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GE27-0843-01

Protéase PreScission

Cytiva 27-0843-01

Synonyme(s) :

protéine de fusion, élimination d’étiquette GST

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About This Item

Code UNSPSC :
41106501
Nomenclature NACRES :
NA.56
Le tarif et la disponibilité ne sont pas disponibles actuellement.

Conditionnement

pkg of 500 units

Fabricant/nom de marque

Cytiva 27-0843-01

Conditions d'expédition

dry ice

Température de stockage

−70°C

Description générale

La protéase PreScission est une protéine de fusion constituée de protéase 3C du rhinovirus humain (RVH) et de glutathion S-transférase (GST). Elle permet de mettre en œuvre en une seule étape le clivage des étiquettes GST sur colonne et la purification des protéines.

Clivage enzymatique sur colonne ou hors colonne

Les étiquettes GST et la protéase peuvent être éliminées en une seule étape, les protéines de fusion restant fixées à la résine de chromatographie d'affinité Glutathione Sepharose 4B, Glutathione Sepharose High Performance ou Glutathione Sepharose 4 Fast Flow. Une méthode alternative consiste à éluer les protéines avec étiquette GST avec du gluthanion réduit, à réaliser le clivage puis à transférer l'échantillon sur le même type de résine pour éliminer la protéase et les étiquettes. Contrairement à d'autres protéases courantes, telles que la thrombine et le facteur Xa, la protéine de fusion avec étiquette GST peut être facilement éliminée par fixation sur une résine présentant une affinité pour la GST. Les autres protéases non recombinantes nécessitent une étape de purification supplémentaire avec une résine différente.

Vecteurs codant pour la séquence de reconnaissance de la protéase 3C du RVH

Les vecteurs pGEX-6P, pGEX-6P-1, pGEX-6P-2 et pGEX-6P-3 codent pour la séquence de reconnaissance de la protéase 3C.

Application

Clivage spécifique à basse température d'étiquettes de protéines de fusion ; clivage simple sur colonne lors de la purification par affinité.
La protéase PreScission a été utilisée pour éluer l'AT3 marquée par une étiquette GST lors des réactions d'ubiquitination in vitro et de préparation d'AT3-Ub.[1] Elle a également été employée pour cliver l'étiquette GST de l'alpha-énolase lors de l'induction de l'expression de cette protéine de fusion dans la souche déficiente en protéases BL21 d'Escherichia coli.[2]

Caractéristiques et avantages

  • Clivage spécifique – entre les résidus Gln et Gly de la séquence de reconnaissance LeuGluValLeuPheGln/GlyPro.
  • Gain de temps – Les protéines avec étiquette GST peuvent être clivées tout en étant encore fixées sur une résine de chromatographie d'affinité.
  • La faible température d'incubation – permet le clivage à basse température des protéines de fusion contenant la séquence de reconnaissance de la protéase 3C de RVH.

Stockage et stabilité

Remarque : ce produit peut être expédié jusqu'à 90 jours avant sa date de péremption. Pour de plus amples informations sur la date de péremption d'un lot, veuillez contacter le service technique.

Remarque sur l'analyse

Pour consulter le certificat d'analyse de ce produit, rendez-vous sur le site www.cytiva.com.

Informations légales

Vecteurs pGEX
Les vecteurs pGEX sont uniquement destinés aux activités de recherche scientifique et ne sauraient être utilisés à d'autres fins. Une licence pour utilisation commerciale des produits sous licence et des processus couverts par le brevet américain n° 5,654,176 et par les brevets équivalents (ou demandes de brevets en instance) dans d'autres pays doit être négociée directement avec Millipore Corp (anciennement Chemicon International Inc) par l'acheteur avant toute utilisation de ce type.

Code de la classe de stockage

12 - Non Combustible Liquids

Classe de danger pour l'eau (WGK)

WGK 1

Point d'éclair (°F)

Not applicable

Point d'éclair (°C)

Not applicable


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Nature communications, 10(1), 3162-3162 (2019-07-20)
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The New phytologist, 235(5), 1995-2007 (2022-05-26)
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Articles

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Protocoles

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Protect fusion proteins from proteolytic degradation with enzyme removal pre- and post-cleavage using PreScission Protease, thrombin, or Factor Xa.

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