HPPIKRO
Roche
Kit de aislamiento de plásmidos High Pure
Roche, pkg of 50 purifications (11754777001), pkg of 250 purifications (11754785001)
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About This Item
Código UNSPSC:
41105500
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fabricante / nombre comercial
Roche
Nivel de calidad
envase
pkg of 250 purifications (11754785001)
pkg of 50 purifications (11754777001)
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Descripción general
Aislamiento de rendimiento bajo a medio, a miniescala de plásmidos.
El kit de aislamiento de plásmidos de gran pureza aisla el ADN plasmídico purificado en pequeñas cantidades utilizando el método de lisis alcalina, un método habitual que genera ADN plasmídico muy purificado de E. coli, sin contaminación de ARN.
El kit de aislamiento de plásmidos de gran pureza aisla el ADN plasmídico purificado en pequeñas cantidades utilizando el método de lisis alcalina, un método habitual que genera ADN plasmídico muy purificado de E. coli, sin contaminación de ARN.
Los ácidos nucleicos se unen a la superficie de la lana de fibra de vidrio en presencia de una sal caotrópica (HCl de guanidina). Esto permite al tubo de filtración High Pure inmovilizar específicamente los ácidos nucleicos (ADN y ARN) mientras carezcan de contaminantes.
Capacidad: Los tubos de filtro High Pure Spin tienen capacidad para un volumen de muestra de hasta 700 μl.
Muestra: 0,5 - 4,0 ml de cultivo de E. coli (recogido a una densidad de 1,5 - 5,0 A 600 unidades/ml)
Capacidad: Los tubos de filtro High Pure Spin tienen capacidad para un volumen de muestra de hasta 700 μl.
Muestra: 0,5 - 4,0 ml de cultivo de E. coli (recogido a una densidad de 1,5 - 5,0 A 600 unidades/ml)
Aplicación
El kit de aislamiento de plásmidos High Pure permite preparar hasta 15 μg de ADN plasmídico purificado de los cultivos bacterianos, que puede utilizarse directamente en la mayoría de las aplicaciones de biología molecular:
- PCR
- Secuenciación
- Clonación
- Transcripción in vitro
- Digestión con enzimas de restricción
- Marcaje aleatorio de cebadores
Características y beneficios
- Purifica rápidamente hasta 24 muestras de plásmidos en <30 minutos.
- Minimiza la pérdida de ADN utilizando un kit que elimina los contaminantes sin precipitación ni otras etapas de manipulación que pueden degradar el ADN.
- Mejora la fiabilidad y la reproducibilidad en las aplicaciones consecutivas con un kit que elimina el ARN y otras impurezas que hacen que el ADN plasmídico se comporte de una manera impredecible.
- Elimina el uso de compuestos orgánicos peligrosos como el cloruro de cesio, el fenol, el cloroformo y el bromuro de etidio.
Componentes
- Tampón de suspensión
- RNasa A, polvo seco
- Tampón para lisis
- Tampón de unión
- Tampón de lavado I
- Tampón de lavado II
- Tampón de elución
- Tubos de filtro High Pure Spin, que contienen lana de fibra de vidrio
- Tubos de recogida
Calidad
El plásmido pUC19 (4.5 μg) se purifica a partir de una suspensión de 1,5 ml de E. coli JM83, que se cultivó en medio LB con ampicilina durante 16 horas, a una densidad celular de 5 A 600 unidades/ml. 1 μg del ADN plasmídico purificado se incuba durante 1 hora a +37°C con 5 unidades de endonucleasa de restricción Eco RI y luego se analiza mediante electroforesis en gel de agarosa. El ADN plasmídico aislado es igual de sensible a la digestión con la endonucleasa de restricción que el ADN plasmídico aislado mediante centrifugación en gradiente de densidad de CsCl.
Nota de preparación
El kit se basa en la lisis alcalina para liberar el ADN plasmídico de las bacterias. La RNasa elimina todo el ARN del lisado. Todos los restos celulares y el ADN genómico atrapado se retiran mediante centrifugación, el sobrenadante restante se mezcla con una sal caotrópica y se aplica a la lana de fibra de vidrio en un tubo de filtración High Pure Spin. En las condiciones de amortiguación utilizadas en el procedimiento, el plásmido se une a la lana de fibra de vidrio, mientras que las sustancias contaminantes (sales, proteínas y otros contaminantes) no se unen. Breves etapas de lavado y centrifugado eliminan fácilmente esos contaminantes. Una vez purificados, los plásmidos pueden eluir fácilmente en un volumen pequeño de tampón bajo en sal o de agua.
Otras notas
Sólo para investigación en ciencias de la vida. No indicada para procedimientos diagnósticos.
Palabra de señalización
Danger
Frases de peligro
Clasificaciones de peligro
Acute Tox. 4 Inhalation - Acute Tox. 4 Oral - Eye Dam. 1 - Skin Corr. 1
Código de clase de almacenamiento
8B - Non-combustible, corrosive hazardous materials
Clase de riesgo para el agua (WGK)
WGK 1
Punto de inflamabilidad (°F)
Not applicable
Punto de inflamabilidad (°C)
Not applicable
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