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MAB4155

Sigma-Aldrich

Anticorps anti-BCRP1, clone 5D3

clone 5D3, Chemicon®, from mouse

Synonyme(s) :

ABC transporter, ATP-binding cassette transporter G2, ATP-binding cassette, sub-family G (WHITE), member 2, ATP-binding cassette, sub-family G, member 2, Breast cancer resistance protein, CD338 antigen, Mitoxantrone resistance-associated protein, Placent

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About This Item

Code UNSPSC :
12352203
eCl@ss :
32160702
Nomenclature NACRES :
NA.41

Source biologique

mouse

Niveau de qualité

Forme d'anticorps

purified immunoglobulin

Type de produit anticorps

primary antibodies

Clone

5D3, monoclonal

Espèces réactives

rat, human

Fabricant/nom de marque

Chemicon®

Technique(s)

flow cytometry: suitable
immunocytochemistry: suitable
immunofluorescence: suitable
western blot: suitable

Entrée

sample type neural stem cell(s)
sample type hematopoietic stem cell(s)

Isotype

IgG2bκ

Numéro d'accès NCBI

Numéro d'accès UniProt

Conditions d'expédition

wet ice

Modification post-traductionnelle de la cible

unmodified

Informations sur le gène

human ... BCRP1(644079)

Description générale

La protéine de résistance au cancer du sein (BCRP1), également appelée ABC (ATP-binding cassette) spécifique au placenta (ABCP) ou membre 2 de la sous-famille ABC G (ABCG2), ou encore protéine MXR (Mitoxantrone resistance protein), est un membre de la superfamille des transporteurs médicamenteux de type ABC, qui serait impliqué dans les maladies néoplasiques humaines multirésistantes. L'ABCG2 est exprimée dans les lignées cellulaires de cancer du sein, du colon et de l'estomac et de fibrosarcome résistantes aux traitements médicamenteux, ainsi que dans les cellules blastiques de patients atteints de leucémie myéloïde aiguë (LMA). Les tissus normaux qui expriment la protéine ABCG2 comprennent les syncytiotrophoblastes placentaires, les canaux et lobules mammaires, l'épithélium du gros intestin et du côlon, l'épithélium vasculaire et capillaire ainsi que la membrane canaliculaire biliaire du foie. Plusieurs études indiquent que l'ABCG2 est également exprimée dans les cellules souches de différents tissus et qu'elle pourrait constituer un bon marqueur des cellules souches. L'ABCG2 serait responsable de la capacité d'une population de cellules hématopoïétiques et non hématopoïétiques très primitives, le sous-ensemble appelé SP (Side population) à effluer le colorant fluorescent Hoechst 33342. Les résultats de la RT-PCR semi-quantitative indiquent que l'ARNm de l'ABCG2 est exprimé à des niveaux plus élevés dans les cellules SP que dans les cellules non SP des tissus hématopoïétiques humains, de singe rhésus et de souris, à l'exception des érythroblastes et des cellules NK. Dans la moelle osseuse humaine, l'expression de l'ARNm de l'ABCG2 est plus forte dans les populations de cellules hématopoïétiques primitives CD34+CD38- définies phénotypiquement que dans les cellules progénitrices CD34+CD38+ plus différenciées. L'ARNm de Bcrp1 est également exprimé dans les cellules SP du muscle squelettique murin, dans les cellules souches et progénitrices neurales et dans les cellules progénitrices dérivées des îlots pancréatiques et positives à la nestine. La surexpression du gène ABCG2 humain par transfert de gène rétroviral permet de conférer le phénotype SP aux cellules de la moelle osseuse de souris. L'ARNm de Bcrp1 est exprimé dans les fractions SP et non SP des cellules souches embryonnaires de souris. Cela suggère que les taux de la protéine Bcrp1 ne sont pas toujours reflétés par les taux d'ARNm, ou que d'autres caractéristiques des cellules souches, telles que l'état du cycle cellulaire ou l'expression d'autres transporteurs, sont également impliquées dans le phénotype SP.

Spécificité

Reconnaît spécifiquement un épitope externe de la forme humaine de l'ABCG2. Semble réagir avec des lignées de cellules souches de souris (Ginis, et al., 2004) ; la réactivité chez la souris n'est toutefois pas confirmée à l'heure actuelle.

Immunogène

Cellules 3T3 exprimant la protéine ABCG2 humaine

Application

Domaine de recherche
Recherche sur les cellules souches
Détection de la BCRP1 à l'aide de cet anticorps anti-BCRP1, clone 5D3, dont l'utilisation a été validée en FC, IC, IF, FUNC et WB.
Immunocytochimie :
Fixation des cultures cellulaires avec du paraformaldéhyde (PFA) à 4 % pendant 5 à 15 minutes à température ambiante. Inhibition avec du sérum de chèvre à 10 % et 0,1 % de sérum albumine bovine dans du PBS contenant 0,3 % de Triton X-100 (Ginis et al., 2004).

Cytométrie en flux :
une dilution au 1/100-1/1 000e d'un précédent lot a été utilisée.

Test d'inhibition :
un lot précédent a été utilisé pour inhiber l'ABCG2 (Watanabe, K. et al., (2004. FEBS Letters 565:6-10). Voir également Sarkadi, B., et al., 2004 FEBS 567:116-120. Sarkadi indique que la détection et l'inhibition par l'anticorps 5D3 dépendent fortement de la conformation actuelle de l'ABCG2.
Inhibition avec du sérum de chèvre à 10 % et 0,1 % de sérum albumine bovine dans du PBS contenant 0,3 % de Triton X-100 (Ginis, 2004).

Il revient à l'utilisateur final de déterminer les dilutions de travail optimales.
Sous-domaine de recherche
Cellules souches neurales

Cellules souches hématopoïétiques

Qualité

Produit évalué en routine par western blotting sur des lysats de cellules L6.

Analyse par western blotting :
une dilution au 1/500e de ce lot a permis de détecter la BCRP1 dans 10 µg de lysats de cellules L6.

Description de la cible

72 kDa

Forme physique

Format : Produit purifié
IgG2bκ monoclonale de souris purifiée en solution dans un tampon contenant du PBS (pH 7,4) avec 0,1 % d'azoture de sodium.
Produit purifié sur protéine A

Stockage et stabilité

Stable entre 2 et 8 ºC pendant 1 an à compter de la date de réception. Ne pas congeler.

Remarque sur l'analyse

Témoin
Cellules MCF-7

Autres remarques

Concentration : pour connaître la concentration spécifique du lot, voir le certificat d'analyse.

Informations légales

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Clause de non-responsabilité

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Code de la classe de stockage

10 - Combustible liquids

Classe de danger pour l'eau (WGK)

WGK 2

Point d'éclair (°F)

Not applicable

Point d'éclair (°C)

Not applicable


Certificats d'analyse (COA)

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Canine hemangiosarcoma is a rapidly progressive disease that is poorly responsive to conventional chemotherapy. Despite numerous attempts to advance treatment options and improve outcomes, drug resistance remains a hurdle to successful therapy. To address this problem, we used recently characterized
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The Biochemical journal, 475(9), 1553-1567 (2018-04-18)
Multidrug binding and transport by the ATP-binding cassette transporter ABCG2 is a factor in the clinical resistance to chemotherapy in leukaemia, and a contributory factor to the pharmacokinetic profiles of many other prescribed drugs. Despite its importance, the structural basis
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