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Roche

Kit de marquage et de détection d′ADN à la DIG

greener alternative

Synonyme(s) :

kit de marquage et de détection d’ADN, DIG

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About This Item

Code UNSPSC :
41105500

Utilisation

sufficient for 25 labeling reactions
 sufficient for 50 blots

Niveau de qualité

100

Fabricant/nom de marque

Roche

Caractéristiques du produit alternatif plus écologique

Designing Safer Chemicals
Learn more about the Principles of Green Chemistry.

sustainability

Greener Alternative Product

Autre catégorie plus écologique

, Aligned

Température de stockage

−20°C

Catégories apparentées

Description générale

Le kit de marquage et de détection d′ADN à la DIG est un kit pratique pour le marquage de l′ADN par amorçage aléatoire à la digoxigénine-désoxyuridine triphosphate (dUTP) ; labile en milieu alcalin ; permet la détection par couleur des hybrides par dosage immuno-enzymatique. Dans cette méthode, le brin complémentaire d′ADN dénaturé est synthétisé par la polymérase de Klenow, en utilisant les extrémités 3′-OH des oligonucléotides aléatoires comme amorces.

Contenu :
  • ADN de contrôle 1, non marqué, 100 μg/ml
  • ADN de contrôle 2, non marqué, 200 μg/ml
  • Tampon de dilution de l′ADN
  • ADN de contrôle, marqué à la DIG, 5,2 μg/ml
  • Mélange d′hexanucléotides, 10x
  • Mélange de marquage aux dNTP, 10x
  • Enzyme de Klenow, qualité marquage, 2 U/μl
  • Conjugué anti-digoxigénine-AP, 750 U/ml
  • Solution mère concentrée NBT/BCIP
  • Réactif de blocage
Nous nous engageons à vous proposer des produits plus respectueux de l′environnement et conformes à au moins un des douze principes de la chimie verte. Ce produit chimique est conçu pour être plus sûr. Le système DIG constitue une alternative à la radioactivité qui est à la fois sensible et rentable pour le marquage et la détection des acides nucléiques. De nombreux articles documentent la souplesse d′emploi du système DIG, montrant que le marquage radioactif n′est plus la seule solution envisageable pour le marquage de l′ADN en vue de son hybridation.

Spécificité

Sensibilité et spécificité : La réaction de marquage standard avec 1 μg de matrice produit 260 ng d′ADN marqué à la DIG après une incubation d′une heure à +37°C, ou 780 ng après une incubation de 20 heures. La sensibilité de détection de la DIG dépend de la concentration de la sonde marquée à la DIG dans la réaction d′hybridation, ainsi que de la durée de la réaction de coloration.

Application

Le kit de marquage et de détection d′ADN à la DIG est employé dans diverses techniques d′hybridation :
  • Southern blotting
  • Northern blotting
  • Dot blots
  • Criblage de colonies/plaques
Les hybrides marqués à la DIG sont détectés avec un conjugué anti-DIG-phosphatase alcaline et les substrats NBT (sel de nitrobleu de tétrazolium) et BCIP (5-bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate, sel de toluidine), qui forment un précipité bleu clair.

Conditionnement

1 kit contenant 10 composants

Notes préparatoires

Concentration de travail : Dilution des anticorps au 1/5 000e

Autres remarques

Produit destiné uniquement à la recherche en sciences de la vie. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.

Composants de kit seuls

Réf. du produit
Description
  • Unlabeled Control DNA 1 100 µg/ml
  • Unlabeled Control DNA 2 200 µg/ml
  • DNA Dilution Buffer
  • DIG-labeled Control DNA 5.2 µg/ml
  • Hexanucleotide Mix 10x concentrated
  • dNTP Labeling Mixture 10x concentrated
  • Klenow Enzyme, Labeling grade 2 U/µl
  • Anti-digoxigenin-AP-conjugate antibody 750 U/ml
  • NBT/BCIP Concentrated Stock Solution
  • Blocking Reagent
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Code de la classe de stockage

13 - Non Combustible Solids

Classe de danger pour l'eau (WGK)

WGK 3

Point d'éclair (°F)

does not flashNot applicable

Point d'éclair (°C)

does not flashNot applicable

Certificats d'analyse (COA)

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