05-321

Anticorpo anti-fosfotirosina, clone 4G10^®

clone 4G10®, Upstate^®, from mouse

• Sinonimo/i: Anti-fosfotirosina clone 4G10
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Clone: 4G10®, monoclonal
• Technique(s): immunocytochemistry: suitable, immunohistochemistry: suitable, immunoprecipitation (IP): suitable, western blot: suitable
• Application: ICC, IHC, IP, WB
• Citations: 3242

Proprietà

• biological source: mouse
• Quality Segment: 100
• antibody form: purified antibody
• antibody product type: primary antibodies
• clone: 4G10®, monoclonal
• species reactivity (predicted by homology): all
• manufacturer/tradename: Upstate^®
• technique(s): immunocytochemistry: suitable, immunohistochemistry: suitable, immunoprecipitation (IP): suitable, western blot: suitable
• isotype: IgG2bκ
• shipped in: wet ice
• target post-translational modification: phosphorylation (pTyr)

Descrizione

General description

Dipende dal peso molecolare della proteina con tirosina fosforilata rilevata.

Per mezzo delle protein chinasi è possibile marcare alcuni residui della tirosina con un gruppo fosfato (fosforilazione). (Nello stato fosforilato assume il nome di fosfotirosina.) La fosforilazione della tirosina è considerata uno dei passaggi chiave nella trasduzione del segnale e nella regolazione dell′attività enzimatica.
L′avvento degli anticorpi anti-fosfotirosina è uno degli eventi significativi nella ricerca sulla trasduzione del segnale. Prima che fossero disponibili gli anticorpi anti-fosfotirosina, la tirosil fosforilazione delle proteine e degli enzimi era studiata per mezzo di esperimenti radioattivi pericolosi e che richiedevano molto tempo. Gli anticorpi anti-fosfotirosina sono comunemente usati nei western blot dopo immunoprecipitazione delle proteine bersaglio per misurare la tirosil fosforilazione delle proteine. Gli anticorpi anti-fosfotirosina si usano anche direttamente sulle cellule lisate per esaminare la variazione complessiva del livello di fosforilazione della tirosina in risposta a diversi trattamenti.

Immunogen

Fosfotiramina-KLH

Application

Categoria di ricerca
Trasmissione del segnale

Immunoprecipitazione:
2-4 μg di un lotto precedente inducevano l′immunoprecipitazione quantitativa delle proteine contenenti fosfotirosina nel lisato di una coltura confluente (piastra da 10 cm) di cellule che esprimevano una tirosin chinasi attivata. Per conservare la fosfotirosina, aggiungere: 0,2 mM di sodio ortovanadato al tampone di lisi.

L′anticorpo anti-fosfotirosina, clone 4G10, rileva le proteine con tirosina fosforilata in tutte le specie. Questo anticorpo monoclonale unico è convalidato per l′uso in IC, IH, IP, WB ed è supportato da centinaia di pubblicazioni.

Sottocategoria di ricerca
Modificazione generale post-traduzione

Biochem/physiol Actions

Questo anticorpo riconosce le proteine con tirosina fosforilata da tutte le specie.

Physical form

0,1 M Tris-glicina, 0,15 M NaCl, 0,05% sodio azide, pH 7,4. Liquido a 2-8 °C.
Anticorpo monoclonale di topo IgG2bκ prodotto in vitro da ibridoma topo-topo 4G10 (cellule di mieloma-milza FOX-NY [derivato NS-1]).

Cromatografia con Protein G-Sepharose

Formato: Purificato

Preparation Note

Stabile per 1 anno a 2-8 °C dalla data di ricevimento.

NOTA: NON CONGELARE.
Per recuperare il massimo del prodotto, centrifugare il flaconcino originale prima di togliere il tappo. Se il prodotto è stato inavvertitamente congelato e scongelato, farlo girare a 13 000 x g per 10 minuti a 2-8 ºC. Tenere da parte il supernatante per l′applicazione.

Analysis Note

Controllo
controllo antigenico positivo: N° Cat. 12-302, lisato di cellule A431 stimolate con EGF. Aggiungere 2,5 µL di 2-mercaptoetanolo/100 µL di lisato come agente riducente e fare bollire per 5 minuti. Caricare 20 µg di lisato ridotto per corsia di minigel.

Valutato abitualmente su cellule di carcinoma umano A431 trattate con EGF.

Analisi western blot:
0,5-2 μg/mL di questo lotto hanno rilevato proteine con tirosina fosforilata in un lisato RIPA modificato da cellule di carcinoma umano A431 trattate con EGF (Cohen, B., 1990; Druker, B. J., 1989; Kanakura, Y., 1991).

Other Notes

Concentrazione: Per la concentrazione specifica del lotto, consultare il Certificato di analisi.

Sostituisce: MAB3090

Legal Information

4G10 is a registered trademark of Upstate Group, Inc.

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

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Informazioni sulla sicurezza

• Classe di stoccaggio: 12 - Non Combustible Liquids
• wgk: WGK 1
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable