SCR727

B18R-E3L-Plasmid (humanes Kodon, optimiert für B18R und E3L)

To strongly suppress more interferon responses than single B18R to enable more expression of a Simplicon^® RNA or regular mRNA(s).

• UNSPSC-Code: 12352207
• eCl@ss: 32161000
• NACRES: NA.51

Eigenschaften

• Methode(n): nucleic acid detection: suitable (RNA)
• Versandbedingung: ambient

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Simplicon ist ein neuartiges System zur sofortigen, anhaltend hohen Proteinexpression des/der Zielgene(s) ohne das Risiko einer Integration. Bei dieser Technologie wird eine selbstreplizierende RNA auf der Grundlage des Genoms der venezolanischen Pferdeenzephalomyelitis (VEE) verwendet. Aufgrund der Natur einer synthetischen und selbstreplizierenden RNA treten Interferon(IFN)-Reaktionen bei der Transfektion und Replikation von Simplicon-RNA auf. Die IFN-Antworten reduzieren die Expression und Lebensdauer der Simplicon-RNA. Daher ist es wichtig, die IFN-Antworten im Simplicon-System zu unterdrücken. B18R wirkt als Decoy-Rezeptor für Typ-I-Interferone und hemmt IFN-alpha-, -beta- und -omega sowie andere Typ-I-IFN-Rezeptoren. Wenn nur B18R eingesetzt wird, treten weiterhin geringfügige IFN-beta-Reaktionen auf. Das Vacciniavirus-E3L-Gen kodiert zwei doppelsträngige RNA-Bindungsproteine, welche die IFN-beta-Reaktion unterdrücken und die Expression der Simplicon-RNA bei RNA-Transfektion und kontinuierlicher Zellkultur verbessern. Im Produkt B18R-E3L-Plasmid (humanes Kodon, optimiert für B18R und E3L) werden B18R und E3L als polycistronische DNA bereitgestellt, die in eine polycistronische mRNA transkribiert werden kann, die mit Simplicon-RNA zur IFN-Suppression co-transfiziert wird. Für die kontinuierliche Expression wird das B18R-Protein als B18R-konditioniertes Medium (B18R CM) oder rekombinantes Protein benötigt.

Anwendung

Das B18R-E3L-Plasmid (humanes Kodon, optimiert für B18R und E3L) wird als polycistronische DNA mit den Genen B18R und E3L bereitgestellt, um die Interferon(IFN)-Antworten, welche die Simplicon-RNA oder reguläre mRNA abbauen, stärker zu unterdrücken. Nach der Transkription wirkt die B18R-RNA (E3L) bei einer einzigen Co-Transfektion mit Simplicon-RNA oder bei wiederholter Co-Transfektion mit regulärer mRNA. B18R-RNA (E3L) kann auch zur Herstellung von B18R-CM (B18R-konditioniertes Medium) verwendet werden.

Starke Suppression von mehr Interferon-Antworten als bei einzelnem B18R, für eine stärkere Expression der Simplicon-RNA oder regulärer mRNA.

Lagerung und Haltbarkeit

B18R-E3L-Plasmid (Art.-Nr. SCR727). Ein (1) Fläschchen mit 10 µl Plasmid (1 µg/µl). Bei -20 °C aufbewahren.

Sonstige Hinweise

Konzentration: Die Konzentration entnehmen Sie bitte dem chargenspezifischen Datenblatt.

Rechtliche Hinweise

SIMPLICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Haftungsausschluss

Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 12 - Non Combustible Liquids
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable