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MABT345

Sigma-Aldrich

Anticorps anti-pré-lamine-A, clone 7G11

clone 7G11, from rat

Synonyme(s) :

Prelamin-A/C, Prelamin-A, Lamin-A/C

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About This Item

Code UNSPSC :
12352203
eCl@ss :
32160702
Nomenclature NACRES :
NA.41

Source biologique

rat

Niveau de qualité

Forme d'anticorps

purified antibody

Type de produit anticorps

primary antibodies

Clone

7G11, monoclonal

Espèces réactives

mouse

Technique(s)

immunofluorescence: suitable
western blot: suitable

Isotype

IgG2aκ

Numéro d'accès NCBI

Numéro d'accès UniProt

Conditions d'expédition

wet ice

Modification post-traductionnelle de la cible

unmodified

Informations sur le gène

mouse ... Lmna(16905)

Description générale

La lamine-A est un composant clé de la lamine nucléaire, un réseau de protéines sous-jacent à la membrane interne qui détermine la forme et la taille du noyau. Le même gène (Lmna, Dhe ou Lamn1 chez les espèces murines ; ID du gène : 16905) qui code pour la lamine-A code également pour les isoformes de la prélamine-C issues de l'épissage alternatif (UniProt P48678-2 et P48678-3). La lamine-A murine (UniProt P48678-1) est initialement produite sous la forme d'une prélamine-A de 665 acides aminés qui se termine avec un motif CAAX. Elle est ensuite traitée après la traduction par quatre étapes enzymatiques pour donner la lamine-A mature : farnésylation de la Cys662, clivage endoprotéolytique des trois derniers acides aminés (a.a. 663 à 665), carboxyméthylation de la Cys662 et enfin élimination endoprotéolytique de la séquence restante du propeptide (a.a. 648 à 662, y compris la Cys662 farnésylée), catalysée par la métalloprotéinase à zinc ZMPSTE24 de la membrane du réticulum endoplasmique (RE).

Spécificité

Le clone 7G11 détecte la prélamine-A quel que soit son état de farnésylation, mais pas la lamine-A mature (a.a. 1 à 647) dépourvue de la séquence C-terminale du propeptide. Le clone 7G11 ne détecte pas les formes pré- ou matures des isoformes d'épissage C1 et C2 (Lamin-C ; P48678-2 et P48678-3).

Immunogène

Peptide linéaire correspondant à la séquence C-terminale du propeptide de la prélamine-A de souris.
Épitope : séquence C-terminale du propeptide

Application

Analyse par western blotting : Une concentration de 0,5 µg/ml de cet anticorps a permis de détecter l'accumulation de prélamine-A induite par un traitement de 2 jours au FTI (5 µM ; réf. 344550) dans du lysat de cellules C2C12.
Analyse par immunofluorescence : Un lot représentatif a permis de détecter une immunoréactivité hyper-régulée de la prélamine-A dans les kératinocytes, mais pas dans les fibroblastes dermiques, dans des analyses par immunohistochimie fluorescente réalisées sur des coupes de peau de souris dans lesquelles Fntb a été inhibé par ''knock-out'' de manière spécifique aux kératinocytes, fixées au paraformaldéhyde et incluses en paraffine. À l'inverse, on a observé une hyper-régulation de la prélamine-A à la fois dans les kératinocytes et dans les fibroblastes dermiques issus de souris dans lesquelles Zmpste24 a été inhibé par ''knock-out'' de manière non spécifique à un type cellulaire ou tissulaire (Lee, R., et al. (2010). Hum. Mol. Genet.19(8):1603-1617).
Analyse par immunofluorescence : Un lot représentatif a permis de colorer le bord nucléaire des hépatocytes dans des expériences d'immunohistochimie fluorescente sur des coupes de foie congelées fixées au méthanol et perméabilisées au Tween, issues d'une souche de souris transgéniques produisant seulement la prélamine-A à résidu C662S non farnésylé (nPLAO/nPLAO) et pas de lamine-C. En revanche, la concentration cellulaire de prélamine-A était indétectable dans les coupes de foie de souris de type sauvage ou issues d'une souche de souris ne produisant que de la prélamine-A de type sauvage (PLAO/PLAO) et pas de lamine-C (Davies, B.S., et al. (2010). Hum. Mol. Genet. 19(13):2682-2694).
Analyse par western blotting : Un lot représentatif a permis de détecter l'accumulation de prélamine-A cellulaire lors du traitement avec un inhibiteur de la farnésyltransférase (FTI) dans des fibroblastes murins. Le clone 7G11 permet de détecter de manière sélective la prélamine-A, mais pas la lamine-A mature ou la lamine-C (Lee, R., et al. (2010). Hum. Mol. Genet.19(8):1603-1617).
Remarque : En conditions normales, le niveau de prélamine-A cellulaire est en-dessous du seuil de détection. Toute prélamine-A nouvellement produite est rapidement traitée pour produire une lamine-A mature. La farnésyltransférase cellulaire et/ou l'activité ZMPSTE24 doivent être inhibées (par désactivation de gène ou traitement avec un inhibiteur) pour permettre la détection de la prélamine-A cellulaire à l'aide d'anticorps.
Domaine de recherche
Structure cellulaire
L'utilisation de cet anticorps anti-prélamine-A, clone 7G11, a été validée en western blotting et en immunofluorescence pour la détection de la prélamine-A.
Sous-domaine de recherche
Molécules d'adhésion cellulaire (CAM)

Qualité

Produit évalué par western blotting sur lysat de cellules RAW264.7.

Analyse par western blotting : Une concentration de 0,5 µg/ml de cet anticorps a permis de détecter l'accumulation de prélamine-A induite par un traitement de 2 jours au FTI-276 (5 µM ; réf. 344550) dans des macrophages murins RAW 264.7.

Description de la cible

Poids réel : ~74 kDa. Cet anticorps détecte la forme A de la prélamine mais ne détecte pas l'isoforme C.

Forme physique

Anticorps monoclonal de rat anti-IgG2aκ purifié dans un tampon contenant de la Tris-glycine 0,1 M à pH 7,4, du NaCl 150 mM et 0,05 % d'azoture de sodium.
Format : purifié
Purifié sur protéine G

Stockage et stabilité

Stable entre 2 et 8 °C pendant 1 an à compter de la date de réception.

Autres remarques

Concentration : Voir la fiche technique du lot concerné.

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Code de la classe de stockage

12 - Non Combustible Liquids

Classe de danger pour l'eau (WGK)

WGK 1

Point d'éclair (°F)

Not applicable

Point d'éclair (°C)

Not applicable


Certificats d'analyse (COA)

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Andrea Casasola et al.
Nucleus (Austin, Tex.), 7(1), 84-102 (2016-02-24)
Lamin A is part of a complex structural meshwork located beneath the nuclear envelope and is involved in both structural support and the regulation of gene expression. Lamin A is initially expressed as prelamin A, which contains an extended carboxyl
Carlos González-Blanco et al.
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Hutchinson-Gilford Progeria Syndrome is an ultrarare disease which is characterized by an accelerated senescence phenotype with deleterious consequences to people suffering this pathology. The production of an abnormal protein derived from lamin A, called progerin, presents a farnesylated domain, which
Xue Chen et al.
eLife, 10 (2021-02-03)
A farnesylated and methylated form of prelamin A called progerin causes Hutchinson-Gilford progeria syndrome (HGPS). Inhibiting progerin methylation by inactivating the isoprenylcysteine carboxylmethyltransferase (ICMT) gene stimulates proliferation of HGPS cells and improves survival of Zmpste24-deficient mice. However, we don't know

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