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Roche

Digoxigénine-11-dUTP, stable en milieu alcalin

Synonyme(s) :

Digoxigénine-11-dUTP, labile en milieu alcalin

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About This Item

Code UNSPSC :
41105500

Pureté

≥85% (HPLC)

Niveau de qualité

Forme

solution

Poids mol.

Mr 1090.7

Conditionnement

pkg of 125 μL (11558706910 [1 mM])
pkg of 5 × 125 μL (11570013910 [5x1 mM])
pkg of 25 μL (11093088910 [1 mM])

Fabricant/nom de marque

Roche

λmax

222 and 292 nm
22430 and 8780

Température de stockage

−20°C

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Description générale

La digoxigénine-11-dUTP stable en milieu alcalin est fournie dans une solution de sel de tétralithium à 1 mM.

Application

La digoxigénine-11-dUTP stable en milieu alcalin a été utilisée pour marquer des sondes pour
l′hybridation in situ en fluorescence (FISH) et l′amplification en chaîne par polymérase (PCR).
Remarque : Lorsque ce nucléotide est exposé à 0,1 - 0,5 M NaOH entre +15 et +25 °C, la portion DIG reste attachée. Ce produit est donc idéal pour l′ADN marqué à la DIG qui doit résister à une exposition à un traitement alcalin. Cependant, si vous souhaitez préparer une sonde marquée à la DIG qui peut être retirée par dénaturation en milieu alcalin (p. ex. pour dépouiller les blots avant une réhybridation), n′utilisez pas cette préparation stable aux alcalis. Utilisez plutôt la forme de DIG-11-dUTP labile en milieu alcalin.

Actions biochimiques/physiologiques

La digoxigénine (DIG)-11-désoxyuridine triphosphate (dUTP) remplace la désoxythimidine triphosphate (dTTP) dans la réaction de marquage de l′ADN par amorçage aléatoire ou par translation de coupure dans un rapport 35 % de DIG-11-dUTP sur 65 % de dTTP. La DIG-11-dUTP peut également remplacer la dTTP dans l′amplification en chaîne par polymérase (PCR) par l′ADN polymérase Taq, le marquage de l′extrémité 3′ (tailing) par la transférase terminale et la synthèse de l′ADNc par le kit Transcriptor ou la transcriptase inverse M-MuLV, par exemple. C′est un substrat idéal pour les ADN polymérases, notamment Taq, la transférase terminale et la transcriptase inverse.

Caractéristiques et avantages

La digoxigénine est liée à la désoxyuridine triphosphate par une liaison éther résistante aux alcalis.

Résistance aux alcalis : La préparation est stable en présence de NaOH 0,1 - 0,5 M entre +15 et +25 °C.

Qualité

Analyse typique : Au moins 85 % DIG-11-dUTP (CLHP, % d′aire)
Contrôle fonctionnel par RPL (marquage par amorçage aléatoire).

Notes préparatoires

Solution de travail : Nous vous recommandons de préparer un mélange de désoxynucléotides contenant dATP, dCTP, dGTP, dTTP (10 mM chacun) ; p. ex, pour préparer 100 μl de mélange de nucléotides, ajouter 10 μl de dATP, dCTP, dGTP, dTTP (chacun) à 60 μl d′eau de qualité PCR).
Conditions de stockage (solution de travail) : Une décomposition d′environ 5 % peut se produire dans un délai de 4 semaines quand stockée entre 15 et 25 °C.

Autres remarques

Pour la recherche en sciences de la vie uniquement. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.

Code de la classe de stockage

12 - Non Combustible Liquids

Classe de danger pour l'eau (WGK)

nwg

Point d'éclair (°F)

does not flash

Point d'éclair (°C)

does not flash


Certificats d'analyse (COA)

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