면역검출 시약 및 기질

차단 시약

비결합 막 부위의 차단은 높은 배경을 초래할 수 있는 항체의 비특이적 결합을 방지합니다. 기존 우유, 젤라틴 및 기타 단백질 기반 차단제는 많은 블롯팅 애플리케이션에 효과적이지만 신호를 마스킹하거나 특정 단백질 표적의 검출을 방해하여 감도 또는 검출을 감소시킬 수 있습니다. Immobilon^® Block Noise Cancelling Reagents는 화학발광, 형광 또는 인단백질 검출을 사용할 경우 배경 수준을 낮추도록 최적화된 무단백질(protein-free)이며 즉시 사용할 수 있는 완충액을 포함합니다.

스트렙트아비딘 및 2차 항체 접합체

현대 면역검출법은 스트렙트아비딘 또는 호스래디시(Horseradish) 퍼록시다아제(HRP) 또는 알칼리성 인산분해효소(AP)와 같은 효소에 공유 결합된 2차 항체를 사용한 효소 연결 검출을 기반으로 합니다. 접합 효소는 특정 기질의 분해를 촉진하며, 이는 신호 생성을 유발합니다. 다양한 스트렙트아비딘, 단백질 A, 단백질 G 및 2차 항체 접합체를 웨스턴 블로팅에 사용할 수 있습니다. 또한, 자사는 웨스턴 블롯팅에서 화학발광, 발색 및 화학형광 검출을 위한 다양한 HRP 및 AP 기질을 제공합니다.

웨스턴 블롯팅을 위한 화학발광 기질

화학발광 검출을 위한 Immobilon^® HRP 기질은 보다 많은 양의 블롯에 대해 향상된 감도를 제공하며, 이는 검출에 사용되는 항체의 농도를 낮춤으로써 비용을 절감합니다. 편리하며 즉시 사용할 수 있는 다양한 감도의 Immobilon® 기질 포트폴리오 또는 두 가지 성분 형식 중에서 선택하여 웨스턴 블롯팅 애플리케이션에 대한 검출을 최적화하십시오.

• Immobilon^® Classico, Crescendo and Forte Chemiluminescent substrates는 다양한 감도에서 제공되는 퍼록시다아제 기반 검출을 위해 즉시 사용 가능한 사전 혼합 시약 제품군으로 구성되어 표적 단백질 농도 스펙트럼에 걸쳐 최적의 신호 대 배경 비율을 제공합니다. 검출 한계:
  • Immobilon^® Classico: 약 6pg의 표적 단백질
  • Immobilon^® Crescendo: 약 1 ~ 3pg의 표적 단백질
  • Immobilon^® Forte: 약 400fg의 표적 단백질
     
• Immobilon^® 웨스턴 HRP, Immobilon^® ECL Ultra, Immobilon^® UltraPlus 웨스턴 기질은 표준 2 성분 형식에서 탁월한 민감도 및 긴 신호 수명을 제공합니다. 이러한 제제는 면역블롯 검출을 위해 더 희석된 일차 항체 용액을 사용할 수 있도록 합니다. 검출 한계:
  • Immobilon^® Western HRP substrate: 약 400fg의 표적 단백질
  • Immobilon^® ECL Ultra 기질: 낮은 펨토그램 범위
  • Immobilon^® ECL UltraPlus 웨스턴 블롯 HRP 기질: 낮은 펨토그램 범위

Immobilon^® 화학발광 HRP 기질의 상대 감도

Cytiva™ Amersham™ ECL 검출 시약은 향상된 루미놀 기반 HRP 검출을 사용하며, 다양한 웨스턴 블롯팅 애플리케이션 필요를 다루기 위해 다양한 제제를 사용할 수 있습니다. 

• Cytiva Amersham™ ECL 웨스턴 블롯팅 검출 시약은 웨스턴 블롯팅 확인 애플리케이션에 추천합니다.
• Cytiva Amersham™ ECL Prime 웨스턴 블롯팅 검출 시약을 사용하면 동일한 블롯에서 높은 및 낮은 과다 단백질 모두를 검출할 수 있습니다.
• Cytiva Amersham™ ECL Select 웨스턴 블롯팅 검출 시약은 희석된 1차 및 2차 항체를 사용하는 경우에도 높은 감도를 제공합니다.
• Cytiva Amersham™ ECL Start Western Blotting 검출 시약은 중간 발현 및 고발현 단백질의 화학발광 검출을 위해 개발되었습니다.

웨스턴 블롯팅을 위한 발색 기질

발색 검출은 과산화효소(예시: HRP) 또는 알칼리 포스파타아제(AP) 접합 효소를 사용하여 검출을 위한 불용성 착색 침전물의 침착을 초래하는 반응을 촉진합니다. 웨스턴 블롯팅을 위한 발색 기질은 용액, 분말 및 정제 형태로 사용 가능하여 유연한 보관 및 사용 옵션을 제공합니다.

• SIGMAFAST™ DAB Tablets (발색 HRP 기질)은 호스래디시 과산화효소와 반응 시 갈색을 생성하는 비색 침전 기질로 구성되어 있으며 물에 녹여 블롯팅 검출을 위한 즉시 사용 가능한 완충 용액을 제조할 수 있습니다.
• BCIP/NBT(blue/purple) 및 BCIP/TNBT(blue/brown) 단일 시약(발색 AP 기질)은 알칼리성 포스파타아제에 대한 고도로 민감한 비색 기질입니다.
• TMB Enhanced One Component HRP Membrane Substrate(발색 HRP 기질)는 다크 블루 생성물을 생성하는 단일 성분 비색 기질입니다.

신호 증강제

• Immobilon^® Signal Enhancer는 낮은 신호 강도가 관찰될 경우 웨스턴 블롯팅 애플리케이션에 사용하도록 설계되었습니다. 항체-항원 반응 향상은 신호 강도의 2 ~ 10배 증가를 생성할 수 있습니다. Immobilon^® Signal Enhancer는 PVDF 및 니트로셀룰로오스막과 호환되며 발색, 화학발광 및 형광 검출 방법과 함께 사용할 수 있습니다.
• SignalBoost™ Immunoreaction Enhancer Kit는 니트로셀룰로오스 또는 PVDF막에서 화학발광 또는 비색 표적 신호를 향상시키도록 설계되었습니다.

스트립핑 및 재프로빙을 위한 시약 및 키트

스트립핑 및 재프로빙 시약은 고정된 단백질에 큰 영향을 미치지 않으면서 웨스턴 블롯에서 항체를 빠르고 효과적으로 제거하도록 특별히 제조되었습니다.

• ReBlot™ Plus 시약은 결합된 항체의 프로브된 블롯을 효과적으로 스트립핑합니다. ReBlot™ Plus 시약은 약한 제형과 강한 제형으로 제공됩니다.