MABT366

Anti-Claudin-1/CLDN1-Antikörper, Klon 7A5

clone 7A5, from mouse

• Synonym(e): Claudin-1, Senescence-associated epithelial membrane protein
• UNSPSC-Code: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Eigenschaften

• Biologische Quelle: mouse
• Qualitätsniveau: 100
• Antikörperform: purified immunoglobulin
• Antikörper-Produkttyp: primary antibodies
• Klon: 7A5, monoclonal
• Speziesreaktivität: human
• Darf nicht reagieren mit: mouse
• Methode(n): flow cytometry: suitable; immunocytochemistry: suitable; western blot: suitable
• Isotyp: IgG1κ
• NCBI-Hinterlegungsnummer: NP_066924
• UniProt-Hinterlegungsnummer: O95832
• Versandbedingung: dry ice
• Posttranslationale Modifikation Target: unmodified
• Angaben zum Gen: human ... CLDN1(9076) , NISCH(11188)

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Claudin-1 (UniProt O95832; auch bekannt als Seneszenz-assoziiertes Epithelmembran-Protein) wird vom CLDN1-Gen (auch bekannt als CLD1, ILVASC, NISCH, SEMP1) (ORF UNQ481/PRO944; Gen-ID 9076) in Menschen kodiert. Tight Junctions (TJs) sind hoch-spezialisierte Membranbarrieren, welche die parazelluläre Passage von kleinen Molekülen, Mikroorganismen und Zellen verhindern und zugleich eine physische Barriere zwischen den apikalen und basolateralen Membrandomänen einer polarisierten Epithelzelle bilden. Claudine sind TJ-Proteine, deren Hauptfunktion die Regelung der Passage von Ionen durch den parazellulären Raum ist. Es gibt mindestens 27 humane Claudine mit unterschiedlichen epithelialen Expressionsmustern für den gewebespezifischen parazellulären Transport von Ionen. Claudin-1 wird auf den apikalen und basolateralen Oberflächen der Hepatozyten in normalem Lebergewebe exprimiert. Claudin-1 ist ein bekannter Wirtsfaktor für den Zelleintritt des Hepatitis-C-Virus (HCV) durch Interaktion mit CD81 und Übertragung des HCV von Zelle zu Zelle. Claudin-1 ist ein Transmembranprotein mit vier Transmembranabschnitten (AS 8-28, 82-102, 116-136, 164-184) mit zytoplasmatisch exponierten N- und C-terminalen Enden (AS 1-7 und 185-211).

Spezifität

Klon 7A5 erkannte spezifisch humanes Claudin-1/CLDN1 durch Targeting eines Epitops in der zweiten extrazellulären Schleife und verhinderte den Eintritt des Claudin-1-abhängigen Hepatitis-C-Virus (HCV) in die Wirtszellen. Klon 7A5 reagiert weder mit humanem Claudin-2, -4, -5, -6, -7 oder -9 noch mit murinem Claudin-1 (Fukasawa, M., et al. (2015). J. Virol. 89(9):4866–4879).

Immunogen

Epitop: Zweite extrazelluläre Schleife.

Rekombinantes humanes Claudin-1/CLDN1.

Anwendung

Dieser Anti-Claudin-1-Antikörper, Klon 7A5, ist zur Verwendung in Immunzytochemie, Western Blots und Durchflusszytometrie für den Nachweis von CLDN1 validiert.

Durchflusszytometrie-Analyse: 5,0 µg/ml einer repräsentativen Charge immunfärbte HT1080-Zellen, die exogen transfizierten humanen Claudin-1/CLDN1 exprimierten, und humane Huh-7.5.1-Hepatomzellen, jedoch keine mock-transfizierten HT1080-Zellen und keine nicht-Claudin-1-exprimierenden S7-d6-Zellen (mit freundlicher Genehmigung von Professor Masuo Kondoh, PhD, Osaka University, Japan).
Western-Blot-Analyse: 0,5 µg/ml einer repräsentativen Charge wies exogen exprimierten Claudin-1-Antikörper in CLDN1-transfizierten, jedoch nicht in mock-transfizierten HT1080-Zellen nach (mit freundlicher Genehmigung von Professor Masuo Kondoh, PhD, Osaka University, Japan).
Immunzytochemie-Analyse: Eine repräsentative Charge immunfärbte die Oberfläche von humanen Huh-7.5.1-Hepatomzellen, jedoch keine nicht-Claudin-1-/CLDN1-exprimierenden S7-A Zellen (Fukasawa, M., et al. (2015). J. Virol. 89(9): 4866-4879.).
Durchflusszytometrie-Analyse: Eine repräsentative Charge immunfärbte spezifisch HT1080-Zellen, die exogen transfizierten humanen Claudin-1 (CLDN1) exprimierten, jedoch keine HT1080-Zellen, die humanen Claudin-2, -4, -5, -6, -7 oder -9 exprimieren, und keine Maus-Claudin-1 exprimierenden L-Zellen (Fukasawa, M., et al. (2015). J. Virol. 89(9): 4866-4879.).
Durchflusszytometrie-Analyse: Eine repräsentative Charge immunfärbte HEK293T-Transfektanten, die FLAG-markierten humanen Claudin-1/CLDN1 exprimieren, und Human-Maus-Claudin-1-Chimären mit der zweiten humanen extrazellulären Schleife (EL2), jedoch keine Chimären mit Maus-EL2. Die M152L-Mutation, jedoch nicht die V155I-Mutation, in der humanen EL2 eliminierte die Immunreaktivität (Fukasawa, M., et al. (2015). J. Virol. 89(9):4866–4879).
Western-Blot-Analyse: Eine repräsentative Charge wies FLAG-markierten humanen Claudin-1/CLDN1 und Human-Maus-Claudin-1-Chimären mit der zweiten humanen extrazellulären Schleife (EL2) nach, jedoch keine Chimären mit Maus-EL2. Die M152L-Mutation, jedoch nicht die V155I-Mutation, in der zweiten humanen extrazellulären Schleife eliminierte die Immunreaktivität (Fukasawa, M., et al. (2015). J. Virol. 89(9):4866–4879).
ELISA-Analyse: Eine repräsentative Charge wies Claudin-1/CLDN1-Immunreaktivität mittels ELISA in 3,7% Formaldehyd-fixierten humanen Huh-7.5.1-Hepatomazellen nach (Matheu, A., et al. (2015). J. Virol. 89(9):4866-4879).
Neutralisations-Analyse: Eine repräsentative Charge hemmte die HCV-Infektion von kultivierten humanen Huh-7.5.1-Hepatomzellen in-vitro und von chimären Mäusen mit Humanleberzellen in-vivo (Fukasawa, M., et al. (2015). J. Virol. 89(9):4866–4879).

Forschungskategorie
Zellstruktur

Forschungsunterkategorie
Infektionskrankheiten – viral

Qualität

Mittels Immunzytochemie in HepG2-Zellen beurteilt.

Immunzytochemische Analyse: 10 µg/ml dieses Antikörpers wies Claudin-1/ CLDN1 in HepG2-Zellen nach.

Zielbeschreibung

~20 kDa beobachtet. 22,74 kDa berechnet.

Physikalische Form

Aufgereinigter monoklonaler Maus-IgG2aκ-Antikörper in PBS ohne Konservierungsmittel.

Format: Aufgereinigt

Über Protein G aufgereinigt.

Lagerung und Haltbarkeit

Bei -20 °C ab Empfangsdatum 1 Jahr haltbar.
Handhabungsempfehlungen: Das Fläschchen nach Empfang und vor dem Abnehmen der Kappe zentrifugieren und die Lösung vorsichtig mischen. In Mikrozentrifugenröhrchen aliquotieren und bei -20 °C aufbewahren. Wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen sind zu vermeiden, da sie das IgG beschädigen und die Produktleistung beeinträchtigen können.

Sonstige Hinweise

Konzentration: Die Konzentration entnehmen Sie bitte dem chargenspezifischen Datenblatt.

Haftungsausschluss

Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.

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