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G2133

Sigma-Aldrich

Glucose oxydase from Aspergillus niger

Type VII, lyophilized powder, ≥100,000 units/g solid (without added oxygen)

Synonyme(s) :

ββ-D-glucose:oxygène 1-oxydoréductase, G.Od., GOx

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About This Item

Numéro CAS:
9001-37-0
Numéro de classification (Commission des enzymes):
1.1.3.4 (BRENDA, IUBMB)
Numéro CE :
232-601-0
Numéro MDL:
MFCD00131182
Code UNSPSC :
12352204
Nomenclature NACRES :
NA.54

Type

Type VII

Niveau de qualité

200

Forme

lyophilized powder

Activité spécifique

≥100,000 units/g solid (without added oxygen)

Poids mol.

160 kDa

Ne contient pas

extender

Composition

Protein, ≥60%

Application(s)

diagnostic assay manufacturing

Activité étrangère

Catalase ≤10 Sigma units/mg protein

Conditions d'expédition

wet ice

Température de stockage

−20°C

InChI

1S/C6H12O6/c7-1-2-3(8)4(9)5(10)6(11)12-2/h2-11H,1H2/t2-,3-,4+,5-,6-/m1/s1

Clé InChI

WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N

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Description générale

Poids moléculaire 160 kDa (filtration sur gel)
pI : 4,2
Coefficient d'extinction : E1 % = 16,7 (280 nm)

La glucose oxydase issue de Aspergillus niger est un dimère constitué de deux sous-unités égales d′un poids moléculaire de 80 kDa chacune. Chaque sous-unité contient un fragment flavine adénine dinucléotide et un atome de fer. Cette enzyme est une glycoprotéine contenant environ 16 % de sucre neutre et 2 % de sucres aminés. Elle contient également 3 résidus de cystéine et 8 sites potentiels de N-glycosylation.

La glucose oxydase est capable d′oxyder les D-aldohexoses, les monodésoxy-D-glucoses et les méthyl-D-glucoses à différentes vitesses.

Cette enzyme est active sur une large plage de pH allant de 4 à 7, son pH optimal étant de 5,5. La glucose oxydase est spécifique du β-D-glucose et présente un KM de 33-110 mM.

Elle ne nécessite aucun activateur, mais elle est inhibée par Ag+, Hg2+, Cu2+, l′acétate de phénylmercure et le p-chloromercuribenzoate. Elle n′est pas inhibée par les réactifs à groupe SH non métalliques suivants : N-éthylmaléimide, iodoacétate et iodoacétamide.

La glucose oxydase peut servir au dosage enzymatique du D-glucose en solution. Comme elle oxyde le β-D-glucose en D-gluconolactate et en peroxyde d'hydrogène, la peroxydase de raifort est souvent utilisée comme enzyme de couplage pour le dosage du glucose. Même si la glucose oxydase est spécifique au β-D-glucose, elle peut également permettre de quantifier les solutions de D-glucose car le α-D-glucose subit une mutarotation en β-D-glucose au fur et à mesure de la consommation du β-D-glucose par la réaction enzymatique.

Application

Plusieurs publications mentionnent l′utilisation de la glucose oxydase G2133 dans leurs protocoles et dans diverses applications, notamment les suivantes :
a) Développement de biocapteurs :
  • Revêtements constitués de nanofilms de résine diazo sur des microsphères d′alginate : Srivastava, R. et al., Biotechnol. Bioeng., 91(1), 124-131 (2005).
  • Biocapteur du glucose à base de papier : Lankelma, J. et al., Anal. Chem., 84(9), 417-4152 (2012)
  • Dispositif microfluidique avec glucose oxydase immobilisée sur un hydrogel pour l′analyse de la glycémie : He, R.-Y. et al., RSC Adv., 9, 32367-32374 (2019).
b) Étude FRET à molécule unique de la formation de filaments RAD51 humains : Subramanyam, S. et al., Methods Enzymol., 600, 201-232 (2018).
c) Piles à combustible enzymatiques dotées de membranes à base de chitosane : Bahar, T., and Yazici, M.S., Electroanalysis, 32(6), 1304-1314 (2020).
La glucose oxydase est largement employée dans les industries alimentaire et pharmaceutique ; c′est également un constituant essentiel des biocapteurs de glucose.

Actions biochimiques/physiologiques

La glucose oxydase catalyse l′oxydation du β-d-glucose en d-glucono-β-lactone et en peroxyde d'hydrogène, l′oxygène moléculaire jouant le rôle d′accepteur d'électrons.

Qualité

Peut contenir des traces d′amylase, de maltase, de glycogénase, d′invertase, et de galactose oxydase.

Définition de l'unité

Une unité oxyde 1,0 μmole de β-D-glucose en D-gluconolactone et en H2O2 par minute à pH 5,1 et 35 °C, ce qui équivaut à une absorption de 22,4 μl d′O2 par minute. Si le mélange réactionnel est saturé en oxygène, l′activité peut augmenter d′un facteur pouvant aller jusqu′à 100 %.

Forme physique

Poudre lyophilisée contenant des sels de tampon phosphate et du chlorure de sodium

Remarque sur l'analyse

Protéine déterminée par la réaction du biuret.

Pictogrammes

Health hazard
GHS08

Mention d'avertissement

Danger

Mentions de danger

H334

Classification des risques

Resp. Sens. 1

Code de la classe de stockage

11 - Combustible Solids

Classe de danger pour l'eau (WGK)

WGK 1

Équipement de protection individuelle

dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves

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