T9935

Tripsina from bovine pancreas

essentially salt-free, lyophilized powder, ≥9,000 BAEE units/mg protein, BioReagent, suitable for cell culture

• Sinónimos: Serine Protease 1
• Número de CAS: 9002-07-7
• Comisión internacional de enzimas: 3.4.21.4 (BRENDA, IUBMB)
• Número CE: 232-650-8
• Número MDL: MFCD00082094
• Código UNSPSC: 12352204
• NACRES: NA.54

Propiedades

• Línea del producto: BioReagent
• Nivel de calidad: 200
• Formulario: essentially salt-free, lyophilized powder
• actividad específica: ≥9,000 BAEE units/mg protein
• mol peso: 23.8 kDa
• composición: protein, ≥80%
• técnicas: cell culture | mammalian: suitable
• solubilidad: hydrochloric acid: soluble 1 mM
• temp. de almacenamiento: −20°C

Descripción

Aplicación

Para la digestión de los péptidos con tripsina, utilice una proporción de aproximadamente 1:100 a 1:20 de tripsina:péptido. La utilización habitual de este producto es la separación de las células adherentes de una superficie de cultivo. La concentración necesaria de tripsina para separar las células de su sustrato depende fundamentalmente del tipo de célula y de la edad del cultivo. También se han utilizado tripsinas para la re-suspensión de células durante el cultivo celular, en investigación en proteómica para la digestión de proteínas y en varias digestiones en gel. Otras aplicaciones son la evaluación de la cristalización mediante técnicas de membrana y en un estudio para determinar que las tasas de plegado y los rendimientos de las proteínas pueden limitarse por la presencia de trampas cinéticas.

Trypsin from bovine pancreas has been used for enzymatic digestion of nucleus pulposus (NP) cells during human NP cells isolation. It has also been used as a immunopanning reagent for purification of cells.

Acciones bioquímicas o fisiológicas

La tripsina rompe los péptidos por el lado C-terminal de los restos de lisina y de arginina. La velocidad de hidrólisis de esta reacción se reduce si a cada lado del punto de rotura hay un residuo ácido, y la hidrólisis se interrumpe si en el lado carboxilo del sitio de ruptura hay un resto de prolina. El pH óptimo de actividad de la tripsina es 7-9. La tripsina también puede actuar rompiendo las uniones éster y amida de los derivados sintéticos de aminoácidos. Se añade EDTA a las disoluciones de tripsina como agente quelante que neutraliza los iones de calcio y de magnesio, los cuales ocultan los enlaces peptídicos sobre los que actúa la tripsina. La eliminación de esos iones aumenta la actividad enzimática.

Los inhibidores de las proteasas de serina, como DFP, TLCK, APMSF, AEBSEF y la aprotinina, entre otros, inhibirán la tripsina.

Componentes

Trypsin consists of a single chain polypeptide of 223 amino acid residues, produced by the removal of the N-terminal hexapeptide from trypsinogen which is cleaved at the Lys - lle peptide bond. The sequence of amino acids is cross-linked by 6 disulfide bridges. This is the native form of trypsin, beta-trypsin. BETA-trypsin can be autolyzed, cleaving at the Lys - Ser residue, to produce alpha-trypsin. Trypsin is a member of the serine protease family.

Precaución

Solutions in 1 mM HCl are stable for 1 year in aliquots and stored at -20°C. The presence of Ca²⁺ will also diminish the self-autolysis of trypsin and maintain its stability in solution. Trypsin will also retain most of its activity in 2.0 M urea, 2.0 M guanidine HCl, or 0.1% (w/v) SDS.

Definición de unidad

Una unidad BAEE producirá un A₂₅₃ de 0,001 por minuto a pH 7,6 y 25°C utilizando BAEE como sustrato.

Nota de preparación

This product is from pancreas sourced from New Zealand. It is soluble in 1 mM HCl at 1 mg/mL.
For applications that involve EDTA, solubilizing trypsin should be done with a buffered salt solution containing no Ca²⁺ or Mg²⁺.

Información de seguridad

• Pictogramas: GHS08,GHS07
• Palabra de señalización: Danger
• Frases de peligro: H315,H319,H334,H335
• Consejos de prudencia: P261 - P264 - P271 - P280 - P302 + P352 - P305 + P351 + P338
• Clasificaciones de peligro: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• Órganos de actuación: Respiratory system
• Código de clase de almacenamiento: 11 - Combustible Solids
• Clase de riesgo para el agua (WGK): WGK 1
• Equipo de protección personal: dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves