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Sistema de PCR GC- RICH

sufficient for ≤50 reactions, pkg of 100 U, optimum reaction temp. 72 °C

• Sinónimos: Sistema de PCR GC- RICH, Ricos en GC | PCR
• Código UNSPSC: 41106300

Propiedades

• uso: sufficient for ≤50 reactions
• Nivel de calidad: 100
• envase: pkg of 100 U
• fabricante / nombre comercial: Roche
• Parámetros: 72 °C optimum reaction temp.
• técnicas: PCR: suitable
• temp. de almacenamiento: −20°C

Descripción

Descripción general

El sistema para PCR GC-RICH está compuesto por una mezcla enzimática que contiene una ADN polimerasa Taq termoestable y una ADN polimerasa Tgo, una enzima termoestable con actividad de verificación y corrección (exonucleasa 3′-5′). Esta mezcla de polimerasas por sí misma supera a la ADN polimerasa Taq con respecto a los rendimientos, la fidelidad y la especificidad, además de la posibilidad de amplificar fragmentos de una longitud de hasta 5 kb. La disolución tampón para la reacción PCR GC-RICH, en combinación con la disolución de resolución GC-RICH incluida por separado, permiten amplificar con mucha eficacia muestras difíciles, como las ricas en GC.. Se recomienda clonación de TA. La mezcla enzimática produce más fragmentos con extremos romos que la ADN polimerasa Taq. La mayoría de los productos tiene una A protuberante. Utiliza 2 U para 50 μl de PCR estándar.

Contenido

• Mezcla de enzimas GC-RICH, en disolución tampón de conservación
• Tampón de reacción GC- RICH, concentrado x5, con MgCl2 y DMSO 7,5 mM
• Disolución de resolución GC-RICH, 5 M
• Disolución de reserva MgCl2, 25 mM
• Agua, calidad para PCR

Aplicación

El sistema para PCR GC- RICH, una mezcla de ADN polimerasa Taq y una polimerasa con actividad de de errores, permite la amplificación de plantillas que son difíciles o imposibles de amplificar con otras polimerasas y otras mezclas de polimerasas. La mayor procesividad de la mezcla y la exclusiva disolución de resolución GC-RICH se combinan para ofrecer un rendimiento excelente, en especial de las muestras problemáticas.
El sistema de PCR GC-RICH puede utilizarse también en aplicaciones de la PCR convencionales, proporcionando resultados mejores (mayor rendimiento, mayor precisión) que la ADN polimerasa Taq sola.

Ventajas del sistema de PCR GC-RICH:

• Fácil acceso a plantillas difíciles, entre ellas las ricas en GC y las secuencias repetitivas.
• Se suministran los reactivos, la disolución de resolución GC-RICH y el agua de calidad para PCR.
• Amplificación de fragmentos de ADN de hasta 5 kb.

El sistema para PCR GC-RICH se ha utilizado en análisis semicuantitativos, en genotipado y en recuperación y clonación de secuencias de genes candidatos con elevado contenido de GC.

Características y beneficios

El sistema para PCR GC- RICH es una mezcla de ADN polimerasa Taq y una polimerasa con actividad de verificación y corrección de la transcripción para la amplificación de fragmentos de ácido nucleico más largos. La disolución GC-Rich proporciona una solución que permite la amplificación de todo tipo de productos de PCR difíciles.
Cuando se utiliza el tampón suministrado, que contiene magnesio, la concentración final del MgCl2 es 1,5 mM.

La mezcla de la ADN polimerasa Taq y una polimerasa de corrección de errores amplifica las plantillas difíciles. La mayor procesividad y la exclusiva disolución de resolución GC-RICH ofrecen un rendimiento superior.

• PCR
• Muestras difíciles de hasta 5 kb

Utilice el sistema para PCR GC-RICH, dNTPack con una mezcla de nucleótidos para PCR lista para usar.

Envase

1 kit que contiene 5 componentes

Calidad

La función del sistema para PCR GC-RICH PCR se prueba amplificando un fragmento genómico de la ApoE humana de 284 pb utilizando los protocolos del sistema para PCR GC-RICH

Definición de unidad

Volumen de actividad: 2 U/μ

Nota de preparación

Concentración de trabajo: Concentración enzimática
La concentración óptima de la enzima oscila entre 0,5 y 5 U por ensayo. Para una PCR convencional de 50 μ, recomendamos utilizar 2 U de la mezcla enzimática.

Otras notas

Sólo para investigación en ciencias de la vida. No indicada para procedimientos diagnósticos.

Información legal

El uso de este producto está cubierto por la patente estadounidense 6,127,155 y las reivindicaciones de patente correspondientes fuera de los EE.UU.  La adquisición de este producto incluye una inmunidad limitada intransferible contra pleitos según las reivindicaciones de patentes anteriores para utilizar sólo esta cantidad de producto para la propia investigación interna del comprador.  No se transfiere expresamente, por implicación ni por estoppel derecho alguno sobre ninguna otra reivindicación de patente ni derecho alguno de realizar servicios comerciales de ningún tipo, entre otros, informar de los resultados de las actividades del comprador por un precio u otra consideración comercial.  Este producto está indicado solo para investigación. El uso para diagnóstico humano y veterinario bajo patente de Roche requiere una autorización aparte de Roche.  Todos los demás usos distintos de la investigación interna y los usos para diagnóstico humano y veterinario bajo las reivindicaciones de la patente de Roche requieren una autorización aparte de Thermo Fisher Scientific. Puede obtenerse más información sobre las autorizaciones de compra de Roche poniéndose en contacto con el Licensing Department of Roche Molecular Systems, Inc., 4300 Hacienda Drive, Pleasanton, California 94588, EE.UU. o Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, 68305 Mannheim, Alemania.  Puede obtenerse más información sobre las autorizaciones de compra de Thermo Fisher Scientific poniéndose en contacto con Licensing Department of  Thermo Fisher Scientific, 5791 Van Allen Way, Carlsbad, California 92008, EE.UU.

Solo componentes del kit

• GC-RICH Enzyme Mix, in storage buffer
• GC-RICH PCR Reaction Buffer, with 7.5 mM MgCl₂ and DMSO 5x concentrated
• GC-RICH Resolution Solution 5 M
• MgCl₂ Stock Solution 25 mM
• Water, PCR Grade

Información de seguridad

• Frases de peligro: H412
• Consejos de prudencia: P273 - P501
• Clasificaciones de peligro: Aquatic Chronic 3
• Código de clase de almacenamiento: 12 - Non Combustible Liquids
• Clase de riesgo para el agua (WGK): WGK 2
• Punto de inflamabilidad (°F): does not flash
• Punto de inflamabilidad (°C): does not flash