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MAB3560

Sigma-Aldrich

Anticorps anti-8-oxoguanine, clone 483.15

ascites fluid, clone 483.15, Chemicon®

Synonyme(s) :

8-oxoG

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About This Item

Code UNSPSC :
12352203
eCl@ss :
32160702
Nomenclature NACRES :
NA.41

Source biologique

mouse

Niveau de qualité

Forme d'anticorps

ascites fluid

Type de produit anticorps

primary antibodies

Clone

483.15, monoclonal

Espèces réactives

monkey, human, primate

Réactivité de l'espèce (prédite par homologie)

mouse, rat

Fabricant/nom de marque

Chemicon®

Technique(s)

ChIP: suitable
ELISA: suitable
immunocytochemistry: suitable

Isotype

IgM

Conditions d'expédition

dry ice

Modification post-traductionnelle de la cible

unmodified

Informations sur le gène

human ... OGG1(4968)

Description générale

La 8-oxoguanine est un produit mutagène résultant de l′endommagement oxydatif de la guanine. La base endommagée par voie oxydative qu′est la 8-oxoguanine est générée dans l′ADN de tous les organismes vivants par la présence d′espèces réactives de l′oxygène dans les cellules. L′endommagement de l′ADN menace la viabilité de l′information génétique stockée dans chaque molécule d′ADN ; il existe toutefois dans les cellules des enzymes qui protègent de l′effet mutagène de cette lésion. La 8-oxoguanine est l′une des lésions de l′ADN dues au stress oxydatif les plus abondantes et les mieux caractérisées. On estime qu′environ 180 guanines par cellule de mammifère et par jour sont oxydées en 8-oxoG. La 8-oxoG est une lésion apparentée à une erreur de codage qui peut provoquer des mutations du type transversion de G/C en T/A ou de T/A en G/C. Cette lésion s′accumule dans l′ADN avec l′âge. Elle a été vaguement reliée à plusieurs cancers et maladies, tels que la maladie d′Alzheimer et la maladie de Parkinson.

Spécificité

8-oxoguanine. Dans un test ELISA par compétition, l′anticorps monoclonal n′a montré aucune réactivité pour les composés dGMP, dAMP, dCMP ou TMP aux concentrations micromolaires. Une compétition n′a été observée que lorsque les concentrations ont été augmentées jusqu′à la plage millimolaire.

Immunogène

8-Oxoguanine adsorbée sur de l′alumine.

Application

Immunocytochimie :
Sur des cellules HeLa et Cos7 fixées au paraformaldéhyde. La 8-oxoguanine a été localisée dans le noyau des cellules privées de nutriments.

Test ELISA :
Des cellules cultivées sur des lames ont subi deux extractions successives par une solution refroidie de NaCl 560 nM / Triton X-100 à 0,1 % (v/v) / SDS à 0,02 % (p/v) / tampon phosphate 10 mM à pH 7,4 puis fixées à température ambiante pendant 5-20 minutes avec du PFA à 4 % préparé de frais. {Conlon, KA et al (2000) J. Histotechnology 23(1):37-44}. Une coloration typique montre que les noyaux des cellules extraites présentent une périphérie et des zones bien définies de chromatine condensée. Le marquage obtenu avec le clone 483.15 a montré une coloration fluorescente spécifique mais pale au niveau des noyaux de cellules incubées dans du DMEM supplémenté. Dans des cellules incubées dans une solution saline de composition définie et exempte de nutriments (NFDSS) {chlorure de calcium 1,8 mM, NaCl 110 mM, bicarbonate de sodium 44 mM, pH 7,5}, le clone a généré une forte coloration fluorescente nucléaire à l′aspect ponctué et uniformément distribué. La coloration fluorescente disparaît jusqu′au niveau du bruit de fond dans les cellules incubées dans un milieu contenant des nutriments, même après un traitement initial au NFDSS {Conlon et al}.

Un précédent lot de cet anticorps a été utilisé dans un test ELISA.

Il revient à l'utilisateur final de déterminer les dilutions de travail optimales.
L'anticorps anti-8-oxoguanine, clone 483.15, permet de détecter les niveaux de 8-oxoguanine ; son utilisation a été publiée et validée en ElISA et IC.

Qualité

Produit évalué en routine par immunocytochimie sur des cellules NIH/3T3.

Immunocytochimie :
Analyse confocale par fluorescence de cellules NIH/3T3 à l'aide de l'anticorps monoclonal de souris anti-8-oxoguanine.

Forme physique

IgM monoclonale de souris non purifiée en solution dans un tampon sans conservateur.

Stockage et stabilité

Stable pendant 6 mois à -20 ºC en aliquotes non diluées à partir de la date de réception.
Recommandations relatives à la manipulation du produit : Dès réception, et avant retrait du bouchon, centrifuger le flacon et mélanger délicatement la solution. Répartir en aliquotes dans des microtubes à centrifuger et conserver ces derniers à -20 °C. Éviter les congélations/décongélations répétées, qui peuvent détériorer les IgM et nuire aux performances du produit.

Remarque sur l'analyse

Témoin
Cellules HeLa ou Cos7 en manque de nutriments

Autres remarques

Concentration : Pour connaître la concentration spécifique du lot, veuillez vous référer au certificat d′analyse.

Informations légales

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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Code de la classe de stockage

10 - Combustible liquids

Classe de danger pour l'eau (WGK)

nwg

Point d'éclair (°F)

Not applicable

Point d'éclair (°C)

Not applicable


Certificats d'analyse (COA)

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