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HTS134M

Sigma-Aldrich

Préparation de membrane ChemiSCREEN Récepteur humain recombinant de la famille GIP Glucagon

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About This Item

Code UNSPSC :
41123201
eCl@ss :
32161000

Description

GPCR Class B
protein target GIP

Niveau de qualité

Technique(s)

radioligand binding assay (RLBA): suitable

Numéro d'accès UniProt

Informations sur le gène

human ... GIPR(2696)

Description générale

FONCTION : SwissProt : réf. P48546. Il s'agit d'un récepteur du GIP. L'activité de ce récepteur est médiée par les protéines G, qui activent l'adénylyl cyclase.
TAILLE : 466 acides aminés ; 53 157 Da
EMPLACEMENT SUBCELLULAIRE : membrane cellulaire ; protéine membranaire multipassages.
SIMILARITÉ : SwissProt : réf. P48546. Appartient à la famille des récepteurs 2 couplés à la protéine G.

Application

Essai de liaison du radioligand

Forme physique

En solution dans le tampon de conditionnement : 50 mM Tris pH 7,4, 10 % glycérol et 1 % sérum albumine bovine sans conservateur. Méthode d'emballage : Les protéines membranaires ont été ajustées à la concentration indiquée dans le tampon d'emballage, rapidement congelées et stockées à -80 °C.

Stockage et stabilité

Conserver à -80 °C. Le produit est stable pendant au moins 6 mois à compter de la date de réception s'il est stocké conformément aux instructions. Ne pas décongeler et recongeler.

Remarque sur l'analyse

Les membranes sont mélangées à un ligand radioactif et à un concurrent non marqué (voir les Figures 1 et 2 pour les concentrations testées) dans un tampon de liaison dans une plaque de 96 puits sans liaison, et incubées pendant 1 à 2 heures. Avant la filtration, une plaque Harvest FC de 96 puits (Millipore réf. MAHFC1H) est enduite de polyéthylèneimine à 0,33 % pendant 30 minutes, puis lavée avec 50 mM HEPES, pH 7,4, 0,5 % sérum albumine bovine. La réaction de liaison est transférée sur la plaque de filtration et lavée 3 fois (1 ml par puits et par lavage) avec du tampon de lavage. La plaque est séchée et comptée.
Tampon d'hybridation : 50 mM HEPES, pH 7,4, 5 mM MgCl2, 1 mM CaCl2, 0,2 % sérum albumine bovine, filtré et stocké à 4 °C
Radioligand : [125I] GIP (Perkin Elmer réf. : NEX-402)
Tampon de lavage : 50 mM HEPES, pH 7,4, 500 mM NaCl, 0,1 % sérum albumine bovine, filtré et stocké à 4 °C.
Un pack contient suffisamment de membranes pour au moins 200 essais (unités), une unité étant la quantité de membrane qui permet d'obtenir un rapport signal/bruit de fond supérieur à 8 avec du GIP marqué à l'iode 125 (I125) à 0,2 nM

Clause de non-responsabilité

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Code de la classe de stockage

12 - Non Combustible Liquids

Classe de danger pour l'eau (WGK)

WGK 2


Certificats d'analyse (COA)

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