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Millipore

Kit ReBlot Plus

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About This Item

Code UNSPSC :
12161503
eCl@ss :
32161000

Fabricant/nom de marque

Chemicon®
Re-Blot

Niveau de qualité

Technique(s)

western blot: suitable

Méthode de détection

chemiluminescent

Conditions d'expédition

wet ice

Description générale

Le western blotting est une technique couramment utilisée pour étudier la fonction et la localisation des protéines. En général, des échantillons de protéines sont séparés par électrophorèse sur gel de polyacrylamide en présence de dodécylsulfate de sodium (SDS-PAGE) et transférés sur une membrane telle qu'une membrane de nitrocellulose ou de nylon, où ils sont incubés avec des anticorps spécifiques. À la différence des technologies d'identification des acides nucléiques (southern blotting et northern blotting) qui permettent de réutiliser les membranes de transfert, les membranes de western blotting sont difficilement réutilisables.

La déshybridation et la réhybridation des membranes de western blotting présentent plusieurs avantages :

1) Préservation des échantillons onéreux ou uniquement disponibles en quantités limitées ;

2) Analyse d'une membrane de transfert avec plusieurs anticorps différents, par exemple des anticorps spécifiques d'un sous-type ou d'une isoforme ;

3) Réanalyse des résultats aberrants et confirmation avec le même anticorps ou un anticorps différent ;

4) Correction des erreurs d'incubation avec le mauvais anticorps ;

5) Économies de réactifs et gain de temps grâce à la réutilisation de la même membrane de transfert.

Si des matrices d'immunoaffinité anticorps/antigène comme des conjugués immobilisés sur Sepharose ont été réutilisées plusieurs fois sans compromettre la réactivité entre l'antigène et l'anticorps, la nécessité de travailler à des pH extrêmes et d'utiliser des agents chaotropiques empêche d'appliquer ce principe à la technique de western blotting.

Le kit de recyclage de western blots MILLIPORE Re-Blot Plus contient des solutions spécialement formulées pour retirer rapidement et efficacement les anticorps des membranes de western blotting sans affecter significativement les protéines immobilisées.

Voici quelques-uns des avantages du kit de recyclage de western blots Re-Blot Plus :

  • La solution de déconjugaison des anticorps ne contient pas de β-mercaptoéthanol, liquide à l'odeur nauséabonde.
  • La déconjugaison des anticorps s'effectue à température ambiante. Il n'est pas nécessaire de chauffer les membranes de transfert.
  • Les anticorps peuvent être déshybridés des membranes en environ 15 minutes à température ambiante.
  • Les membranes de transfert peuvent être réutilisées au bout de 25 minutes.

Application

Le kit de recyclage de western blots MILLIPORE Re-Blot Plus est efficace pour retirer les anticorps des membranes de western blotting préalablement révélées par chimioluminescence ou à l'iode radioactif (ou d'autres isotopes). Il n'est pas recommandé pour la déshybridation des substrats colorimétriques (tétraméthylbenzidine, diaminobenzidine, 4-chloronaphtol, etc.). En effet, il n'est pas possible de retirer efficacement les substrats qui précipitent au niveau du siège de la réaction.

Le kit de recyclage de western blots MILLIPORE Re-Blot Plus ne doit être utilisé qu'à des fins qualitatives tant qu'il n'a pas été confirmé, par western blotting comparatif, que la déconjugaison n'affecte pas quantitativement un antigène donné.

Ce produit est uniquement destiné à la recherche et ne saurait être utilisé à des fins de diagnostic ou in vivo.

Composants

Solution de déconjugaison des anticorps Mild (douce) concentrée 10 × (1 flacon de 50 ml)

Solution de déconjugaison des anticorps Strong (forte) concentrée 10 × (1 flacon de 50 ml)

Stockage et stabilité

Les composants du kit doivent être maintenus à 4 °C dès réception. Le produit reste stable pendant 3 à 6 mois à compter de la date de réception. Si la solution de déconjugaison des anticorps cristallise au stockage, il est possible de la redissoudre en la chauffant légèrement à 37 °C avant utilisation.

Remarque : Pour éviter la dégradation du réactif pendant le stockage, veiller à ce que le bouchon soit hermétiquement fermé. Éviter toute exposition prolongée à l'air.

Informations légales

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Re-Blot is a trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Sepharose is a trademark of Cytiva

Pictogrammes

Skull and crossbonesCorrosionEnvironment

Mention d'avertissement

Danger

Classification des risques

Acute Tox. 3 Dermal - Acute Tox. 3 Inhalation - Acute Tox. 4 Oral - Aquatic Chronic 2 - Eye Dam. 1 - Met. Corr. 1 - Skin Corr. 1A

Code de la classe de stockage

6.1C - Combustible acute toxic Cat.3 / toxic compounds or compounds which causing chronic effects


Certificats d'analyse (COA)

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Marina Pizzi et al.
Molecular and cellular neurosciences, 25(2), 301-311 (2004-03-17)
We investigated the effects of IL-6 and a chimeric derivative of IL-6 and soluble IL-6 receptor (IL6RIL6 chimera) on excitotoxic injury in rat organotypic hippocampal slices. Brief application of N-methyl-d-aspartate (NMDA) induced astrocyte reactivity, neuron cell death, and oligodendrocyte degeneration
Silvia Luotti et al.
Neurobiology of disease, 139, 104815-104815 (2020-02-23)
Amyotrophic lateral sclerosis (ALS) is a fatal motor neuron disease for which there are no validated biomarkers. Previous exploratory studies have identified a panel of candidate protein biomarkers in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) that include peptidyl-prolyl cis-trans isomerase A
Jo-Anne Chan et al.
PloS one, 14(9), e0221733-e0221733 (2019-09-11)
The development of effective malaria vaccines remains a global health priority. Currently, the most advanced vaccine, known as RTS,S, has only shown modest efficacy in clinical trials. Thus, the development of more efficacious vaccines by improving the formulation of RTS,S
Tingting Chen et al.
The Journal of clinical investigation, 130(4), 1808-1822 (2020-01-15)
A better understanding of all immune components involved in protecting against Mycobacterium tuberculosis infection is urgently needed to inform strategies for novel immunotherapy and tuberculosis (TB) vaccine development. Although cell-mediated immunity is critical, increasing evidence supports that antibodies also have
Nicoletta Filigheddu et al.
Molecular biology of the cell, 18(3), 986-994 (2007-01-05)
Ghrelin is an acylated peptidyl gastric hormone acting on the pituitary and hypothalamus to stimulate appetite, adiposity, and growth hormone release, through activation of growth hormone secretagogue receptor (GHSR)-1a receptor. Moreover, ghrelin features several activities such as inhibition of apoptosis

Protocoles

This page shows and discusses three protocols for stripping and reprobing a western blot membrane.

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