17-10245
ChIPAb+ Histona H3.3 - Conjunto de cebador y anticuerpo validado para ChIP
from rabbit, purified by affinity chromatography
Sinónimos:
Histone H3.3
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About This Item
UNSPSC Code:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.32
Productos recomendados
biological source
rabbit
Quality Level
clone
polyclonal
purified by
affinity chromatography
species reactivity
mouse, human
manufacturer/tradename
ChIPAb+
Upstate®
technique(s)
ChIP: suitable
dot blot: suitable
western blot: suitable
NCBI accession no.
UniProt accession no.
shipped in
dry ice
Gene Information
human ... H3F3B(3021)
General description
Todos los anticuerpos ChIPAb+ se validan individualmente para la precipitación de cromatina, en cada lote y en todo momento. Cada conjunto de anticuerpos ChiPAb+ incluye cebadores de control (probados en cada lote mediante qPCR) para validar biológicamente los resultados de IP en un contexto específico de locus. Se proporcionan el protocolo de qPCR y las secuencias de los cebadores, lo que permite a los investigadores validar los protocolos de ChIP al utilizar nuestro anticuerpo en su contexto de cromatina. Cada conjunto incluye también un anticuerpo de control negativo para garantizar la especificidad de la reacción de ChIP.
El conjunto ChIPAb + histona H3.3 incluye el anticuerpo anti-histona H3.3, una IgG de conejo sano, y los cebadores de control que amplifican una región de 87 pb de los cebadores ChIP, la región de codificación de GAPDH D2 humana. La histona H3.3 y los controles negativos se suministran en un tamaño de reacción escalable «por ChIP» y pueden utilizarse para validar funcionalmente la precipitación de la cromatina asociada a la histona H3.3.
El conjunto ChIPAb + histona H3.3 incluye el anticuerpo anti-histona H3.3, una IgG de conejo sano, y los cebadores de control que amplifican una región de 87 pb de los cebadores ChIP, la región de codificación de GAPDH D2 humana. La histona H3.3 y los controles negativos se suministran en un tamaño de reacción escalable «por ChIP» y pueden utilizarse para validar funcionalmente la precipitación de la cromatina asociada a la histona H3.3.
Specificity
Este anticuerpo reconoce la histona H3 humana.
Se prevé una amplia reactividad cruzada entre especies debido al 100 % de homología de la secuencia.
Immunogen
Epítopo: aminoácidos 85-105
Péptido lineal conjugado con KLH que corresponde a la histona H3.3 humana.
Application
Categoría de investigación
Epigenética y función nuclear
Epigenética y función nuclear
Este conjunto de cebadores y anticuerpos ChiPAb+Histona H3.3 validados para ChIP consta del anticuerpo y los cebadores de control específicos para PCR.
Inmunoprecipitación de la cromatina:
Datos del lote representativo
La cromatina tratada con ultrasonidos preparada a partir de células HeLa (1x 10E6 células equivalentes por IP) se sometió a inmunoprecipitación utilizando 2 µl de IgG de conejo sano o 2 µg de anti-histona H3.3 y el kit Magna ChIP A (Nº de ref. 17-610). La inmunoprecipitación satisfactoria de los fragmentos de ADN asociados a la histona H3.3 se verificó mediante qPCR utilizando los cebadores de ChIP, la región de codificación D2 de GAPDH como locus positivo, y los cebadores del promotor de la beta-actina como locus negativo. (Figura 2). Los datos se presentan como porcentaje de entrada de cada muestra de IP en relación con la cromatina de entrada para cada amplicon y muestra ChIP, tal como se indica.
Consulte los detalles experimentales en el protocolo de EZ-Magna G ChIP A (Nº de ref. 17-408) o EZ-ChIP (Nº de ref. 17-371).
Análisis mediante inmunoelectrotransferencia:
Datos representativos del lote.
Se probó extracto ácido de células HeLa con anti-histona H3.3 (1 µg/ml). Las proteínas se visualizaron utilizando un anticuerpo secundario de burro anti-IgG de conejo conjugado con HRP y un sistema de detección de quimioluminiscencia.
La flecha indica la histona H3.3 (~17 kDa). (Figura 3).
Análisis mediante inmunotransferencia por puntos;
Datos de lotes representativos.
Se depositó H3.2 y H3.3 recombinantes en PVDF (1, 10, 100, 1 000 ng de histona por ranura). Detección con 0,5 µg/ml de anticuerpo anti-H3.3 en TBS-T, leche al 5 %. (Figura 4).
Imagen por cortesía de Simon Elsässer, Laboratory of David Allis, Rockefeller University, Nueva York.
Datos del lote representativo
La cromatina tratada con ultrasonidos preparada a partir de células HeLa (1x 10E6 células equivalentes por IP) se sometió a inmunoprecipitación utilizando 2 µl de IgG de conejo sano o 2 µg de anti-histona H3.3 y el kit Magna ChIP A (Nº de ref. 17-610). La inmunoprecipitación satisfactoria de los fragmentos de ADN asociados a la histona H3.3 se verificó mediante qPCR utilizando los cebadores de ChIP, la región de codificación D2 de GAPDH como locus positivo, y los cebadores del promotor de la beta-actina como locus negativo. (Figura 2). Los datos se presentan como porcentaje de entrada de cada muestra de IP en relación con la cromatina de entrada para cada amplicon y muestra ChIP, tal como se indica.
Consulte los detalles experimentales en el protocolo de EZ-Magna G ChIP A (Nº de ref. 17-408) o EZ-ChIP (Nº de ref. 17-371).
Análisis mediante inmunoelectrotransferencia:
Datos representativos del lote.
Se probó extracto ácido de células HeLa con anti-histona H3.3 (1 µg/ml). Las proteínas se visualizaron utilizando un anticuerpo secundario de burro anti-IgG de conejo conjugado con HRP y un sistema de detección de quimioluminiscencia.
La flecha indica la histona H3.3 (~17 kDa). (Figura 3).
Análisis mediante inmunotransferencia por puntos;
Datos de lotes representativos.
Se depositó H3.2 y H3.3 recombinantes en PVDF (1, 10, 100, 1 000 ng de histona por ranura). Detección con 0,5 µg/ml de anticuerpo anti-H3.3 en TBS-T, leche al 5 %. (Figura 4).
Imagen por cortesía de Simon Elsässer, Laboratory of David Allis, Rockefeller University, Nueva York.
Subcategoría investigación
Histonas
Histonas
Packaging
25 ensayos por juego. Uso recomendado: ~2 μl de anticuerpo por inmunoprecipitación de la cromatina (dependiente del contexto biológico).
Quality
Inmunoprecipitación de la cromatina:
Datos del lote representativo.
La cromatina tratada con ultrasonidos preparada a partir de células HeLa (1x 10E6 células equivalentes por IP) se sometió a inmunoprecipitación utilizando 2 µl de IgG de conejo sano o 2 µg de anti-histona H3.3 y el kit Magna ChIP® A (Nº de ref. 17-610). La inmunoprecipitación satisfactoria de los fragmentos de ADN asociados a la histona H3.3 se verificó mediante qPCR utilizando los cebadores de ChIP y la región de codificación D2 de GAPDH (Figura 1).
Consulte los detalles experimentales en el protocolo EZ-Magna ChIP A (Nº ref. 17-408) o EZ-CHIP (Nº ref. 17-371).
Datos del lote representativo.
La cromatina tratada con ultrasonidos preparada a partir de células HeLa (1x 10E6 células equivalentes por IP) se sometió a inmunoprecipitación utilizando 2 µl de IgG de conejo sano o 2 µg de anti-histona H3.3 y el kit Magna ChIP® A (Nº de ref. 17-610). La inmunoprecipitación satisfactoria de los fragmentos de ADN asociados a la histona H3.3 se verificó mediante qPCR utilizando los cebadores de ChIP y la región de codificación D2 de GAPDH (Figura 1).
Consulte los detalles experimentales en el protocolo EZ-Magna ChIP A (Nº ref. 17-408) o EZ-CHIP (Nº ref. 17-371).
Target description
~17 kDa observados
Physical form
Anti-histona H3.3 (policlonal de conejo). Un vial que contiene 50 µg de anticuerpo policlonal de conejo purificado en tampón compuesto por Tris-glicina 0,1 M (pH 7,4), NaCl 150 mM con azida sódica al 0,05 % antes de añadir glicerol al 30 %. Conservar a -20° C.
Concentración: 0,7 mg/ml
IgG de conejo sano. Un vial que contiene 125 µg de IgG de conejo en 125 µl de tampón de conservación que contiene azida sódica al 0,05%. Conservar a -20°C.
Cebadores de control, región de codificación de la GAPDH D2 humana. Un vial que contiene 75 μl de 5 μM de cada cebador específico para la región de codificación de la GAPDH humana. Conservar a -20°C.
DIR: GCC ATG TAG ACC CCT TGA AGA G
INV: ACT GGT TGA GCA CAG GGT ACT TTA T
Concentración: 0,7 mg/ml
IgG de conejo sano. Un vial que contiene 125 µg de IgG de conejo en 125 µl de tampón de conservación que contiene azida sódica al 0,05%. Conservar a -20°C.
Cebadores de control, región de codificación de la GAPDH D2 humana. Un vial que contiene 75 μl de 5 μM de cada cebador específico para la región de codificación de la GAPDH humana. Conservar a -20°C.
DIR: GCC ATG TAG ACC CCT TGA AGA G
INV: ACT GGT TGA GCA CAG GGT ACT TTA T
Purificado por afinidad
Storage and Stability
Estable durante 1 año a 2-8°C desde la fecha de recepción. Recomendaciones de manipulación: Tras la primera descongelación, y antes de quitar la tapa, centrifugue el vial y mezcle suavemente la disolución. Distribúyalo en alícuotas en tubos de microcentrífuga y guárdelo a -20°C. Evite ciclos repetidos de congelación y descongelación que pueden dañar la IgG y afectar al rendimiento del producto.
Nota: la variabilidad en las temperaturas del congelador por debajo de -20°C puede hacer que las disoluciones que contienen glicerol se congelen durante el almacenamiento.
Nota: la variabilidad en las temperaturas del congelador por debajo de -20°C puede hacer que las disoluciones que contienen glicerol se congelen durante el almacenamiento.
Analysis Note
Control
Incluye IgG de conejo sano y cebadores específicos para la región de codificación de la GAPDH humana.
Incluye IgG de conejo sano y cebadores específicos para la región de codificación de la GAPDH humana.
Other Notes
Concentración: Para conocer la concentración específica del lote, consulte el certificado de análisis.
Legal Information
MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Disclaimer
Salvo que se indique lo contrario en nuestro catálogo o en otra documentación de la empresa que acompañe al producto, nuestros productos están indicados sólo para investigación y no deben utilizarse para ningún otro propósito, como, entre otros, usos comerciales no autorizados, diagnóstico in vitro, usos terapéuticos ex vivo o in vivo o cualquier tipo de consumo o aplicación en humanos o animales.
Storage Class
12 - Non Combustible Liquids
flash_point_f
Not applicable
flash_point_c
Not applicable
Certificados de análisis (COA)
Busque Certificados de análisis (COA) introduciendo el número de lote del producto. Los números de lote se encuentran en la etiqueta del producto después de las palabras «Lot» o «Batch»
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