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P2069

Fenol:cloroformo:alcohol isoamílico 25:24:1, saturado con Tris 10 mM, pH 8,0, EDTA 1 mM

Supplied with Equilibration buffer, Molecular Biology

Sinónimos:

DNA extraction

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100 mL

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Acerca de este artículo

NACRES:
NA.52
UNSPSC Code:
12190000
Assay:
≥99.0%
Grade:
Molecular Biology

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grade

Molecular Biology

Quality Segment

assay

≥99.0%

form

liquid

pH

6.5-6.9(pH of phenolic phase), 7.8-8.2(pH of phenolic phase after the addition of Equilibration Buffer)

application(s)

agriculture

storage temp.

2-8°C

Application

El fenol:cloroformo:alcohol isoamílico se ha utilizado en la preparación de ARN para el estudio del aislamiento del ARN total de biopsias de miocardio.[1] Se ha utilizado para extraer ADN durante el ensayo de clonalidad del receptor de andrógenos humano (HUMARA).[2]
Para aplicaciones que requieren un pH superior, como el aislamiento de ADN genómico intacto grande, se recomienda añadir el tampón de equilibrado.
Se estudió el uso de este lote de fenol:cloroformo:alcohol isoamílico 25:24:1 mediante extracción de una preparación cruda de ADN pBR322 de E. coli. Según la evaluación mediante electroforesis en gel de agarosa, el ADN extraído no estaba degradado ni se redujo su concentración. Se aplicó el mismo procedimiento al ADN pBR322 purificado y al ADN lambda digerido por Hind III. Según la evaluación electroforética, las preparaciones purificadas no fueron detectablemente degradadas ni se redujo su concentración.

Packaging

Suministrado con P3803 y una botella separada de tampón de equilibrado para ajustar la fase fenol a pH 8,0 ± 0,2.

Preparation Note

Añadir todo el contenido de la botella pequeña de tampón de equilibrado a la botella grande de fenol:cloroformo:alcohol isoamílico. Mezclar suavemente y permitir que las fases se separen antes de usarlo, aproximadamente 2 - 4 horas. Esto ajustará el pH de la disolución de fenol desde pH 6,7 ± 0,2 hasta 8,0 ± 0,2.

Other Notes

Después de añadir el tampón de equilibrado, el producto es estable durante 6 meses, en comparación con los 2 años si no se añade el tampón. El almacenamiento a -20 °C protegido de la luz prolonga la caducidad hasta más de 1 año después de añadir tampón de equilibrado.

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P3803P1944P4682
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Quality Level

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Molecular Biology

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Molecular Biology

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Molecular Biology

application(s)

agriculture

application(s)

agriculture

application(s)

life science and biopharma

application(s)

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liquid

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liquid

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liquid

form

liquid

pH

6.5-6.9(pH of phenolic phase), 7.8-8.2(pH of phenolic phase after the addition of Equilibration Buffer)

pH

6.5-6.9(pH of phenolic phase)

pH

4.3-4.7

pH

4.1-4.5 (25 °C)


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signalword

Danger

Hazard Classifications

Acute Tox. 3 Oral - Acute Tox. 4 Dermal - Acute Tox. 4 Inhalation - Aquatic Chronic 2 - Carc. 2 - Eye Dam. 1 - Muta. 2 - Repr. 2 - Skin Corr. 1B - STOT RE 1 Oral - STOT RE 2 - STOT SE 3

target_organs

Central nervous system, Liver,Kidney, Nervous system,Kidney,Liver,Skin

Clase de almacenamiento

6.1A - Combustible acute toxic Cat. 1 and 2 / very toxic hazardous materials

wgk

WGK 3

flash_point_f

Not applicable

flash_point_c

Not applicable


Listados normativos

Los listados normativos se proporcionan para los productos químicos principalmente. Para los productos no químicos sólo se puede proporcionar información limitada. Si no hay ninguna entrada, significa que ninguno de los componentes está en la lista. Es obligación del usuario garantizar el uso seguro y legal del producto.

67-66-3

CAS No.


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Preguntas

1–8 de 8 Preguntas  
  1. Hello, I used P2069 for DNA extraction from mouse tails. After adding the equilibration buffer, I wait for 2~4hrs until phase seperation. At this point, I have a question. I heard that lower phase is the phase I utilize, so Can I aliquot the lower phase?

    1 respuesta
    1. The contents of the Tris base are added to the phenol:chloroform:isoamyl alcohol mixture, and the contents are well mixed. The amount added is 6.5 mL equilibration buffer per 100 mL phenol, designed so that only one treatment is necessary to raise the pH. Allow the mixture to separate, which may take 2-4 hours. The upper aqueous phase is removed and discarded. The remaining lower organic phase is divided into aliquots and stored at -20 °C. The solution should be stable for up to 12 months. The pH of the phenol should be raised from 6.7 to about 7.9-8. Only one treatment is needed.

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  2. Hello, I used this material for DNA extraction from mouse tail. After mixing the equilibration buffer, there was two phase. Which phase should I use? Also, Can I aliquot the liquid?

    1 respuesta
    1. The lower phase should be used for DNA extraction. It is possible to aliquot the liquid immediately after mixing, before the phases separate.

      ¿Le ha resultado útil?

  3. After equilibrating with the supplied Tris buffer, can I aliquot this for use, if so, should I just top each aliquot with additional Tris pH 8?

    1 respuesta
    1. Please see the link below to review the product datasheet. Note that the prepration instructions require the addition of the entire vial (6.5 mL) of equilabration buffer to the contents of the product. Aliquot immediately after the gentle mixing step. During the 2 - 4 hour incubation period the mixure will phase separate. At this point the aliquots may be stored for long term use according to the instructions.
      https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/144/892/p2069dat.pdf

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  4. There is an Equilibration Buffer (Product B5658) that is included with Product P2069, Phenol:Chloroform:Isoamyl Alcohol 25:24:1.  Is B5658 also available separately?

    1 respuesta
    1. No, it is only available as part of P2069.

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  5. I see that you list two equilibrated Phenol:Chloroform:Isoamyl alcohol products. When should I use Product P3803, and when should I use Product P2069?

    1 respuesta
    1. In short, P3803 is for RNA work, and P2069 is for DNA work. Product P2069 consists of one bottle of Product P3803 and one bottle of Product B5658. The B5658 is added to the P3803 to raise the pH of the organic phase from 6.7 to 8.0; pH 8.0 is not suitable for RNA work, because RNA can degrade at the higher pH.

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  6. I ordered Product P2069, Phenol:Chloroform:Isoamyl Alcohol 25:24:1; I got one bottle of the Phenol:Chloroform:Isoamyl Alcohol and one bottle of B5658, Equilibration buffer. When and how am I supposed to use the B5658?

    1 respuesta
    1. B5658 is a Tris buffer that is used to raise the pH of the phenol:chloroform:isoamyl alcohol mixture, to make it suitable for isolation of genomic DNA. The contents of the two bottles need to be well mixed. Then allow the mixture to separate; this may take 2-4 hours. This procedure should raise the pH of the phenol phase from 6.7 to about 8.0.  Only one "treatment" is needed. This solution should be stable for up to 12 months.

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  7. What is the Department of Transportation shipping information for this product?

    1 respuesta
    1. Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product.

      ¿Le ha resultado útil?

  8. There are two layers in the bottle of Product P2069, Phenol:Chloroform:Isoamyl Alcohol 25:24:1; which layer should I use?

    1 respuesta
    1. The lower phase is the phase that is to be used.

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