The actual volume of the solution is determined by the lot-specific activity, which can be found in the Certificate of Analysis. For this product, there are 5,000 units available. If the lot has a specific activity of 335 U/?L, the volume will be approximately 14.9 ?L for 5,000 units. It is recommended to dilute the product in 20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 2 mM MgCl?, and 20 mM NaCl.
E1014
Nucléase Benzonase®
≥250 units/μL, ≥90% (SDS-PAGE), recombinant, expressed in E. coli, buffered aqueous glycerol solution
Benzonase® Nuclease
Synonyme(s) :
Endonucléase from Serratia marcescens
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| À vous/Référence | Disponibilité | Prix |
|---|---|---|
5 kU | Expédition prévue aujourd'huiDeSt QuentinFallavier | 160,00 € |
25 kU | Expédition prévue aujourd'huiDeSt QuentinFallavier | 541,00 € |
A propos de cet article
Numéro CAS:
UNSPSC Code:
12352204
NACRES:
NA.54
MDL number:
Assay:
≥90% (SDS-PAGE)
Biological source:
Serratia marcescens
Recombinant:
expressed in E. coli
Concentration:
≥250 units/μL
Service technique
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Serratia marcescens
Quality Segment
recombinant
expressed in E. coli
assay
≥90% (SDS-PAGE)
form
buffered aqueous glycerol solution
mol wt
30 kDa
concentration
≥250 units/μL
application(s)
research use
foreign activity
protease, essentially free
shipped in
wet ice
storage temp.
−20°C
General description
La nucléase Benzonase® est une endonucléase génétiquement modifiée extrêmement efficace issue de Serratia marcescens[1]. Ce dimère protéique doté de deux ponts disulfure cruciaux[2] est capable d'attaquer et de dégrader toutes les formes d'ADN et d'ARN (simple brin, double brin, linéaire et circulaire) en conditions opératoires très variées. La nucléase Benzonase® a la capacité d'éliminer les acides nucléiques et d'améliorer la pureté et la qualité des échantillons protéiques.
Application
Pour l'élimination des acides nucléiques présents dans les échantillons protéiques.
La nucléase Benzonase® a été utilisée : dans un tampon de lyse C glacé pour digérer de l'ADN et de l'ARN et contribuer à la libération complète de toutes les protéines nucléaires, dans une étape d'immunoprécipitation pour libérer les complexes protéiques présents dans le nucléoplasme et la chromatine, comme supplément dans un tampon RIPA pour fractionner des cellules SHSY5Y en vue d'une immunoprécipitation, pour éliminer les acides nucléiques résiduels d'anneaux aortiques dans une méthode de décellularisation.
Biochem/physiol Actions
Digère l′ADN et l′ARN endogènes ou dénaturés par voie thermique.
La nucléase Benzonase® peut digérer entièrement les acides nucléiques en donnant des oligonucléotides à extrémité 5′-monophosphate de 3 à 5 bases de long, ce qui en fait un outil idéal pour éliminer les acides nucléiques mélangés aux protéines recombinantes et pour les applications nécessitant une digestion complète des acides nucléiques. En plus de réduire la viscosité des extraits protéiques et d'empêcher les cellules de s'agglutiner, prétraiter les échantillons protéiques avec la nucléase Benzonase® améliore grandement leur résolution en électrophorèse sur gel en 2D grâce à la suppression des éventuels acides nucléiques liés. Cette enzyme polyvalente est capable de digérer l'ADN et l'ARN natifs ainsi que leurs formes dénaturées par voie thermique, l'activité de l'enzyme étant maximale entre pH 8,0 et pH 9,2. La nucléase Benzonase® permet d'éliminer l'ADN des cellules hôtes présent dans les échantillons de microbiome. Dans de nombreux cas, les échantillons de microbiome (salive ou peau par exemple) contiennent un pourcentage élevé d'ADN des cellules hôtes qui interfère avec les résultats en aval. Nos experts ont montré que réduire la quantité de l'ADN issu des celles hôtes permet d'abaisser le coût du séquençage tout en augmentant et en améliorant les données. Les données expérimentales sont disponibles dans l'article technique : Benzonase® Nuclease for Microbiome Workflows.
Features and Benefits
- Déplétion de l'ADN des cellules hôtes présent dans les échantillons de microbiome.
- Digestion efficace des acides nucléiques dans diverses procédures.
- Réduction de la viscosité durant l'extraction de protéines.
Physical form
Legal Information
La nucléase Benzonase® est fournie par Merck KGaA Darmstadt (Allemagne) et/ou ses filiales.
Benzonase is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
1 of 1
Cet article | |||
|---|---|---|---|
| biological source Serratia marcescens | biological source Serratia marcescens | biological source Serratia marcescens | biological source Serratia marcescens |
| assay ≥90% (SDS-PAGE) | assay ≥99% (SDS-PAGE) | assay >99% (SDS-PAGE) | assay ≥99% (SDS-PAGE) |
| form buffered aqueous glycerol solution | form buffered aqueous glycerol solution | form buffered aqueous glycerol solution | form buffered aqueous glycerol solution |
| concentration ≥250 units/μL | concentration ≥250 units/μL | concentration ≥250 units/μL | concentration ≥250 units/μL |
| recombinant expressed in E. coli | recombinant expressed in E. coli | recombinant expressed in E. coli | recombinant expressed in E. coli |
| application(s) research use | application(s) research use | application(s) research use | application(s) pharma/biopharma processes |
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Classe de stockage
10 - Combustible liquids
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hi, I received E1014-5KU product. I couldn't find what solution should I dilute to get a concentration of 25U/ml. Also, the volume of the solution.
1 réponse-
Utile ?
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Do you sell high salt lysis buffers that are compatible with benzonase? Do you have any written protocols for use of benzonase with high salt buffers?
1 réponse-
We do not have a branded "high-salt lysis buffer" off the shelf that is compatible with benzonase. However, we offer a specialized Benzonase® Salt Tolerant Endonuclease which is active at higher salt concentration, up to1M NaCl .
https://www.sigmaaldrich.com/US/en/product/mm/e5014Utile ?
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I am doing a protein purification and would like to know if magnesium chloride is required in the lysis buffer when using the Benzonase. Also, would the activity of benzonase be affected when added to a lysis buffer containing EDTA
1 réponse-
A concentration of 1-2 mM of magnesium is required for the activity of this product. An EDTA concentration of 1 mM partially inhibits the activity of this product.
Utile ?
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Hi, what is the ratio of E1014 : DNA and E1014 : RNA for an efficient acid nucleic removal?
1 réponse-
For efficient nucleic acid removal using Benzonase® (E1014), the recommended ratio depends on the concentration of DNA or RNA in the sample. A typical starting point is 25 U/mL of Benzonase® for reducing nucleic acid content in lysates, which corresponds to approximately 1 unit of enzyme per 37 µg of DNA under optimal conditions. For lower concentrations of DNA or RNA, as little as 9 U/mL may achieve 99% removal, but higher concentrations, e.g., 90 U/mL, ensure faster and more complete degradation. Optimal activity requires 1–2 mM magnesium ions, a pH of 8.0–9.2, and incubation at 37°C. Adjustments may be needed for sample-specific factors such as buffer composition and nucleic acid load.
Utile ?
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How many ul does it contain? What kind of Unit is KU?
1 réponse-
The unit activity of this product is lot-specific and reported in the product Certificate of Analysis. The minimum activity is 250 units per microliter. The KU value represents 1000 units. For example, a 20 KU package size represents 20,000 units. Please see the link below to review a sample or lot-specific Certificate:
https://www.sigmaaldrich.com/product/sigma/e1014#product-documentationUtile ?
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Hi, for protein purification from E. coli cells, how much is the working concentration range for Benzonase nuclease (≥250 units/μL)? Thank you
1 réponse-
The recommended starting concentration for Benzonase nuclease is 25 units per milliliter of cell lysate.
Utile ?
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Hello, I plan to do proteomic for protein. When I add RIPA buffer to isolate the protein, I need to remove the DNA and RNA inside. When should I add E1014? Together with RIPA or after it?
1 réponse-
Concentrations greater than 1 mM EDTA will inhibit Benzonase activity, and RIPA buffer recipes typically contain EDTA at higher concentrations than 1 mM. Therefore, Benzonase should be used after removing EDTA from the lysed sample or consider using a different lysis solution that does not include EDTA in the formulation.
Utile ?
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What is the storage temperature range for E1014? There is only a specified storage temperature, and not a range.
1 réponse-
This product is stored at freezer temperature, which is typically -20°C. An excepted range is -15 - -20°C.
Utile ?
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