A1978

Anticorps monoclonal anti-βactine, souris

clone AC-15, purified from hybridoma cell culture

• Synonyme(s) : Anticorps monoclonal anti-β-actine
• Code UNSPSC : 12352203
• Nomenclature NACRES : NA.41

Propriétés

• Source biologique: mouse
• Niveau de qualité: 300
• Conjugué: unconjugated
• Forme d'anticorps: purified immunoglobulin
• Type de produit anticorps: primary antibodies
• Clone: AC-15, monoclonal
• Forme: buffered aqueous solution
• Poids mol.: antigen 42 kDa
• Espèces réactives: sheep, carp, feline, chicken, rat, mouse, Hirudo medicinalis, rabbit, canine, pig, human, bovine, guinea pig
• Ne doit pas réagir avec: Dictyostelium discoideum
• Technique(s): immunocytochemistry: 10-40 μg/mL using human foreskin fibroblasts; immunohistochemistry (frozen sections): suitable; indirect immunofluorescence: suitable; microarray: suitable; western blot: 0.5-1 μg/mL using cell extract of human foreskin fibroblasts or chicken fibroblasts.
• Isotype: IgG1
• Numéro d'accès UniProt: P60709
• Application(s): research pathology
• Conditions d'expédition: dry ice
• Température de stockage: −20°C
• Modification post-traductionnelle de la cible: unmodified
• Informations sur le gène: human ... ACTB(60) ; mouse ... Actb(11461) ; rat ... Actb(81822)

Description

Description générale

Dans la coloration de cryosections ultra-minces de gésiers de poulet, l′anticorps marque les corps denses et les faisceaux longitudinaux reliant les corps denses successifs, comportant également la desmine et la plaque dense associée à la membrane. Il ne marque pas les muscles cardiaques et squelettiques adultes, sauf en cas de contamination de l′échantillon par des cellules non musculaires ou lorsque du tissu embryonnaire est utilisé.

Le gène ACTB codant pour la β-actine est situé sur le chromosome 7p22.1 humain. La β-actine est la protéine la plus abondante dans le cytoplasme. Le gène ACTB est exprimé de façon ubiquitaire. L'actine est l'une des protéines les plus conservées chez les eucaryotes, et elle est exprimée chez les mammifères et les oiseaux. Quatre des isoformes d'actine constituent des marqueurs de différenciation des muscles squelettiques, et deux sont présentes dans pratiquement toutes les cellules. L'anticorps monoclonal anti-β-actine de souris (isotype IgG1 de souris) est dérivé de l'hybridome AC-15, produit par la fusion de cellules de myélome de souris et de splénocytes de souris BALB/c immunisées par un peptide N-terminal de β-actine cytoplasmique de synthèse, légèrement modifié (Ac-Asp-Asp-Asp-Ile-Ala-Ala-Leu-Val-Ile-Asp-Asn-Gly-Ser-Gly-Lys) et conjugué à la KLH.
Dans la coloration de cryosections ultra-minces de gésiers de poulet, l'anticorps marque les corps denses et les faisceaux longitudinaux reliant les corps denses successifs, comportant également la desmine et la plaque dense associée à la membrane. Il ne marque pas les muscles cardiaques et squelettiques adultes, sauf en cas de contamination de l'échantillon par des cellules non musculaires ou lorsque du tissu embryonnaire est utilisé.

Spécificité

L′anticorps monoclonal de souris anti-β-actine 1, 2 reconnaît un épitope situé dans la partie N-terminale de l′isoforme β de l′actine.

Immunogène

Peptide N-terminal de β-actine cytoplasmique légèrement modifié, Ac-Asp-Asp-Asp-Ile-Ala-Ala-Leu-Val-Ile-Asp-Asn-Gly-Ser-Gly-Lys, conjugué à la KLH.

Application

Les propriétés immunologiques et physiques de l'actine restent remarquablement constantes dans les cellules de diverses espèces et tissus d'origine. Cela rend difficile la production d'antisérums puissants dirigés contre cette protéine. Par conséquent, les anticorps monoclonaux anti-β-actine constituent un outil spécifique intéressant pour étudier la distribution intracellulaire de la β-actine et les aspects statiques et dynamiques du cytosquelette.
L'anticorps monoclonal anti-bêta-actine peut être utilisé dans les analyses de puces à protéines, d'immunofluorescence indirecte et d'immunohistochimie. De plus, ce produit a été utilisé dans l'immunocytochimie de fibroblastes de prépuce humain à une concentration de 10-40 μg/ml. Cet anticorps a également été utilisé dans une analyse par western blotting de fibroblastes de prépuce ou de fibroblastes de poulet à une concentration de 0,5-1 μg/ml.
L'anticorps peut être utilisé pour marquer les coupes congelées fixées à l'acétone, les préparations de microscopie électronique et les expériences de micro-injection. Une solution de Bouin, de B5, d'éthanol ou de méthacam peut être utilisée comme fixateur. L'épitope reconnu par l'anticorps est résistant à la fixation au formol et à l'inclusion dans la paraffine.
Cet anticorps a été utilisé dans des analyses par immunoblotting.

L′anticorps monoclonal anti-actine de souris a été utilisé comme contrôle de charge pour l′analyse par western blot de lysats de protéines du foie.

L′anticorps monoclonal anti-actine de souris a été utilisé comme contrôle de charge pour l′analyse par western blot de protéines immunoprécipitées à partir de co-cultures de ganglion spinal de rat.

L′anticorps monoclonal anti-bêta-actine peut être utilisé dans les analyses de puces à protéines, d′immunofluorescence indirecte et d′immunohistochimie. De plus, ce produit a été utilisé dans l′immunocytochimie de fibroblastes de prépuce humain à une concentration de 10-40 μg/ml. Cet anticorps a également été utilisé dans une analyse par western blot de fibroblastes de prépuce ou de fibroblastes de poulet à une concentration de 0,5-1 μg/ml.
L′anticorps peut être utilisé pour marquer les coupes congelées fixées à l′acétone, les préparations de microscopie électronique et les expériences de micro-injection. Le fixatif peut être composé de solutions de Bouin, de B5, d′éthanol ou de méthacam. L′épitope reconnu par l′anticorps est résistant à la fixation au formol et à l′inclusion dans la paraffine.

Actions biochimiques/physiologiques

Les deux principales protéines du cytosquelette qui jouent un rôle dans la motilité cellulaire sont l'actine et la myosine. Présentes dans de nombreux types de cellules, l'actine et la myosine sont impliquées dans un vaste éventail de processus cellulaires comme la locomotion, la sécrétion, la cyclose, la phagocytose et la cytocinèse.
L'ACTB (β-actin) joue un rôle critique dans l'organogenèse, en particulier le développement du cerveau, des reins et du cœur. Elle est responsable du maintien de la prolifération, de la migration et de la forme des cellules. L'actine est une protéine essentielle pour la maturation des plaquettes. La β−-actine joue un rôle important dans le développement embryonnaire. La régulation à la hausse de la β-actine stimule les protrusions membranaires et favorise la motilité cellulaire. La protéine encodée par la β-actine participe au contrôle de la migration des fibroblastes de souris et, par conséquent, de la tension du tissu conjonctif.
L'actine est une protéine du cytosquelette qui régule la motilité, la sécrétion, la phagocytose et la cytocinèse. La portion NH2-terminale de l'actine peut fonctionner comme un antigène. Cette portion terminale peut également moduler les interactions de l'actine et son association avec d'autres protéines, comme la myosine.

Forme physique

Solution dans un tampon phosphate salin 0,01 M à pH 7,4, contenant de l′azoture de sodium à 15 mM.

Notes préparatoires

Stockage et stabilité : En cas d′utilisation en continu, stocker un mois maximum entre 2 et 8 °C. Pour un stockage prolongé, congeler en aliquotes de travail et stocker à -20 °C. Il n′est pas recommandé de procéder à des congélations et décongélations répétées ou de stocker le produit dans des congélateurs « sans givre ». En cas d′apparition d′une légère turbidité durant un stockage prolongé, clarifier la solution par centrifugation avant utilisation. Les échantillons de travail dilués doivent être jetés s′ils ne sont pas utilisés dans un délai de 12 heures.

Autres remarques

Lauréat du prix CiteAb 2024 récompensant les avancées des fournisseurs dans la recherche sur la maladie de Parkinson

Pour consulter le guide de sélection des anticorps anti-actine, rendez-vous sur www.sigmaaldrich.com/actin.

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Informations sur la sécurité

• Code de la classe de stockage: 10 - Combustible liquids
• Classe de danger pour l'eau (WGK): WGK 3
• Point d'éclair (°F): Not applicable
• Point d'éclair (°C): Not applicable