2차 항체
그림 1.면역형광. Anti-von Wille를 사용하여 염색된 말과다육아조직 (췌육) 조직.
2차 항체는 Fc 또는 Fab 영역과 같은 1차 항체 또는 항체 단편에 결합하는 다중클론 또는 단일클론 항체입니다. 일반적으로, 검출, 정제 또는 분류 애플리케이션에 유용하도록 프로브로 라벨링되어있습니다.
자사는 다양한 숙주 종의 2차 항체를 제공합니다. 자사의 다중클론 2차 항체는 마우스, 토끼, 염소 및 양과 같은 숙주 동물의 혈청에서 생산됩니다. 반면, 자사의 단일클론 2차 항체는 마우스 하이브리도마 클론에서 생산됩니다.
귀하의 용도에 적합한 항체를 찾는 데 도움이 필요하신가요?
자사의 항체 탐색기 검색 도구를 사용하여 항체를 클론성, 애플리케이션, 종 반응성, 접합체, 숙주 종 및 형태별로 살펴보고 비교해보십시오.
그림 2.영원(newt) 폐 세포의 유사체 분열 형광 현미경 이미지. 단일클론 Anti-^로 염색된 미세소관.
그림 3.면역세포화학. Mouse Anti-neurofilament H 및 CF568 Goat Anti-Mouse(뉴런 프로세스, red), Rabbit Anti-GFAP 및 CF488A Goat Anti-Rabbit, 고도 교차 흡착(교세포, green)으로 염색된 래트 시신경의 동결 절편. 핵은 RedDot2(cyan)로 염색됩니다.
접합 항체 및 프로브
자사는 광범위한 접합 항체 포트폴리오를 제공합니다. 접합 항체는 표지에 연결되어 다양한 분석 기술에서 검출에 사용되는 단일클론 또는 다중클론 항체입니다. 2차 항체의 특정 유용성은 접합 프로브에 따라 다릅니다. 프로브는 다양한 검출 기술을 지원하는 분자입니다. 접합 2차 항체의 가장 일반적인 검출 시스템은 비색 또는 형광입니다.
비색 분석은 일반적으로 alkaline phosphatase (ALP) 또는 horseradish peroxidase (HRP) 또는 그 유도체의 사용을 기반으로 합니다. Biotin avidin (streptavidin) 접합체 결합 시스템은 종종 ALP 또는 HRP의 비색 신호를 증폭시키기 위해 사용됩니다. 가장 일반적인 형광 분석법은 fluorescein isothiocyanate (FITC), Rhodamine 또는 그 유도체, tetramethylrhodamine isothiocyanate (TRITC), cyanine (Cy3) 또는 phycoerythrin (R-PE)을 활용합니다.
자사는 검출, 정제, 분류 및 현미경 애플리케이션에 사용되는 다양한 컬러메트릭 및 형광 라벨에 연결된 접합 항체를 제공합니다. 접합 항체는 다양한 숙주 동물에서 생산되어 다양한 면역화학 시약과 호환됩니다. 자체 시약 표지가 요구되는 연구 사용자를 위해, 다양한 표지(바이오틴, FITC, CF™ 표지)를 단일클론 및 다중클론 항체에 접합하기 위한 항체 표지 키트를 제공합니다.
단백질 A, G 및 L
단백질 A는 황색포도상구균(Staphylococcus aureus)에서 유래합니다. 단백질 G는 연쇄상구균(Streptococcus) 종에서 유래합니다. 둘 다 포유류 IgG의 Fc 부분에 대한 결합 부위를 가지고 있습니다. IgG에 대한 이러한 단백질 친화성은 동물 종에 따라 다릅니다. 단백질 G는 래트, 염소, 양, 소 IgG 뿐만 아니라 마우스 IgG1 및 인간 IgG3에 대해 보다 높은 친화성을 가지고 있습니다. 단백질 A는 고양이 및 기니피그 IgG에 대한 친화성이 더 높습니다(표 1). IgG Fc 결합 부위 외에도 천연 단백질 G는 알부민에 대한 결합 부위, Igs의 Fab 영역 및 멤브레인 결합 부위를 함유하고 있어, 비특이적 염색을 유발할 수 있습니다. 이러한 문제들은 단백질의 재조합 형태를 만들어 해결되었습니다. 재조합 단백질 G는 알부민 결합 영역을 제거하기 위해 엔지니어링되었으며, 재조합 단백질 G'은 알부민, Fab 및 막 결합 부위를 가지지 않은 단축된 단백질로 Fc 결합 부위를 보존하여 원래 형태보다 IgG에 더 특이적입니다.
표 1.다양한 종에 대한 단백질 A, G 및 L 결합 능력.
Peptostreptococcus magnus의 단백질 L은 다양한 종의 카파 경쇄(표 2)에 친화성이 있습니다. 이는 카파 경쇄를 함유하는 단일클론 또는 다중클론 IgG, IgA, IgM 뿐만 아니라 Fab, F(ab')2, 재조합 단일쇄 Fv(scFv) 단편도 검출합니다. 또한, 이는 닭 IgG에 결합합니다. 참고: 소, 염소, 양, 그리고 말과 같은 종은 거의 전적으로 람다 체인을 포함한 면역글로불린(Ig)을 가지고 있기 때문에, 이러한 종들의 Ig는 단백질 L에게 잘 또는 전혀 결합하지 않을 것입니다.
표 2.다양한 면역글로불린 경쇄에 결합한 단백질 L.
검출 시약
단백질 A 및 G는 포유류 조직에서 1차 항체 또는 표면 IgG에 결합하기 위한 일반적인 비 종특이적 시약으로 사용됩니다. 단백질 G는 마우스와 래트를 포함한 대부분의 종에 권장됩니다. 단백질 A는 고양이 및 기니피그에 권장합니다. 두 단백질 모두 IgA 또는 IgM 검출, Fab 단편 검출 또는 조류 IgG 검출에는 추천하지 않습니다. 단백질 A 및 단백질 G는 아가로스와 같은 레진에 결합되어 혈청 또는 복수체 액체에서 면역글로불린의 친화성을 정제하는 데 사용될 수 있습니다.
단백질 L은 일반적으로 포유류 또는 조류 항체 또는 모든 클래스의 표면 면역글로불린과 결합하는 데 일반적으로 사용됩니다. 특히 Fab, F(ab')2 단편 및 재조합 scFv 단편의 검출, Fc 수용체에 결합된 Ig의 검출, 또는 소 Ig의 존재 하에 단일클론 항체의 검출에 유용합니다. 용도는 카파 경쇄를 포함하는 Igs의 검출로 제한됩니다.
레진(Resins)
단백질 A 및 단백질 G는 포유류 IgG의 Fc 부분에 대한 결합 부위를 가집니다. IgG에 대한 이러한 단백질의 능력은 종에 따라 다릅니다. 일반적으로, IgG는 단백질 A보다 단백질 G에 대해 더 높은 친화성을 가지며, 단백질 G는 보다 다양한 종의 IgG에 결합할 수 있습니다. 다양한 IgG 서브클래스의 경우, 특히 쥐와 인간의 경우, 단백질 A에 대한 친화도는 단백질 G에 비해 더 다양합니다. 따라서 단백질 A는 일부 종에서 동형적으로 순수한 IgG를 준비하는 데 사용될 수 있습니다. 단백질 L은 소 IgG로 오염 없이 세포 배양 상층액에서 쥐 단일항체를 분리하는 데 적합합니다.
그림 4.CF™ 염료. Mouse-Anti-튜블린 및 CF488A Goat Anti-Mouse 2차 항체(미세소관, green)로 염색된 HeLa 세포. 액틴 필라멘트는 CF640R 팔로이딘(purple)으로 염색됩니다. 핵은 DAPI(blue)로 대조염색됩니다.
계속 읽으시려면 로그인하거나 계정을 생성하세요.
계정이 없으십니까?