图 1.侧向层析试纸条设计
侧向层析检测试纸条彻底颠覆了诊断领域，可为各种分析物提供快速便捷的测试。这些试纸条原为检测人绒毛膜促性腺激素(hCG)而开发，现已广泛应用于排卵监测、传染病检测、药物分析等领域。新冠肺炎疫情进一步推动了快速抗原检测的普及，从而催生了基于侧向层析技术的居家检测产品的出现。我们的目标是为开发免疫层析测试试纸条所涉及的设计、材料、试剂和制造工艺提供更多见解。通过了解其原理，您就能简化测试开发流程，确保可靠性和一致性。
为什么侧向层析检测使用硝酸纤维素膜？
硝酸纤维素膜因其独特的性能而常用于侧向层析检测。它可作为固体支撑物，固定检测中的各种成分，并在合理的时间内实现毛细流动。以下是首选硝酸纤维素膜的一些原因：
- 毛细作用：侧向层析硝酸纤维素膜表现出优异的毛细作用，使样品无需外部泵或动力源即可流过试纸条。
- 结合能力：硝化纤维素具有高蛋白质结合能力，适合吸附分析物或抗体。这种特性使得特异性分子能够固定在膜上的不同区域以形成测试线和控制线。
- 毛细流速: 侧向层析硝酸纤维素膜可提供不同的流速，可根据灵敏度、特异性和结果获得时间要求来设计试纸条。
- 相容性：硝酸纤维素与各种测定试剂、缓冲液和检测方法相容。
- 膜的芯吸: 膜的芯吸特性有助于流体流过检测区域，促进信号的产生并降低背景噪音。
总体而言，在侧向层析测定中使用硝酸纤维素膜为多种快速诊断测试的应用提供了性能可靠且高性价比的平台。
Hi-Flow™ Plus 膜的建议储存条件是什么？
Hi-Flow™ Plus 膜由硝酸纤维素制成，应在特定条件下保存以保持其功能性。必须避免其暴露于有机溶剂蒸汽中，否则会导致膜疏水。它们应该密封在铝箔袋中，防止污垢和灰尘进入。长期储存时，建议储存温度为10至25°C ，相对湿度保持在30至70%，避免冷凝环境和阳光直射。由于硝酸纤维素高度易燃，因此储存区域必须采取防火措施。请注意，长期储存条件与生产制造时所需的精确控制条件不同，通过膜稳定性曲线可能无法预测成品试纸条的整体稳定性。
开发快速侧向层析检测需要哪些基本仪器？
基本仪器包括精确分配系统和精确切割系统，前者用于将捕获试剂喷洒到膜上，而后者则将大试纸条分割成单个试纸条。这些流程不能手动完成，因为手动操作无法保证试纸条的一致性和重现性。
侧向层析试纸条采用什么捕获试剂？
捕获试剂是侧向层析试纸条的重要组成部分，可实现目标分子的检测。通过结合到硝酸纤维素表面，它们充当在测试线和控制线形成多分子复合物的起始分子，指示目标分子是否存在。抗体具有高亲和力和特异性，通常被用作捕获试剂。许多侧向层析检测是基于免疫测定的形式，根据目标分子的类型和大小选用不同构型的抗体。
在夹心法分析中，目标分子在与膜结合的捕获抗体和与检测粒子偶联的第二捕获抗体之间起桥梁作用。竞争和抑制测定利用单一捕获抗体和目标分子，通常与载体分子偶联。在竞争测定中，样品中的游离目标分子与检测粒子偶联的目标分子竞争，从而结合在捕获抗体上。
在抑制测定中，样品中的目标分子和与检测粒子偶联的抗体相结合，从而抑制它们与固定在膜上的目标分子结合的能力。在血清分析中，当目标分子是抗体时，捕获分子可以是受测抗体的特异性抗原。最近，人们开始探索核酸检测，利用 PCR 反应中的标记引物作为捕获试剂的识别位点。引物标签和相应捕获试剂的选择取决于所需的灵敏度、稳定性、纯度和可用性。
筛选策略是如何优化快速侧向层析检测开发的？
为优化快速侧向层析检测开发，筛选策略发挥着关键作用。以下是一些需要考虑的关键方面:
- 正交法：应采用一种正交方法来评估用于检测目标分子的所有可能的抗体或捕获试剂组合。这种系统性评估有助于确定最合适的配对，这些配对进一步优化的潜力高。
- 测试配对：即使供应商将抗体标记为“配对”，也必须测试它们在侧向层析试纸条形式中是否匹配。该测试可确定哪种抗体最适合应用于膜上，哪种抗体最适合与检测粒子结合。以 ELISA 形式识别的抗原抗体对不一定在侧向层析试纸条中发挥理想作用。
- “半试纸条”测定：“半试纸条”测定是一种用于初步筛选的简化方法。使用96孔板，将仅由膜和吸收垫组成的条带放置在含有检测粒子、目标分子和样品缓冲液的孔中。允许液体沿“半试纸条”向上流动，直到完全吸收，然后将“半试纸条”转移到第二个仅含样品缓冲液的孔中。该过程通过将多余的检测粒子冲洗到吸收垫中来帮助最小化背景。
- 优化机会：“半试纸条”测定提供了优化侧向层析检测的各个组分的机会。这些包括捕获抗体缓冲液条件、膜干燥参数、膜封闭方法、检测粒子性质(例如用量、偶联过程、抗体负载、阻断剂)和样品缓冲液组成。
通过采用这些筛选策略并优化各检测组分，开发人员可以提高快速侧向层析检测的性能、可靠性、稳定性和保质期。
侧向层析检测有哪些不同的制造策略？
侧向层析检测制造可以通过手动、自动化或两者的组合来完成。手动过程涉及批量处理，而自动化则允许连续处理。策略的选择取决于产量和可用资源等因素。手动和自动方法都可以生产高质量的产品。批量处理设备不贵，而全自动系统则劳动力成本更低。在规划过程中匹配材料和试剂的用量可以减少浪费。
所选的制造工艺如何影响侧向层析检测中使用的材料尺寸？
制造工艺的选择会影响材料的尺寸。批处理通常使用具有明确长度和宽度要求以及公差较小的条或片状膜。也可以使用卷状膜，但是通常需要在制造过程中切割成条。条状膜应该平整，不能太硬。有些塑料背衬可能太厚，不适合使用。卷对卷工艺需要成卷的材料。还需要考虑边缘对齐、边缘质量、伸缩和包装要求。
关于侧向层析检测中所用材料的物理结构，制造时需要考虑哪些因素？
制造工艺和设备可能会影响侧向层析检测中所用材料的物理结构。必须谨慎确保材料在制造过程中不被损坏，或者处理方式不会导致其性能无法预测。注重细节至关重要，需要深入了解试纸条机制，以实现手动装配操作的一致性。加强生产和质量控制人员的持续培训以及在线检验，有助于最大限度地减少浪费并提高产量。无背衬膜卷的抗拉强度较低，在处理过程中容易破裂。因此建议在连续加工过程中使用带背衬的膜。
在快速侧向层析检测中，有哪些制造策略可以优化捕获试剂缓冲液？
在快速侧向层析检测中，优化捕获试剂缓冲液的制造策略包括调整捕获试剂的浓度、向缓冲液中添加稳定剂以及使用不同的缓冲液系统。这些策略有助于提高测试的稳定性和保质期。重点要考虑捕获试剂溶液在膜上干燥的情况。 如果水的蒸发导致化学环境干扰硝酸纤维素的吸附或使捕获试剂改变性质，则适合全水性分析的缓冲制剂可能不适用于侧向层析试纸条。
膜的选择和规格如何影响快速侧向层析检测的灵敏度？
膜的选择和规格会显著影响快速侧向层析检测的灵敏度。膜的厚度、背衬和流速都会影响样品的流动及和捕获试剂的结合，从而导致灵敏度的变化。
膜的速度和灵敏度之间存在直接相关性。了解这些要求有助于按照应用选择适合的膜。
Hi-Flow™ Plus膜的速度 |
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在开发侧向层析检测时，产品定义的目的是什么？
产品定义对开发侧向层析检测至关重要，它可确定基本的产品质量要求，并确保资源不会虚耗在不可行或不切实际的设计上。
设计免疫层析试纸条的关键点是什么？
设计免疫层析测试试纸条的关键点包括选择合适的材料、试剂的整合以及制造过程的优化，以确保性能一致性和准确性。
单一材料、试剂或加工过程中未表征的变量如何影响侧向层析检测性能的一致性？
单一材料、试剂或加工过程中未表征的变量会导致侧向层析检测的性能不一致，从而可能出现假阴性或假阳性结果。必须谨慎控制和表征试纸制造中使用的所有材料、试剂和工艺，以确保性能一致性。
重现性对于诊断试纸条开发有多重要？
重现性对诊断试纸条的开发至关重要，性能必须保持一致，才可能获得商业成功。 在产品开发之初，高水平的重现性就应成为设计目标。
我可以在线购买 Hi-Flow™ Plus 膜吗？
可以，生产级 Hi-Flow™ Plus 膜现可在线购买，有 20 mm 宽和 25 mm 宽两种便捷包装形式可选。
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