MABT345

Anticuerpo anti-prelamina-A, clon 7G11

clone 7G11, from rat

• Sinónimos: Prelamin-A/C, Prelamin-A, Lamin-A/C
• Código UNSPSC: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Propiedades

• origen biológico: rat
• Nivel de calidad: 100
• forma del anticuerpo: purified antibody
• tipo de anticuerpo: primary antibodies
• clon: 7G11, monoclonal
• reactividad de especies: mouse
• técnicas: immunofluorescence: suitable; western blot: suitable
• isotipo: IgG2aκ
• Nº de acceso NCBI: NP_001002011
• Nº de acceso UniProt: P48678
• Condiciones de envío: wet ice
• modificación del objetivo postraduccional: unmodified
• Información sobre el gen: mouse ... Lmna(16905)

Descripción

Descripción general

La lamina-A es un componente clave de la lamina nuclear, una red de proteínas subyacente a la membrana interna que determina la forma y el tamaño del núcleo. El mismo gen (Lmna, Dhe o Lamn1 en especies murinas; ID del gen 16905) que codifica la lamina-A también codifica las isoformas de la prelamina-C empalmadas alternativamente (UniProt P48678-2 y P48678-3). La lamina-A murina (UniProt P48678-1) se produce inicialmente como una prelamina A de 665 aminoácidos que termina en un motivo CAAX. Es procesada luego, después de la traducción, mediante cuatro pasos enzimáticos para producir la lamina-A madura. La farnesilación de la Cys662, la escisión endoproteolítica de los tres últimos aminoácidos (a.a. 663-665), la carboxilmetilación de la Cys662 y la eliminación endoproteolítica final de la secuencia propeptídica remanente (a.a. 648-662), incluida la Cys662 farnesilada, catalizadas por la metaloproteinasa de zinc de la membrana del retículo endoplásmico, la ZMPSTE24.

Especificidad

El clon 7G11 detecta la prelamina-A con independencia de su estado de farnesilación, pero no la lamina-A madura (a.a. 1-647) carente de la secuencia C-terminal del propéptido. El clon 7G11 no detecta las formas premaduras o maduras de las isoformas empalmadas C1 y C2 (Lamina-C; P48678-2 y P48678-3).

Inmunógeno

Epítopo: Secuencia C-terminal del propéptido

Péptido lineal correspondiente a la secuencia C-terminal del propéptido de la prelamina-A de ratón.

Aplicación

Análisis mediante inmunoelectrotransferencia (WB): 0,5 µg/ml de este anticuerpo detectó acumulación de prelamina A inducida por el tratamiento con inhibidores de la farnesiltransferasas (FTI) durante 2 días (5 µM; art 344550) en lisado de células C2C12.
Análisis mediante inmunofluorescencia: Un lote representativo detectó aumento de la inmunorreactividad de la prelamina A en queratinocitos, pero no en fibroblastos dérmicos mediante inmunohistoquímica fluorescente, utilizando cortes de piel fijados con paraformaldehído e incluidos en parafina de ratones con desactivación de Fntb específico de queratinocitos, mientras que se observó aumento de la prelamina A tanto en queratinocitos como en fibroblastos dérmicos de ratones con desactivación Zmpste24 inespecífico de tejido o tipo celular (Lee, R., et al (2010). Hum. Mol. Genet.19(8):1603-1617.).
Análisis mediante inmunofluorescencia: Un lote representativo tiñó el borde nuclear de los hepatocitos mediante inmunohistoquímica fluorescente utilizando cortes hepáticos congelados fijados con metanol y permeabilizados con Tween de una cepa de ratón transgénico que produce sólo la prelamina-A no farnesilada C662S (nPLAO/nPLAO) y nada de lamina-C, mientras que el nivel de prelamina-A celular era indetectable en cortes de hígado de ratones silvestres o de una cepa de ratón que produce sólo prelamina-A nativa (PLAO/PLAO) y no lamina-C (Davies, B.S., et al (2010). Hum. Mol. Genet. 19(13):2682-2694).
Análisis mediante inmunoelectrotransferencia: Un lote representativo detectó acumulación celular de prelamina-A tras el tratamiento con inhibidor de la farnesiltransferasa (FTI) en fibroblastos murinos. El clon 7G11 detecta selectivamente la prelamina-A, pero no la lamina-A madura ni la lamina-C (Lee, R., et al (2010). Hum. Mol. Genet.19(8): 1603-1617).
Nota: En condiciones normales, el nivel de prelamina A celular está por debajo de la detección. Cualquier prelamina-A recién producida se procesa rápidamente para producir lamina-A madura. La actividad farnesiltransferasa celular y/o ZMPSTE24 debe ser inhibida (por inactivación genética o tratamiento inhibidor) para permitir la detección de la prelamina-A celular con anticuerpos

Categoría de investigación
Estructura celular

Este anticuerpo anti-prelamina-A, clon 7G11, está validado para utilizar en inmunofluorescencia e inmunoelectrotransferencia (Western blotting) para la detección de prelamina-A.

Subcategoría de investigación
Adherencia (CAM)

Calidad

Evaluada mediante inmunotransferencia Western en lisado de células RAW264.7.

Análisis mediante inmunoelectrotransferencia (Western blot): 0,5 µg/ml de este anticuerpo detectaron acumulación de prelamina A inducida por el tratamiento con inhibidores de la farnesiltransferasas (FTI) durante 2 días (5 µM; art 344550) en macrófagos RAW 264.7 de ratón.

Descripción de destino

~74 kDa observados. Este anticuerpo detecta la prelamina de la forma A pero no detecta la isoforma C.

Forma física

Anticuerpo IgG2aκ monoclonal de rata purificado en tampón que contiene Tris-glicina 0,1 M (pH 7,4), NaCl 150 mM con acida sódica al 0,05 %.

Presentación: Purificada

Proteína G purificada

Almacenamiento y estabilidad

Estable durante 1 año a 2-8°C desde la fecha de recepción.

Otras notas

Concentración: Consulte la ficha técnica específica del lote.

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Información de seguridad

• Código de clase de almacenamiento: 12 - Non Combustible Liquids
• Clase de riesgo para el agua (WGK): WGK 1
• Punto de inflamabilidad (°F): Not applicable
• Punto de inflamabilidad (°C): Not applicable