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Clostridium histolyticum
sterility
non-sterile
form
lyophilized
specific activity
>0.15 U/mg lyophilizate (Collagenase activity)
packaging
pkg of 100 mg (10103578001), pkg of 2.5 g (11088793001), pkg of 500 mg (10103586001)
manufacturer/tradename
Roche
concentration
1 mg/mL (0.1%, w/v)
color
brown
optimum pH
6.0-8.0
solubility
water: soluble
suitability
suitable for PCR
NCBI accession no.
UniProt accession no.
application(s)
cell analysis
life science and biopharma
sample preparation
foreign activity
Clostripain 9.489 U/mg, Proteases 6.067 U/mg (Azocoll ), Trypsin 0.144 U/mg (with BAEE)
storage temp.
2-8°C
Gene Information
Clostridium histolyticum ... COLA_1(1668506084)
General description
La colagenasa es una proteasa que rompe la triple hélice proteica denominada colágeno. Clostridium histolyticum produce seis tipos de colagenasas: α, β, γ, δ, ε y λ. Estas colagenasas son activas frente al tejido conjuntivo y muestran más reactividad hacia la gelatina que hacia el colágeno. La colagenasa obtenida de Clostridium histolyticum tiene una actividad muy fuerte, ya que digiere el colágeno desde ambos extremos, a temperaturas de tan sólo 4-10 °C.
Application
La colagenasa de C. histolyticum es muy utilizada para:
- Desagregación de muchos tipos de tejidos (por ejemplo, pulmón, corazón, músculo, hueso, tejido adiposo, hígado, riñón, cartílago, glándula mamaria, placenta, vasos sanguíneos, cerebro, tumores)
- preparación de suspensiones monocelulares para el establecimiento de sistemas de cultivo celular primario. La colagenasa A se recomienda cuando el rendimiento, la viabilidad y la funcionalidad son importantes.Preparación de células de muchos tipos de tejido, como hepatocitos, adipocitos, islotes pancreáticos, células epiteliales, células musculares, células endoteliales, etc.. Sin embargo, debe determinarse empíricamente la idoneidad de cada lote de la enzima para la ruptura de un tejido concreto.
Biochem/physiol Actions
La colagenasa degrada el colágeno nativo. La clostripaína, las enzimas tripsinoides y las proteasas neutras degradan también otras proteínas.
Actividad enzimática:
Actividad de la colagenasa: >0,15 U/mg (según Wünsch) (+25°C, 4-fenilazobenciloxicarbonil-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg como sustrato)
Actividades enzimáticas contaminantes: tripsina, clostripaína y actividad proteolítica total
La colagenasa A tiene una proporción equilibrada de actividades enzimáticas.
Actividad enzimática:
Actividad de la colagenasa: >0,15 U/mg (según Wünsch) (+25°C, 4-fenilazobenciloxicarbonil-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg como sustrato)
Actividades enzimáticas contaminantes: tripsina, clostripaína y actividad proteolítica total
La colagenasa A tiene una proporción equilibrada de actividades enzimáticas.
Preparation Note
Activador: Ca2+
Inhibidores:
Inhibidores de la colagenasa: EDTA, EGTA, Cys, His, DTT, 2-mercaptoetanol
La colagenasa no es inhibida por el suero.
Inhibidores de la clostripaína: TLCK
Inhibidores de la tripsina: aprotinina, inhibidor de tripsina (clara de huevo, soja)
Concentración de trabajo: de 0,5 a 2,5 mg/ml
Condiciones de almacenamiento (disolución de trabajo): entre -15 y -25 °C
Roche recomienda reconstituir sólo la cantidad de liofilizado necesario para uso inmediato. La disolución reconstituida puede conservarse entre -15 y -25 °C durante un máximo de una semana. Evite la congelación y descongelación repetidas ya que la actividad disminuye después de la reconstitución.
Inhibidores:
Inhibidores de la colagenasa: EDTA, EGTA, Cys, His, DTT, 2-mercaptoetanol
La colagenasa no es inhibida por el suero.
Inhibidores de la clostripaína: TLCK
Inhibidores de la tripsina: aprotinina, inhibidor de tripsina (clara de huevo, soja)
Concentración de trabajo: de 0,5 a 2,5 mg/ml
Condiciones de almacenamiento (disolución de trabajo): entre -15 y -25 °C
Roche recomienda reconstituir sólo la cantidad de liofilizado necesario para uso inmediato. La disolución reconstituida puede conservarse entre -15 y -25 °C durante un máximo de una semana. Evite la congelación y descongelación repetidas ya que la actividad disminuye después de la reconstitución.
Mantenga el recipiente herméticamente cerrado y en un lugar seco y bien ventilado.
Reconstitución en cualquier disolución salina equilibrada (por ejemplo, HBSS)
Other Notes
Contenido
Liofilizada, no estéril
Liofilizada, no estéril
Definición de unidad: La colagenasa de Roche se valora en unidades Wunsch (1 μmol de producto formado por minuto a +25 °C con sustrato Wunsch)
A menudo, las actividades colagenasa se dan en unidades Mandl (1 μmol de leucina liberada del colágeno en 5 horas a +37 °C).
Por desgracia, no hay un factor de conversión uniforme entre las dos unidades de actividad, ya que la unidad Mandl depende en parte de la concentración de las proteasas contaminantes en la preparación de la colagenasa, una variable indefinible. Una preparación de colagenasa más pura daría de hecho una menor actividad específica en unidades Mandl que una preparación bruta. Las preparaciones de Clostridium dan normalmente factores de conversión de aproximadamente 1:1800 (por ejemplo, un lote concreto de colagenasa de Clostridium contenía aproximadamente 0,15 U Wünsch/mg y 250 U Mandl/mg).
A menudo, las actividades colagenasa se dan en unidades Mandl (1 μmol de leucina liberada del colágeno en 5 horas a +37 °C).
Por desgracia, no hay un factor de conversión uniforme entre las dos unidades de actividad, ya que la unidad Mandl depende en parte de la concentración de las proteasas contaminantes en la preparación de la colagenasa, una variable indefinible. Una preparación de colagenasa más pura daría de hecho una menor actividad específica en unidades Mandl que una preparación bruta. Las preparaciones de Clostridium dan normalmente factores de conversión de aproximadamente 1:1800 (por ejemplo, un lote concreto de colagenasa de Clostridium contenía aproximadamente 0,15 U Wünsch/mg y 250 U Mandl/mg).
Sólo para investigación en ciencias de la vida. No indicada para procedimientos diagnósticos.
Disclaimer
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Danger
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Hazard Classifications
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
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Respiratory system
Clase de almacenamiento
11 - Combustible Solids
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WGK 1
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flash_point_c
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