PEFBSC-RO

Pefabloc^® SC

powder, solubility: 100 mg/mL in aqueous buffer, suitable for blocking, suitable for protein purification

• Synonyme(s) : Pefabloc^® SC, Fluorure de 4-(2-aminoéthyl)-benzène-sulfonyle, aebsf, fluorure d’aminoéthyl-benzène-sulfonyle, 4-2-, inhibiteur de protéinase K
• UNSPSC Code: 12352204
• NACRES: NA.54

Propriétés

• form: powder
• mol wt: M_r 239.5
• packaging: pkg of 1 g (11429876001), pkg of 100 mg (11429868001), pkg of 500 mg (11585916001)
• manufacturer/tradename: Roche
• technique(s): blocking: suitable, protein purification: suitable
• mp: 175-185 °C
• solubility: aqueous buffer: 100 mg/mL
• storage temp.: 2-8°C

Description

General description

Pefabloc SC est un inhibiteur spécifique, puissant et irréversible des protéases à sérine. Son activité inhibitrice est comparable à celle du PMSF ou du DFP, mais il est non toxique.

Application

• Pefabloc SC sert à inhiber les effets délétères des protéases durant la purification préparative des protéines.
• Du fait de sa faible toxicité vis-à-vis des cellules eucaryotes, ce produit peut être utilisé lors de la production de protéines recombinantes, lors de la fermentation de cellules transformées, lorsque la digestion protéolytique peut réduire le rendement du produit recherché.
• Pefabloc SC permet d′inactiver complètement la protéinase K pendant la préparation d′ADN chromosomique dans des blocs d′agarose (« agarose plugs »). Pour ce faire, les cellules sont incluses dans de l′agarose puis digérées avec de la protéinase K pour dégrader la totalité des protéines. Avant ajout d′une endonucléase de restriction spécifique, la protéinase K est inactivée par incubation des blocs d′agarose dans du Pefabloc SC 1-5 mM dans un milieu contenant du Tris-HCl 10 mM et de l′EDTA 1 mM à pH 7 et +37 °C pendant 2 heures ou bien toute la nuit.
• Contrairement au PMSF, Pefabloc SC est un excellent bloqueur de l′activité de la thrombine dans le sérum ou le plasma. Dans ces fluides biologiques, le PMSF interagit de manière réversible avec l′albumine, ce qui réduit sa concentration sous forme libre et retarde l′inactivation de la thrombine. Pefabloc SC, quant à lui, ne réagit pas avec l′albumine sérique, et présente une capacité d′inactivation de la thrombine trois fois supérieure en conditions similaires.
• Pefabloc SC peut être utilisé sur les cellules vivantes.
• Utilisez Pefabloc SC pour inactiver la protéinase K, par exemple durant une électrophorèse sur gel en champ pulsé (ECP). Avec cette technique, l′isolement d′ADN génomique requiert de la protéinase K pour dégrader les constituants cellulaires, et cette protéase extrêmement résistante est difficile à inactiver. Pefabloc SC inhibe la protéinase K et protège la stabilité des enzymes de restriction utilisées pour poursuivre l′analyse de l′ADN.

Biochem/physiol Actions

Pefabloc SC fait partie de la famille des fluorures de sulfonyle qui bloque de manière irréversible les protéases à sérine. Pefabloc SC a également été décrit comme un inhibiteur puissant de sérine/thréonine phosphatase.

Features and Benefits

• Profitez d′un inhibiteur facile à utiliser. Hydrosoluble, Pefabloc SC peut être ajouté directement dans les tampons aqueux.
• Évitez les composés dangereux. Inhibez de manière non toxique vos protéases, sans risque pour vous ou ceux qui vous entourent (voir Figure 1).
• Obtenez une protection garantie avec une stabilité améliorée. L′inhibition des protéases est uniforme, même aux pH supérieurs à 7,0 et aux températures supérieures à +4 °C (voir Figure 2).
• Maximisez l′inhibition. Ayez la certitude que le taux de votre inhibiteur actif est suffisamment élevé en utilisant un produit réellement soluble et stable.

Preparation Note

Concentration de travail : 0,1 à 1 mg/ml (0,4 à 4 mM)
Solution de travail : Il est recommandé d′ajouter un solvant dans les tampons aqueux ou l′eau distillée jusqu′à 100 mg/ml.

Conditions de stockage (solution de travail) : de -15 à -25 °C (solution mère).
La stabilité de Pefabloc SC en solution aqueuse est affectée par le pH et la température. Conservées en aliquotes, les solutions mères concentrées (par exemple 100 mM) préparées dans de l′eau distillée sont acides et stables 1 à 2 mois entre -15 et -25 °C.
Remarque : Conservez Pefabloc SC en milieu acide et ajoutez-le aux échantillons biologiques juste avant utilisation, afin de réduire au minimum l′hydrolyse.

Produit soluble dans l′eau et les tampons aqueux jusqu′à 100 mg/ml. Produit stable en aliquotes à une température de -15 à -25 °C pendant 1 à 2 mois. Seule une légère hydrolyse se produit en conditions faiblement basiques (pH 8,0 à 9,0).

Analysis Note

A fait l′objet d′un contrôle fonctionnel ; homogène en CCM (TLC)

Other Notes

Produit destiné uniquement à la recherche en sciences de la vie. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.

Legal Information

Pefabloc is a registered trademark of Pentapharm

Informations sur la sécurité

• Pictogrammes: GHS05
• Mot-clé: Danger
• Codes de danger: H314
• Mentions de précaution: P260 - P280 - P301 + P330 + P331 - P303 + P361 + P353 - P304 + P340 + P310 - P305 + P351 + P338 + P310
• Hazard Classifications: Eye Dam. 1 - Skin Corr. 1B
• Classe de stockage: 8A - Combustible corrosive hazardous materials
• Que se passe-t-il ?: WGK 2
• Point d'éclair (°F): Not applicable
• Point d'éclair (°C): Not applicable