A2547

Anti-actina, α-músculo liso monoclonal

clone 1A4, ascites fluid

• Sinónimos: SMA
• Código UNSPSC: 12352203
• NACRES: NA.41

Propiedades

• origen biológico: mouse
• conjugado: unconjugated
• forma del anticuerpo: ascites fluid
• tipo de anticuerpo: primary antibodies
• clon: 1A4, monoclonal
• mol peso: antigen ~42 kDa
• contiene: 15 mM sodium azide
• reactividad de especies: human, mouse, rat, chicken, frog, canine, rabbit, guinea pig, goat, bovine, sheep, snake
• técnicas: immunohistochemistry (formalin-fixed, paraffin-embedded sections): suitable using smooth muscle cells; immunohistochemistry (frozen sections): suitable using smooth muscle cells; indirect immunofluorescence: 1:400 using blood vessels in sections of human appendix; western blot: suitable using smooth muscle cells
• isotipo: IgG2a
• Nº de acceso UniProt: P62736
• aplicaciones: research pathology
• Condiciones de envío: dry ice
• temp. de almacenamiento: −20°C
• modificación del objetivo postraduccional: unmodified
• Información sobre el gen: human ... ACTA2(59) ; mouse ... Acta2(11475) ; rat ... Acta2(81633)

Descripción

Descripción general

El anticuerpo (también conocido como anti-α-Sm-1) es específico para la isoforma α-actina de músculo liso. Reacciona de manera específica con la α-actina del músculo liso en análisis de inmunotransferencia y marca las células del músculo liso en cortes de tejido incluidas en parafina congeladas o fijadas con formalina.

Las actinas son proteínas citoesqueléticas que regulan la motilidad celular. Diversas proteínas de andamiaje, comunicación y unión a la actina regulan las interconversiones entre las actinas filamentos F sanas y las actinas monómeras G. Las actinas celulares de varias especies tienen propiedades físicas e inmunológicas muy similares. Por consiguiente, el uso de anticuerpos monoclonales frente a la actina proporciona una herramienta específica y útil para estudiar la localización, la estructura y la función de las proteínas actina. La actina 2 (ACTA2), la actina del músculo liso está codificada en el cromosoma humano 10q23.31.
El anticuerpo monoclonal de ratón anti-α-actina de músculo liso se une a la actina de humanos, ratón, rata, bovinos, pollo, ranas, cabras, conejillos de indias, conejos, perros, ovejas y serpientes.
El anticuerpo monoclonal anti-α actina de músculo liso (isotipo IgG2a de ratón) se obtiene del hibridoma producido por la fusión de células de mieloma de ratón y esplenocitos de una ratón inmunizado. Se utilizó el decapéptido sintético NH2 terminal de la α-actina de músculo liso acoplado con hemocianina de lapa de ojo de cerradura (KLH) como inmunógeno. El isotipo se determinó utilizando el kit ImmunoTypeTM Sigma (Sigma Stock No. ISO-1) y mediante un inmunoanálisis de difusión doble utilizando reactivos de isotipado de anticuerpos monoclonales de ratón (Sigma nº de ISO-2).

Especificidad

El anticuerpo monoclonal anti-α actina de músculo liso es específico de la isoforma α-actina. Reacciona de manera específica con una actina del músculo liso utilizando inmunotransferencia y marcaje mediante inmunofluorescencia indirecta de cortes de tejido incluidos en parafina o congelados y fijados en formalina. El anticuerpo puede utilizarse para la localización inmunocitoquímica de la α actina del músculo liso por medio de técnicas de inmunoperoxidasa, inmunofluorescencia, ELISA o inmunotransferencia. El anticuerpo reacciona en humanos, ratón, rata, bovinos, pollo, ranas, cabras, conejillos de indias, conejos, perros, ovejas y serpientes.

Inmunógeno

Decapéptido N-terminal sintético de la α-actina de músculo liso.

Aplicación

El anticuerpo monoclonal de ratón anti-α-actina del músculo liso se ha utilizado para análisis mediante western blot utilizando homogeneizados de riñón completo en células de cáncer tiroideo anaplásico humano. El producto se ha utilizado para análisis de inmunohistoquímica utilizando cortes de tejido de ratón, de hígado y uterinos.
El anticuerpo monoclonal anti-α-actina de músculo liso se ha utilizado en la detección de actina 2 en fibroblastos de mama utilizando tinción de inmunofluorescencia.

Se realizó inmunocitoquímica en células de músculo liso de aortas bovinas utilizando el anticuerpo monoclonal anti-ACTA2. Las células se cultivaron primero en cubreobjetos de vidrio y se fijaron en acetona al 50%/EtOH durante 10 minutos a 4 grados.

Se tiñeron inmunohistoquímicamente cortes incluidos en parafina de injertos de tejido testicular de rata con anticuerpos monoclonales anti-actina de músculo liso.
Se realizó análisis mediante IHC de tejido cardiaco de ratón teñido con x-gal utilizando el anticuerpo monoclonal primario anti-actina de músculo liso de ratón para identificar los miofibroblastos.

Acciones bioquímicas o fisiológicas

La actina es una de las proteínas eucariotas más conservadas; se expresa en mamíferos y aves como seis isoformas caracterizadas por electroforesis y análisis de secuencia de aminoácidos. Cuatro de las seis isoformas constituyen marcadores de diferenciación de los tejidos musculares. Las isoformas de la actina muestran >90 % de homología de secuencia total, pero sólo un 50-60% de homología en sus 18 residuos NH2-terminales. La región NH2 terminal de la actina parece una importante región antigénica y puede intervenir en la interacción de la actina con otras proteínas como la miosina. Se ha demostrado que la proporción relativa de las isoformas de la actina son diferentes en los músculos lisos de órganos diferentes y cambian dentro de la misma población de células de músculo liso durante el desarrollo, en situaciones patológicas y en condiciones de cultivo diferentes.
Mutaciones en la actina 2 se asocian con una disfunción de los músculos lisos de las arterias y están implicadas en ciertas coronariopatías. Mutaciones en ACTA2 contribuyen al desgarro y agrandamiento de la aorta en los aneurismas de la aorta torácica (TAAD).

Forma física

El anticuerpo se suministra como un líquido ascítico que contiene acida sódica 15 mM como conservante.

Almacenamiento y estabilidad

Para su uso continuo, debe conservarse entre 2 y 8 °C durante un máximo de un mes. Para una conservación prolongada, la disolución puede congelarse en alícuotas de trabajo. No se recomienda congelar y descongelar repetidamente. Si aparece una turbidez ligera tras una conservación prolongada, clarifique mediante centrifugación antes de su uso.

Otras notas

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Información de seguridad

• Código de clase de almacenamiento: 10 - Combustible liquids
• Clase de riesgo para el agua (WGK): WGK 1
• Punto de inflamabilidad (°F): Not applicable
• Punto de inflamabilidad (°C): Not applicable