ABE1451

Anti-fosfo BRD4 (Ser492)

from rabbit

• Sinónimos: Bromodomain-containing protein 4, MCAP, Mitotic chromosome-associated protein, Protein HUNK1
• Código UNSPSC: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Propiedades

• origen biológico: rabbit
• Nivel de calidad: 100
• forma del anticuerpo: affinity isolated antibody
• tipo de anticuerpo: primary antibodies
• clon: polyclonal
• reactividad de especies: mouse, human
• reactividad de especies (predicha por homología): rat (based on 100% sequence homology)
• técnicas: dot blot: suitable; immunocytochemistry: suitable; western blot: suitable
• Nº de acceso NCBI: NP_490597
• Nº de acceso UniProt: O60885
• Condiciones de envío: wet ice
• modificación del objetivo postraduccional: phosphorylation (pSer492)
• Información sobre el gen: human ... BRD4(23476)

Descripción

Descripción general

La proteína 4 que contiene bromodominios (UniProt O60885; también conocida como MCAP, proteína asociada a cromosomas mitóticos, proteína HUNK1) está codificada por el gen BRD4 (también conocido como HUNK1, MCAP) (ID del gen 23476) en humanos. La BRD4 es un miembro de la familia de proteínas BET (bromodominio y extra-terminal) que actúa como lector de la cromatina mediante unión a las lisinas acetiladas de las histonas. La BRD4 es un importante regulador de la transcripción en muchos tipos de células, incluida la transcripción en respuesta a señales externas. La BRD4 desempeña un papel esencial en la función neuronal e interviene en la regulación transcripcional subyacente al aprendizaje y la memoria. La BRD4 regula la transcripción de los genes de expresión inmediata temprana (IEG) en las neuronas mediante fosforilación por la caseína cinasa 2 (CK2), que se activa en respuesta a la estimulación neuronal. La inactivación de Brd4 en ratones es letal, pero se ha comunicado que el bloqueo de la función de Brd4 mediante tratamiento con el inhibidor JQ1 (Nº de ref. 500586) afecta a la transcripción de proteínas sinápticas cruciales, lo que produce falta de memoria y disminución de la susceptibilidad a las convulsiones en ratones.

Especificidad

El residuo de fosfo-serina diana está presente en todas las isoformas humanas (pSer492) y murinas (pSer493) empalmadas de la BRD4 comunicadas por UniProt (O60885 y Q9ESU6). Se demuestra que este anticuerpo policlonal exhibe una inmunorreactividad más fuerte hacia el fosfopéptido BRD4 con fosforilación pSer492/494 doble (equivalente a pSer493/495 de ratón) que el péptido correspondiente con fosforilación sólo pSer492 (equivalente a Ser493 de ratón) (Korb, E., et al (2015). Nat. Neurosci. 18(10):1464-1473).

Inmunógeno

Péptido lineal conjugado con KLH correspondiente a una secuencia de la BRD4 humana que contiene la Ser492 fosforilada (equivalente a la Ser493 de ratón).

Aplicación

Análisis mediante inmunocitoquímica: una dilución 1:500 de un lote representativo detectó inmunorreactividad a la pSer493 (equivalente a la Ser492 humana) de la Brd4 nuclear en neuronas corticales embrionarias de ratón E16.5 cultivadas durante 12 días (Cortesía de Erica Korb, Ph.D. Rockefeller University, New York, U.S.A.).University, New York, U.S.A.).

Análisis mediante inmunoelectrotransferencia: una dilución 1:500 de un lote representativo detectó la fosforilación de la Ser493 (equivalente a la Ser492 humana) de la Brd4 en lisado de neuronas corticales embrionarias de ratón E16.5 cultivadas durante 12 días. El tratamiento previo con fosfatasa del lisado abolió la detección de la banda diana (Cortesía de Erica Korb, Ph.D. Rockefeller University, New York, U.S.A.).

Análisis mediante inmunotransferencia por puntos: un lote representativo detectó el fosfopéptido BRD4 con fosforilación pSer492 o fosforilación doble pSer492/494 (equivalente a Ser493/495 de ratón), pero no el péptido no fosforilado correspondiente ni el péptido sólo con fosforilación pSer494 (Korb, E., et al (2015). Nat. Neurosci. 18(10):1464-1473).
Análisis mediante inmunoelectrotransferencia: un lote representativo detectó inducción de la fosforilación de la Ser493 (equivalente a la Ser492 humana) de la Brd4 tras la estimulación con BDNF de neuronas corticales embrionarias E16.5 cultivadas de ratones C57BL/6. El pretratamiento de las neuronas con el inhibidor de la proteína cinasa CK2, 4,5,6,7-tetrabromobenzotriazol (TBB; nº de ref. 218697), antes de la estimulación con BDNF o el tratamiento con fosfatasa del lisado antes de la inmunotransferencia abolió la detección de la banda diana (Korb, E., et al (2015). Nat. Neurosci. 18(10):1464-1473).

Categoría de investigación
Epigenética y función nuclear

Detección de la fosforilación de la serina 492 de la BRD4 con este anticuerpo policlonal de conejo anti-fosfoBRD4 (Ser492), Nº ref. ABE1451, validado para utilizar en inmunocitoquímica, inmunotransferencia por puntos (dot blot) e inmunotransferencia Western.

Calidad

Evaluada mediante inmunotransferencia Western en lisado de iPSC humanas.

Análisis mediante inmunoelectrotransferencia: una dilución 1:1000 de este anticuerpo detectó fosforilación de la Ser492 de la Brd4 en 10 µg de lisado de células madre pluripotentes inducidas humanas (iPSC).

Descripción de destino

~ 140/200 kDa observados. 152,2/155,9 kDa (isoforma larga humana/ratón), 80,46/80,61 kDa (isoforma corta humana/ratón), 88,29 kDa (isoforma humana B) calculados. Pueden observarse bandas no caracterizadas en algunos lisados.

Forma física

Anticuerpo policlonal de conejo purificado en tampón que contiene Tris-glicina 0,1 M, pH 7,4, NaCl 150 mM con acida sódica al 0,05 %.

Presentación: Purificada

Purificada por afinidad

Almacenamiento y estabilidad

Estable durante 1 año a 2-8°C desde la fecha de recepción.

Otras notas

Concentración: Consulte la ficha técnica específica del lote.

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Información de seguridad

• Código de clase de almacenamiento: 12 - Non Combustible Liquids
• Clase de riesgo para el agua (WGK): WGK 1
• Punto de inflamabilidad (°F): Not applicable
• Punto de inflamabilidad (°C): Not applicable