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Merck

발열원 검사

발열원은 주로 박테리아 또는 바이러스나 효모 및 곰팡이와 같은 다른 미생물체로부터 유래한 발열을 유발하는 물질입니다.

발열원 검사는 비경구 제약품에서 발열원의 존재 여부를 측정하며 식품의약국(FDA), 미국 약전(USP) 또는 유럽 약전(EP)과 같은 기구의 여러 표준으로 규제됩니다. 제품의 멸균성이 발열원의 부재를 의미하지는 않습니다. 따라서, 멸균성으로 의도된 약물은 환자에서 발열 반응을 방지하도록 발열원에 대해 반드시 검사해야 합니다. 

발열원 오염은 제약류, 생물치료제 및 의료 기기의 생산 또는 투약 중에 발생하지만, 발열원의 존재는 백신의 보강제 또는 합성 지질펩타이드와 같은 해당 제품의 내재적 특징일 수 있습니다.


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발열원 검사 웹페이지 그림

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발열원은 무엇입니까?

발열원은 선천성 면역계를 활성화하여 사람이나 동물의 체온 상승(발열 반응)을 유발하는 물질입니다. 이는 미생물적 및 비미생물적 물질을 포함하는 오염물의 비균질성 집단으로 구성되어 있습니다. 발열원은 내독소 및 비내독소 발열원(NEP)의 두 집단으로 분류될 수 있습니다. 내독소는 그람 음성 세균에서 발견되는 물질입니다. 비내독소 발열원은 그람 양성 세균 또는 바이러스 그리고 효모 및 진균에서 유래된 발열원을 포함한 다른 미생물 물질입니다. 비미생물 발열원 물질은 고무 입자, 미세한 플라스틱 입자 또는 탄성체의 금속 화합물에서도 유래할 수 있습니다.

발열원의 검출을 위해 여러 검사법이 있습니다. 검출하는 오염물의 유형 그리고 아래의 표에 설명된 해당 검사를 수행하기 위해 필요한 동물 재료의 필요성에 따라서 분류할 수 있습니다.

토끼 발열원 검사

토끼 발열원 검사(RPT)는 검사 제품의 정맥 내 주사 이후 토끼의 체온 상승을 측정합니다. RPT는 정성적 결과를 제공하지만 민감도는 상당히 낮습니다. 이 검사의 강건성은 반복된 주사 이후 토끼에서 발열원 내성의 발달 또는 분석 수행 시 토끼의 스트레스로 인해 제약이 또한 있습니다.

단핵구 활성 검사

단핵구 활성 검사(MAT)는 내독소 및 비내독소 발열원 모두의 검출을 위한 동물 기반 방법에 대해 대안적입니다. 단핵구 활성 검사는 검사 샘플과 함께 단핵구를 배양하여 사람 면역 반응을 모방합니다. 발열원이 존재하는 경우, 단핵구가 활성화되어 발열 반응을 일으키는 염증성 분자인 사이토카인을 생산합니다. 이후 사이토카인은 특이적 항체 및 효소 발색 반응을 포함하는 면역분석법(ELISA)을 이용하여 검출합니다. 

주의: 유럽 약전(Ph. Eur.) 위원회는 궁극적으로 약 5년 이내에 유럽 약전의 토끼 발열원 검사(RPT)를 완전히 대체할 수 있는 방향으로 나아가기로 결정하였습니다. 
이에 따른 조치를 시작하기 위해 기사를 읽고 당사의 전문가와 더 자세히 논의하십시오. 

세균성 내독소 검사(LAL 검사)

내독소 검사를 위한 가장 일반적인 방법은 리물루스 아메보사이트 용혈물(LAL 검사)이며, 이 분석은 투구게 혈액에서 유래한 유주세포의 용혈물을 기반으로 합니다. 투구게 혈액 세포의 용혈물은 자체적으로 세균성 내독소와 반응하여 응고 반응을 유발합니다. 이 방법은 내독소를 정량화하는 데 높은 민감도를 가지지만, 비내독소 발열원을 검출하지 않습니다.

재조합 인자 C(rFC) 검사

재조합 인자 C는 리물루스 아메보사이트 용혈물 연쇄반응에서 일반적으로 발견되는 유전학적으로 제조된 단백질입니다. 이 검사에서, 인자 C는 내독소와 반응하고 표지자와 결합하여 정량이 가능한 형광 최종산물을 생산합니다. 재조합 인자 C 검사는 LAL 검사와 동일한 원리를 이용하지만, 동물 유래 물질을 필요로 하지 않습니다. 






하이라이트

단핵구 활성 검사: 제약 공정에서 발열원 위험성을 평가하는 강력한 도구

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제약 분야에서의 생체외 발열원 검출


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