This is not a species specific antigen, it is a slightly modified β-cytoplasmic actin N-terminal peptide, Ac-Asp-Asp-Asp-Ile-Ala-Ala-Leu-Val-Ile-Asp-Asn-Gly-Ser-Gly-Lys, conjugated to KLH. It has multi-species reactivity as it is a highly conserved region of the protein among species.
A5441
Anti-β-Actin (ACTB) Antibody
Monoclonal Anti-β-Actin antibody produced in mouse
mouse monoclonal, AC-15
Sinónimos:
Anti-β-actina monoclonal
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About This Item
Código UNSPSC:
12352203
NACRES:
NA.41
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Nombre del producto
Anti-β-actina monoclonal antibody produced in mouse, clone AC-15, ascites fluid
origen biológico
mouse
Nivel de calidad
conjugado
unconjugated
forma del anticuerpo
ascites fluid
tipo de anticuerpo
primary antibodies
clon
AC-15, monoclonal
mol peso
antigen 42 kDa
contiene
15 mM sodium azide
reactividad de especies
sheep, carp, feline, chicken, rat, mouse, Hirudo medicinalis, rabbit, canine, pig, human, bovine, guinea pig
no debe reaccionar con
Dictyostelium discoideum
técnicas
immunohistochemistry (formalin-fixed, paraffin-embedded sections): suitable
indirect ELISA: suitable
indirect immunofluorescence: 1:1,000-1:2,000 using cultured human or chicken fibroblasts
western blot: 1:5,000-1:10,000 using cultured human or chicken fibroblast cell extracts
isotipo
IgG1
Nº de acceso UniProt
aplicaciones
research pathology
Condiciones de envío
dry ice
temp. de almacenamiento
−20°C
modificación del objetivo postraduccional
unmodified
Información sobre el gen
human ... ACTB(60)
mouse ... Actb(11461)
rat ... Actb(81822)
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Descripción general
El anti-β-actina monoclonal (isotipo IgG1 de ratón) se obtiene del hibridoma AC-15 producido por la fusión de células de mieloma de ratón y esplenocitos de un ratón inmunizado. La actina es una de las proteínas eucariotas más conservadas, se expresa en mamíferos y aves como mínimo en seis isoformas. Cuatro de ellas representan los marcadores de diferenciación del tejido muscular y dos se encuentran prácticamente en todas las células. Hay tres α-actinas (músculo α-esquelético, α-cardiaco y α-liso), una β-actina (β-no muscular) y dos γ-actinas (γ-músculo liso y γ-no muscular). Las isoformas de la actina muestran >90 % de homología de secuencia global, pero sólo un 50−60 % de homología en sus 18 restos NH2-terminales. La región NH2 terminal de la actina parece una importante región antigénica y puede intervenir en la interacción de la actina con otras proteínas como la miosina. El anticuerpo puede utilizarse para tinción de cortes congelados fijados con acetona, preparaciones para microscopia electrónica y experimentos de microinyección. Pueden utilizarse como fijadores las disoluciones B5, etanol, metacam o Bouin. El epítopo reconocido por el anticuerpo es resistente a la fijación con formol y la inclusión en parafina.
En la tinción de criosecciones tisulares ultrafinas de molleja de pollo, el anticuerpo marca los cuerpos densos y los canales longitudinales que unen cuerpos densos consecutivos que también están ocupados por desmina y la placa densa asociada a la membrana. No tiñe los músculos cardiaco y esquelético adultos excepto las trazas debidas a la contaminación de la muestra con células no musculares o si se está utilizando tejido embrionario.
Especificidad
El anticuerpo monoclonal anti-β-actina reconoce un epítopo localizado en el extremo N-terminal de la isoforma β de la actina. El anticuerpo permite etiquetar específicamente la β-actina en una amplia variedad de tejidos y especies utilizando inmunotransferencia (42 kDa), tinción inmunofluorescente de líneas celulares cultivadas e inmunohistoquímica.
Inmunógeno
péptido N-terminal de la actina β-citoplasmática ligeramente modificado, Ac-Asp-Asp-Asp-Ile-Ala-Ala-Leu-Val-Ile-Asp-Asn-Gly-Ser-Gly-Lys, conjugado con KLH.
Aplicación
El anticuerpo anti-β-actina producido en el ratón se ha utilizado también:
- en análisis de inmunofluorescencia
- en inmunotransferencia
- en inmunohistoquímica
- como control para micromatrices de proteínas
El anticuerpo monoclonal anti-actina de ratón se utilizó como control de carga para el análisis mediante inmunoelectrotransferencia de las proteínas inmunoprecipitadas de cocultivos de los ganglios radiculares dorsales de rata.
La anti-actina monoclonal de ratón se utilizó como un control de carga para el análisis mediante transferencia Western de lisados proteicos de hígado de rata.
Acciones bioquímicas o fisiológicas
La actina y la miosina son constituyentes de muchos tipos de células e intervienen en una miríada de procesos celulares, como la locomoción, la citocinesis, la transmisión citoplásmica, la secreción y la fagocitosis. La actina de células de distintas especies y origen tisular es muy similar en sus propiedades físicas e inmunológicas.
Forma física
Suministrados como líquido ascítico con azida sódica 15 mM como conservante.
Otras notas
Para ver una guía de selección de anticuerpos anti-actina, visite www.sigmaaldrich.com/actin.
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Referencia del producto
Descripción
Precios
Código de clase de almacenamiento
10 - Combustible liquids
Clase de riesgo para el agua (WGK)
WGK 1
Punto de inflamabilidad (°F)
Not applicable
Punto de inflamabilidad (°C)
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Protocolos
Western blot protocol details protein transfer from gels to nitrocellulose, crucial for immunoblotting procedures in research.
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species of antigen
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What is the Department of Transportation shipping information for this product?
1 answer-
Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product.
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What IgG light chain (kappa or lambda) is associated with Clone AC-15 for Product A5441, Monoclonal Anti-β-Actin antibody produced in mouse?
1 answer-
We have not determined the light chain used by monoclonal antibody AC-15. 95% of mouse antibodies have kappa light chains.
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What peroxidase-conjugated secondary antibody should I use with Product A5441, Monoclonal Anti-β-Actin antibody produced in mouse?
1 answer-
We recommend using Product No. A9044, rabbit anti-mouse IgG, peroxidase conjugate as a secondary antibody. We also offer this same antibody directly conjugated to peroxidase as Product No. A3854.
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Can I use Product A5441, Monoclonal Anti-β-Actin antibody produced in mouse, to detect mouse beta actin?
1 answer-
This antibody will detect mouse beta actin. When used for western blotting, the secondary antibody may react with mouse IgG from the sample resulting with a bands at 50 kDa and 25 kDa (reducing conditions) or approximately 150 kDa (non-reducing conditions). It is best to use a directly conjugated antibody for immunohistochemistry or immunofluorescent assays. We offer Product numbers A3854, peroxidase conjugated.
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What is the molecular weight of Product A5441, Monoclonal Anti-β-Actin antibody produced in mouse?
1 answer-
Beta Actin has a molecular weight of 42 kDa.
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Why do I have 3 bands on my western blot when using Product A5441, Monoclonal Anti-β-Actin antibody produced in mouse?
1 answer-
While actin should run as a 42 kDa band when detected by Western blotting, there are recent observations that cleavage products can be seen in cells undergoing apoptosis. Initial cleavage gives a band at 41 kDa, which may appear as a doublet on the blot. In addition, further cleavage results in a major band at 30 kDa and a small band at 14 kDa which have been shown to be cleavage products due to the action of interleukin 1 -converting enzyme. This may explain the detection of smaller bands when blotting with this antibody. This banding pattern may be detected with other actin antibodies as well. Kayalar, C., et al., Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 93:2234-2238, (1996).
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What is the antibody concentration of Product A5441, Monoclonal Anti-β-Actin antibody produced in mouse?
1 answer-
This antibody is ascities fluid. The amount of protein present and the amount of IgG1 present is indicated on the Lot-specific Certificate of Analysis.
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