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Merck

PRON-RO

Roche

Pronasa

from Streptomyces griseus

Sinónimos:

proteasa inespecífica

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About This Item

Comisión internacional de enzimas:
UNSPSC Code:
12352204

biological source

Streptomyces griseus

Quality Level

sterility

non-sterile

form

lyophilized powder

packaging

pkg of 1 g (10165921001)
pkg of 5 g (11459643001)

manufacturer/tradename

Roche

concentration

0.5-2 mg/mL

parameter

35-40 °C optimum reaction temp.

technique(s)

DNA extraction: suitable

color

white

optimum pH

7.0-8.0

pH range

6.0-9.0

solubility

water: soluble 10-20 g/L

suitability

suitable for molecular biology

NCBI accession no.

UniProt accession no.

application(s)

life science and biopharma

foreign activity

Deoxyribonuclease <0.002 U/mg ( based on lyoph.)
Ribonuclease <0.002 U/mg ( based on lyoph.)

storage temp.

2-8°C

Gene Information

Streptomyces griseus ... SGR_RS27460(6214424)

General description

a 40°C con caseína como sustrato, pH 7,5, equivalente a aproximadamente 1270 PU/mg o aproximadamente 25 PUK/mg

Specificity

La pronasa tiene una amplia especificidad al descomponer prácticamente todas las proteínas en sus aminoácidos constituyentes; resuelve ácidos carboxílicos y alcoholes.

Application

Uso de pronasa para hidrolizar por completo las proteínas en aplicaciones experimentales. La pronasa se utiliza para la degradación de proteínas durante el aislamiento del ADN y el ARN, como en la extracción del ADN de los fagos o el aislamiento del ADN plasmídico. No es necesario permitir que la pronasa se autodigiera antes de su uso. También se utiliza en histoquímica y en cultivos celulares para disociación de los tejidos junto con la colagenasa y la tripsina, y para la producción de glucopéptidos a partir de glucoproteínas purificadas. Se ha utilizado para la descorionación de los embriones del pez cebra.

Biochem/physiol Actions

La pronasa tiene una amplia especificidad. No obstante, suele utilizarse cuando se requiere una degradación extensa o completa de las proteínas. Entre sus aplicaciones destacan el análisis de proteínas en los orgánulos celulares, la eliminación de las proteínas durante el aislamiento del ADN y el ARN, y la producción de hidrolizados de proteínas para el análisis de aminoácidos. Además, la pronasa supera a la tripsina en su capacidad para dispersar las líneas celulares de fibroblastos, destacando tanto en el desprendimiento de monocapas como en la creación de suspensiones unicelulares.

Unit Definition

Una unidad de actividad proteasa inespecífica aumenta la velocidad de liberación de aminoácidos y péptidos folin-positivos de la caseína a +40 °C y pH 7,5. Para una unidad (U) se libera 1 μmol/min de tirosina y para la unidad «PU», el valor es de 1 μg/minuto (1 U = 181 PU); para la unidad «PUK», es de 0,1/minuto (se mide el cambio en la absorbancia de azul de molibdeno, formado por reacción con el reactivo de folin en condiciones tales que 1 PUK = 50 PU).

Preparation Note

Estabilizadores: protección efectiva de los iones calcio

La preparación contiene acetato de calcio al 20% para estabilidad. Carece de almidón, como se indica en los procedimientos de control de calidad vigentes. La actividad de una disolución diluida que contenía calcio 0,01-0,1 M fue estable durante 24 horas a pH neutro entre 4 y 8 °C. La pronasa está también protegida de la inactivación por calor por bajos niveles de calcio.
Concentración de trabajo: de 0,5 a 2 mg/ml
Disolución de trabajo: Se recomienda agua destilada como disolvente.
La disolución de reserva se prepara añadiendo pronasa en polvo a agua destilada (de 10 a 20 mg/ml).
Condiciones de almacenamiento (disolución de trabajo): entre -15 y -25 °C

Reconstitution

El liofilizado es soluble en agua (de 10 a 20 mg/ml).

Storage and Stability

Conservar en seco

Other Notes

Sólo para investigación en ciencias de la vida. No indicada para procedimientos diagnósticos.

pictograms

Exclamation markHealth hazard

signalword

Danger

Hazard Classifications

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

target_organs

Respiratory system

Storage Class

11 - Combustible Solids

wgk_germany

WGK 1

flash_point_f

does not flash

flash_point_c

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