemische Inaktivierung) erfordert JumpStart Taq-Antikörper keinen Vorinkubationsschritt vor der Zyklierung, da die Polymeraseaktivität im ersten Denaturierungszyklus der PCR-Reaktion vollständig wiederhergestellt wird.

Schnelle Erkennung und Bestätigung der richtigen Mischung durch inerten roten Farbstoff. Nach der PCR kann ein Aliquot der Proben (5-10 μL) direkt auf ein Agarose-Gel aufgetragen werden. Der rote Farbstoff wandert mit der gleichen Geschwindigkeit wie ein 125-Basenpaar-Fragment, also etwas schneller als Bromphenolblau.

Das PCR-Produkt kann mit Standard-Aufbereitungsmethoden einfach vom Farbstoff getrennt werden. Der inerte rote Farbstoff hat keinen Einfluss auf die automatisierte Sequenzierung, den Verdau des Restriktionsenzyms, die Ligation oder andere nachfolgende Anwendungen.

Leistungsmerkmale und Vorteile

• JumpStart REDAccuTaq LA-DNA-Polymerase ist ein Antikörper-inaktiviertes Heißstart-Enzym, das die unspezifische Amplifikation minimiert und gleichzeitig die Ausbeute und Spezifität erhöht.
• Eine bis zu 6,5-fach höhere Wiedergabetreue im Vergleich zur Taq-DNA-Polymerase macht sie zum bevorzugten Enzym für Multiplex-PCR
• Erzeugt Amplicons mit einer Größe von bis zu 22 kb auf genomischen Templates und von bis zu 40 kb auf weniger komplexen Templates wie der genomischen DNA von Lambda-Phagen oder Bakterien
• Verkürzt die Vorbereitungszeit und räumt Bedenken in Zusammenhang mit manuellen oder Wachs-Heißstart-Methoden aus
• Der Farbstoff ermöglicht eine schnelle visuelle Bestätigung, dass das Enzym zugegeben und ordnungsgemäß gemischt wurde
• Direktes Auftragen auf ein Agarose-Gel ohne zusätzliche Farbstoffe

Verpackung

Optimierter 10×-Reaktionspuffer im Lieferumfang enthalten.

Einheitendefinition

Eine Einheit bindet 10 nmol der gesamten dNTP innerhalb von 30 Minuten bei 74 °C in säurefällbare DNA ein.

Sonstige Hinweise

Weitere Informationen über JumpStart REDTaq- und AccuTaq-Enzyme finden Sie unter www.sigma-aldrich.com/hotstart.

Rechtliche Hinweise

Die Verwendung dieses Produkts unterliegt einem oder mehreren der folgenden US-Patente und entsprechenden Patentansprüchen außerhalb der USA: 5,789,224, 5,618,711, 6,127,155 und Ansprüchen außerhalb der USA, die dem ausgelaufenen US-Patent Nr. 5,079,352 entsprechen. Der Erwerb dieses Produkts umfasst eine beschränkte, nicht übertragbare Immunität gegenüber Rechtsschutzverfahren gemäß den oben genannten Patentansprüchen für den ausschließlichen Gebrauch dieser Menge des Produkts für eigene interne Forschungsanwendungen des Käufers. Es wird weder ausdrücklich noch implizit noch durch Rechtsverwirkung ein Rechtsanspruch unter anderen Patentsprüchen, ein Rechtsanspruch auf die Anwendung einer patentierten Methode oder ein Rechtsanspruch zur Erbringung kommerzieller Leistungen jeglicher Art übertragen, einschließlich, aber nicht beschränkt auf das Berichten der Ergebnisse aus den Aktivitäten des Käufers gegen Entgelt oder andere kommerzielle Gegenleistungen. Dieses Produkt ist nur für Forschungszwecke vorgesehen. Diagnostische Anwendungen nach Roche-Patentansprüchen erfordern eine gesonderte Lizenz von Roche. Weitere Informationen über den Erwerb von Lizenzen erhalten Sie vom Director of Licensing, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California, 94404, USA.

JumpStart is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

REDAccuTaq is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Sicherheitshinweise

• H-Sätze: H412
• P-Sätze: P273 - P501
• Gefahreneinstufungen: Aquatic Chronic 3
• Lagerklassenschlüssel: 10 - Combustible liquids
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable