SFLCKB

KAPA SYBR^™ FAST

suitable for qPCR, 2 ×, for LightCycler^®480

• Synonyme(s) : LightCycler, qPCR
• NACRES: NA.55
• UNSPSC Code: 41106300

Propriétés

• usage: sufficient for 100 reactions, sufficient for 1000 reactions, sufficient for 500 reactions
• shelf life: ≤12 mo.
• feature: dNTPs included, hotstart
• packaging: kit of 1 mL (100 x 20 μL rxn; KK4609), kit of 10 mL (1000 x 20 μL rxn; KK4611), kit of 5 mL (500 x 20 μL rxn; KK4610)
• manufacturer/tradename: Roche
• concentration: 2 ×
• technique(s): qPCR: suitable, whole genome amplification: suitable
• input: purified DNA
• compatibility: for use with Bio-Rad CFX96, for use with Bio-Rad Chromo4 (Real-Time Detector), for use with Bio-Rad DNA Engine Opticon, for use with Bio-Rad Opticon 2, for use with Eppendorf^® Mastercycler (ep realplex ), for use with Illumina Eco, for use with Roche LightCycler 1.5/2.0, for use with Roche LightCycler 480, for use with Roche LightCycler 96, for use with Roche LightCycler Nano, for use with Rotor-Gene^®, for use with Smart Cycler^®
• detection method: SYBR^™ Green
• storage temp.: −20°C

Description

General description

Les kits pour qPCR KAPA SYBR^™ FAST contiennent la première ADN polymérase créée par évolution dirigée pour mieux tolérer l'inhibition du colorant SYBR Green I.

Grâce une plus grande robustesse, une meilleure processivité et une plus grande rapidité, les kits pour qPCR KAPA SYBR FAST permettent d'obtenir une efficacité d'amplification élevée et reproductible, pour une meilleure précision de la quantification relative lors de l'analyse de l'expression génique. Conçus pour réaliser des PCR en temps réel optimales en conditions stringentes, les kits pour qPCR KAPA SYBR FAST offrent des performances bien supérieures, qu'il s'agisse du rapport signal sur bruit (fluorescence), du cycle de quantification (Cq), de la linéarité ou de la sensibilité.

Application

Le kit KAPA SYBR^™ FAST pour LightCycler^® 480 a été utilisé pour les besoins suivants :

• Expression génique
• Validation de l'inactivation de gènes (knockdown)
• Validation de puces à ADN
• Analyses par ChIP
• Détection de cibles en faible nombre
• Quantification absolue de banques de séquençage de nouvelle génération (NGS)
• PCR quantitative en temps réel (qPCR)

Features and Benefits

Quantification plus précise des variations de l'expression génique

• Grande efficacité de réaction (95 % à 105 %), pour une meilleure exactitude et une plus grande reproductibilité
• Efficacité non biaisée sur une large gamme de taux de GC et de longueurs d'amplicon

Détection plus reproductible des cibles en faible nombre et des cibles difficiles à analyser

• Meilleure processivité, pour des Cq plus précoces
• Meilleure détection par fluorescence de divers composés cibles riches en AT et en GC
• Nouvelle enzyme résistant à l'inhibition du colorant SYBR^™

Réalisation d'analyses PCR en temps réel complètes en seulement 40 minutes

• Réduction de 55 % du temps d'analyse avec le protocole à cycles rapides
• Maintien de bonnes performances entre le protocole standard et le protocole rapide

Remarques :

• Ce kit contient une enzyme modifiée, optimisée pour la qPCR, utilisant la chimie du colorant SYBR Green I.
• Le mélange maître concentré 2 × contient un tampon développé en interne. Associé à la nouvelle enzyme, il permet d'améliorer l'efficacité d'amplification des cibles riches en GC et en AT.
• Une dénaturation initiale de 20 secondes à 95 °C suffit à activer l'enzyme. Une dénaturation initiale de 3 minutes est recommandée pour les matrices complexes.
• Pour un cyclage en 3 étapes, prévoir 20 secondes pour l'hybridation des amorces et 1 seconde pour l'élongation et l'acquisition des données à 72 °C.
• Limiter les volumes réactionnels à 25 μl.

Preparation Note

Veillez toujours à ce que les composants soient complètement décongelés et bien mélangés avant utilisation. Le mélange maître pour qPCR KAPA SYBR^™ FAST (concentré 2 ×) peut ne pas se solidifier à la congélation, même lors d'un stockage à -20 °C.

Le colorant SYBR Green I contenu dans le mélange maître pour qPCR KAPA SYBR FAST (concentré 2 ×) et les colorants ROX/fluorescéine (selon la configuration du kit) sont sensibles à la lumière. Une exposition prolongée à la lumière directe entraînera une perte de l'intensité du signal de fluorescence.

Le mélange maître pour qPCR KAPA SYBR FAST (concentré 2 ×) supporte jusqu'à 30 cycles de congélation/décongélation. Veillez à conserver tous les réactifs à l'abri de la lumière et à -20 °C lorsque vous ne les utilisez pas. Lorsqu'ils sont dans l'obscurité, les réactifs sont stables pendant au moins une semaine à 4 °C et ils peuvent être conservés à cette température pour une utilisation à court terme, sous réserve qu'ils soient protégés de toute contamination par des microbes et/ou des nucléases.

Analysis Note

Tous les composants de ce kit sont soumis à un contrôle qualité fonctionnel exigeant, ne présentent aucune activité endonucléase/exonucléase contaminante détectable et répondent à des critères stricts en matière de contamination par l'ADN.

Other Notes

Produit réservé aux activités de recherche. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.

Legal Information

SYBR is a trademark of Thermo Fisher Scientific or its subsidiaries

Eppendorf is a registered trademark of Eppendorf SE

LightCycler is a registered trademark of Roche

Rotor-Gene is a registered trademark of Qiagen GmbH

SmartCycler is a registered trademark of Cepheid, Inc.

Composants de kit seuls

• KAPA SYBR^™ FAST DNA Polymerase
• reaction buffer
• dNTPs
• SYBR^™ Green I dye
• MgCl₂ 2.5 mM

Informations sur la sécurité

• Pictogrammes: GHS08
• Mot-clé: Warning
• Codes de danger: H371
• Mentions de précaution: P260 - P264 - P270 - P308 + P311 - P405 - P501
• Hazard Classifications: STOT SE 2
• Classe de stockage: 12 - Non Combustible Liquids
• Que se passe-t-il ?: WGK 1
• Point d'éclair (°F): does not flash
• Point d'éclair (°C): does not flash